The stable anchorage of pyridoxal 5'-phosphate (PLP) in the active site of D-amino acid transaminase (D-AT) is crucial for the enzyme catalysis. The three-dimensional structure of D-AT revealed that Glu32 is one of the active site groups that may playa role in PLP binding. To prove the role of Glu32 in PLP stability, we firstly checked the rate of the potential rate-limiting step. The kinetic analysis showed that the rate of the ${\alpha}$-deprotonation step reduced to 26-folds in E32A mutant enzyme. Spectral analyses of the reaction of D-AT with D-serine revealed that the E32A mutant enzyme failed to stabilize the key enzyme-substrate intermediate, namely a quinonoid intermediate (E-Q). Finally, analysis of circular dichroism (CD) on the wild-type and E32A mutant enzymes showed that the optical activity of PLP in the enzyme active site was lost by the removal of the carboxylic group, proving that Glu32 is indeed involved in the cofactor anchorage. The results suggested that the electrostatic interaction network through the groups from PLP, Glu32, His47, and Arg50, which was observed from the three-dimensional structure of the enzyme, plays a crucial role in the stable anchorage of the cofactor to give necessary torsion to the plane of the cofactor-substrate complex.
Journal of the Korean Institute of Telematics and Electronics B
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v.32B
no.12
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pp.1635-1643
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1995
This paper proposes an algorithm for machine recognition of phonemes in continuously spoken Korean. The proposed algorithm is a static strategy neural network. The algorithm uses, at the stage of training neurons, features such as the rate of zero crossing, short-term energy, and either PARCOR or auditory-like perceptual linear prediction(PLP) but not both, covering a time of 171ms long. Numerical results show that the algorithm with PLP achieves approximately the frame-based phoneme recognition rate of 99% for small vocabulary recognition experiments. Based on this it is concluded that the proposed algorithm with PLP analysis is effective in phoneme recognition.
Kim, Young-Sun;Choi, Doo-Il;Park, Sang-Hui;Beack, Seung-Hwa
Proceedings of the KOSOMBE Conference
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v.1992
no.05
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pp.167-170
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1992
본 논문에서는 감각성 난청자들이 정상인들과 유사한 음성 인식을 하도록 청각 보철 기기를 구성하였다. 음성의 포먼트를 추출하기 위해서는 PLP(Perceptual Linear Prediction) 방식을 이용하였으며, pitch 추출을 위해서는 3 단계 클리핑 함수를 이용한 자기 상관법을 이용하였다. 또한 다중 채널 - 다중 전극 방식을 이용하여 내이의 헤어셀에 17 개의 전극을 삽입하여 신호를 가하는 시뮬레이션을 하였다. 실험에 사용한 데이타는 모음 /a/, /e/, /i/, /o/, /u/로 전모음과 후모음의 차이를 구별하였으며 두번째 포먼트의 변화와 포먼트 통합 이론에 대한 검증을 하였다.
We cloned and expressed human pyridoxal-5'-phosphate (PLP) phosphatase, the coenzymatically active form of vitamin $B_6$, in Escherichia coli using pET15b vector. Monoclonal antibodies (mAb) were generated against purified human brain PLP phosphatase in mice, and four antibodies recognizing different epitopes were obtained, one of which inhibited PLP phosphatase. The binding affinities of these four mAbs to PLP phosphatase, as determined using biosensor technology, showed that they had similar binding affinities. Using the anti-PLP phosphatase antibodies as probes, we investigated their cross-reactivities in various mammalian and human tissues and cell lines. The immunoreactive bands obtained on Western blots had molecular masses of ca. 33 kDa. Similarly