Structural differences in various divisions of the rabbit colon were investigated using light and scanning electron microscopy. For light microscopic study, various Portions of the colon from seven rabbits (2.5 kg body weight) were fixed in 10% neutral buffered formalin, and paraffin sections were stained with hematoxylin-eosin. Tissues for scanning electron microscopy were fixed in 1% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde and postfixed in 1% $OsO_4$, dehydrated to 100% alcohol, transfered to isoamilacetate and dried by the critical point method. Subsequently, specimens were coated with gold and viewed with a JSM-35C scanning electron microscope. The colon displays a morphological diversity along its proximo-distal axis. Five regions can be discerned based on the macroscopic and microscopic characteristics. 1) The first segment immediately distal to the cecocolical junction possessing three teniae is approximately 5 cm ($4{\sim}6cm$) in length, and displays irregular folds of the mucosa oriented transversely similar to those of the cecum. 2) The second segment possessing three teniae is about 7 cm ($5{\sim}8cm$) in length, and is characterized by the papilla-like protrusions on the mucosal surface. 3) The third segment, possessing a single tenia is about 16 cm ($12{\sim}20cm$) in length, and also displays the papilla-like protrusions similar to the aforegoing segment. 4) Fusus coli, approximately 4 cm ($3{\sim}5cm$) in length, is free of teniae and exhibits longitudinal folds on the mucosal surface. These four portions together constitute the proximal colon. 5) The distal colon reaches a length of about 58 cm ($53{\sim}55cm$) and shows a pattern of surface irregularities with minor ridges on the mucosal folds.
The object of this paper was to investigate the histopatological changes on dog's pulp under cavitation by irradiation of the $CO_2$ laser. The subjects were derived from four dogs, and irradiated 113.23 J/$mm^2$, 283.09 J/$mm^2$, 566.08 J/$mm^2$ in Group I, II, and III respectively. The dogs were sacrificed immediately, 24 hour, 72 hour and 1 week after $CO_2$ laser treatment. For light microscopic examination, routine H-E and PAS stains were employed. For electron microscopic observation, the teeth were fixed in 1% paraformaldehyde and 1% glutaraldehyde, decalcified teeth in 10% EDTA were stained by uranyl acetate and lead citrate. The observation was made with a Hitachi H-500 model electron microscope. The following results were obtained in this study: 1. At the early stage of the experimental sub-groups-immediately, 24 hour, 72 hour samples of Group I, II and III-coagulation necrosis and hyperemia were observed in odontoblastic and subodontoblastic pulpal layer. 2. At the 1 week sub-group of Group I, II, regenerative hyperplasia of the odontoblasts without coagulation necrosis were revealed, in addition to thickened predentin. On he other hand coagulation necrosis and atrophic change accompanying with hyperplasia were found at the 1 week sub-group of Group III. 3. Ultrastructurally, the odontoblasts appeared nuclear degeneration, vacuolar change of cytoplasmic organelles and rupture of plasma membrane at the early stage of the experimental period of all groups. 4. Under spectrohelioscopic examination, regenerative odontobalsts were seen at the 1 week specimens of Group I, II and III. 5. The pulpal response occured at 113-566 J/$mm^2$. The pathologic change of pulp tissue occured at the early experimental period but regeneration of odontoblasts could be seen after 1 week.
Gene expression of neuronal nitric oxide synthase (nNOS) changes in the hypothalamic paraventricular nucleus (PVN) depending on feeding conditions, which is decreased during food deprivation and restored by refeeding, and phosphorylated cAMP response element binding protein (pCREB) was suggested to play a role in its regulation. This study was conducted to examine if the fasting-induced down-regulation of the PVN-nNOS expression is restored by activation of cAMP-dependent protein kinase A (cAMP/PKA) pathway. Freely moving rats received intracerebroventricular (icv) injection of cAMP/PKA activator Sp-cAMP (40 nmol) or vehicle (sterilized saline) following 48 h of food deprivation. One hour after drug injections, rats were transcardially perfused with 4% paraformaldehyde, and the PVN tissues were processed for nNOS or pCREB immunohistochemistry. Sp-cAMP significantly increased not only nNOS but also pCREB immunoreactivities in the PVN of food deprived rats. Fastinginduced down-regulation of the PVN-nNOS was restored by 1 h after the icv Sp-cAMP. Results suggest that cAMP/PKA pathway may mediate the regulation of the PVN-nNOS expression depending on different feeding conditions.
This study was attempted to investigate the topographical distribution, shape and immunoreactivity of growth hormone-releasing factor(GRF)- and somatostatin(SOM)-immunoreactive neurons in the hypothalamus of the Korean squirrels(Sciurus vulgalis coreae). For the light microscopical examination of immunohistochemistry, the brains were fixed with 4% paraformaldehyde solution by means of intracardiac perfusion. And the frozen sections($40{\mu}m$ thick) were stained immunohistochemically by ABC method. Distribution of GRF immunoreactive neurons($12-17{\mu}m$) was highest in the paraventricular nucleus, moderate in the periventricular and supraoptic nuclei, and low in the arcuate nucleus and lateral hypothalamic area. Their immunoreactive fibers were found very high in the median eminence, moderately in the supraoptic, paraventricular and periventricular nuclei, and low in the arcuate nucleus and lateral hypothalamic area. SOM immunoreactive perikarya($14-18{\mu}m$) were found moderately in the periventricular nucleus near the subependymal layer of the third ventricle, and low in the arcuate and suprachiasmatic nuclei. SOM immunoreactive fibers were found high in the median eminence, and moderately or low in the arcuate and periventricular nuclei.
In order to observe the anticellulolytic localization in the epithelia of the digestive tract such as esophagus, crop, and intestine of a Korean land snail N. samarangae, a cytochemical method and a immunogold labelling method were applied. For the cytochemical study on the cellulase activity, Benedict reaction method applied. And for the immunocytochemical study, the rabbit serum immunoglobuins (IgG) was obtained from the rabbits injected with cellulase which was extracted from body fluid of the snail. The digestive tract tissues of N. samarangae were fixed with 4% paraformaldehyde and 2% OsO4 and embedded in Lowicryl K4M at -40$^{\circ}C$ under UV light (360 nm). The thin sections were loaded on the nickel grids and stained with the serum IgG and protein A-gold complex (particle size: 10 nm). Observations were undertaken with transmission electron microscope (Jeol, JEM-1010). The epithelium of the digestive tract was consisted of five types of cells. In the cytochemical study, the reaction products were found along the periphery of the vacuoles derived from the Bebedict reaction. In the immunocytochemical study, the protein-A gold particles were selectively labelled in Type 1, Type 3 and Type 4 cells in intestinal tissue. membranes of rER, in the surrounding cytoplasm of the rER and secretory granules, and in the apical cytoplasm of the cells. On the material being secreted from the apical cytoplasm was also labelled with the immunogold particles. The all results obtained throughtout present study suggest that the intestinal epithelium of the snail N. samarangae seretes cellulase as one of digestive enzymes.
This study was performed to comparative investigate the distribution of primary sensory and motor neurons associated with Daereung(PC7) acupoints by using neural tracing technique. A total 16 SD rats were used in the present study. After anesthesia, the rats received microinjection of 6 ㎕ of cholera toxin B subunit(CTB) into the corresponding sites of the acupoints Daereung(PC7), in the human body for observing the distribution of the related primary sensory neurons in dorsal root ganglia(DRGs) and motor neurons in the spinal cord(C3∼T4) and sympathetic ganglia. Three days after the microinjection, the rats were anesthetized and transcardially perfused saline and 4% paraformaldehyde, followed by routine section of the DRGs, sympathetic chain ganglia(SCGs) and spinal cord. Labeled neurons and nerve fibers were detected by immunohistochemical method and observed by light microscope equipped with a digital camera. The labeled neurons were recorded and counted. From this research, the distribution of primary sensory and motor neurons associated with Daereung(PC7) acupoints were concluded as follows. Muscle meridian related Daereung(PC7) controlled by spinal segments of C5∼T1, C6∼T4, respectively.
In preparation of the biological samples for electron microscopy, the chemical fixation by glutaraldehyde, paraformaldehyde, and OsO4 has been generally used for a long time. However, the chemical fixation method has some problems: the infiltration time is a little bit long and the ultrastructure of cell or tissue transforms before complete fixation of sample. So, recently, cryo-fixation is considered more often in biomedical field. In this study, we compared High Pressure Freezing (HPF) method with chemical fixation method using a algal sample (Ptilota filicina J. Agardh), which was difficult to fix using chemical fixation method. In chloroplast, the ultrastructure of thylakoid lamella and phycobilisome can not show clearly by chemical fixation. In this study we could observe the ultrastructure of thylakoid lamella and phycobilisome of chloroplast very clearly using HPF fixation. An improved images of ultrastructures of nucleus, mitochondrion and floridean starch could obtain. These results suggest that HPF method is very useful method in algal specimen for electron microscopy.
Eom, Young Geun;Kim, Sumin;Baek, In-Chan;Kim, Hyun-Joong
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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제33권2호통권130호
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pp.29-39
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2005
Formaldehyde emissions from wood-based panels bonded with pine and wattle tannin-based adhesives, urea-formaldehyde resin (UF), melamine-formaldehyde resin (MF), and co-polycondensed resin of urea-melamine-formaldehyde (UMF) were measured by the Japanese standard method using a desiccator (JIS A 1460) and the EN 120 (European Committee For Standardization, 1991) method using the perforator value. In formaldehyde emission, all particleboards made using the wattle tannin-based adhesive with three different hardeners, paraformaldehyde, hexamethylenetetramine, and tris(hydroxyl)nitromethan (TN), satisfied the requirements of grade $E_1$. But only those made using the pine tannin-based adhesive with the hexamine as hardener met the grade $E_1$ requirements. Hexamine was effective in reducing formaldehyde emission in tannin-based adhesives when used as the hardener. While the UF resin showed a desiccator value of $7.1mg/{\ell}$ and a perforator value of 12.1 mg/100 g, the MF resin exhibited a desiccator value of $0.6mg/{\ell}$ and a perforator value of 2.9 mg/100 g. According to the Japanese Industrial Standard and the European Standard, the formaldehyde emission level of the MDF panels made with UF resin in this study came under grade $E_2$. The formaldehyde emission level was dramatically reduced by the addition of MF resin. The desiccator and perforator methods produced proportionally equivalent results. Gas chromatography, a more sensitive and advanced method, was also used. The samples for gas chromatography were gathered during the experiment involving the perforator method. The formaldehyde contents measured by gas chromatography were directly proportional to the perforator values.
Ultrastructure of mouse thymus was evaluated, following the administration of potassium dichromate and mercuric chloride, the heavy metals of evironmental pollutants. Potassium dichromate (20 mg/kg) or mercuric chloride solutions (10 mg/kg) were subcutanously injected to the mice. Six hours, three days and two weeks after the injections, animals were sacrificed. Thymic tissues were fixed in 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde solutions. The procedure was followed by the fixation in 1% osmium tetroxide solutions. Washed and dehydrated tissue-blocks were embedded in the araldite mixture. Ultra-thin sections were stained with uranyl acetate-lead citrate solutions. Results observed were as follows: 1. In electron microscopy, cortical population of thymocytes in the thymus of experimental groups were reduced. especially in the outer cortex. Subcapsular cortices of potassium dichromate treated mice were filled with many epithelial reticular cells, whereas the similar area of mercuric chloride-treated mice exhibited large intercellular spaces. 2. In the thymus of mercuric chloride treated group, large intercellular spaces were formed by shrinkage of epithelial reticular cells, and the space was invaded by numerous cytoplasmic projections of macrophages. Thymocytes nuded out from the shrunken cytoplasm of epithelial reticular cells, presented numerous microvilli. 3. In the thymus of potassium dicromate treated group, many activated macrophages and plasma cells migrated into thymic cortices. 4. In the perivascular spaces of thymic cortices of potassium dichromate- and mercuric chloride-treated mice, activated macrophages. plasma cells, collagen fibrils, and flocculent substance of exudated materials were exhibited. From the above findifgs, it was concluded that potassium dichromate or mercuric chloride could disturb the normal differentiation or 'education' of T cells in the thymic cortex. In turn, these heavy metals may hurt the immunological defense mechanism.
The purpose of this study was to investigate the main sensory trigeminal nucleus in the aging rat brain by means of electron microscope. Male Sprague-Dawley rats, two (control group) and thirty six (aging group) months of age, were used. These animals were sacrificed by perfusion fixation with 2.5% glutaraldehyde-2.0% paraformaldehyde (0.1M phosphate buffer, pH 7.4) under sodium pentobarbital. The objective area was punched out with a sharp-edged metal cylinder of 0.8 mm in diameter. These blocks of tissue were then washed in 0.1M phosphate buffer, postfixed in 2% osmium tetroxide, dehydrated in a graded series of ethyl alcohol, and embedded in Epon 812. Thin sections were cut with Super Nova ultramicrotome, pick up on grids and double stained with lead citrate and uranyl acetate, and observed in JEOL 100B electron microscope. The results were as follows: 1. In the control group, the neuronal cell body of the main sensory trigeminal nucleus was filled with nucleus, Golgi complex, Nissl substance, mitochondria, microfilaments and microtubules. However, few Nissl substances are seen in neuronal cell body. Axoaxonic synapse, axodendritic synapse, axosomatic synapse, axospinous synapse, myelinated and unmyelinated nerve fibers were well organized around cell bodies. Neurons with abnormal changes were not seen. 2. In the aging group, the neuronal cell body of the main sensory trigeminal nucleus contained large number of lipofuscin granules, dense body and swollen mitochondria. Terminal boutons contained glycogen, crystal-like vesicle and membranous indicating first signs of degeneration. The dendrites were found to be in synaptic contact with altered axon terminals. Frequently axons filled with dark axoplasn and splitted myelin sheath were noticed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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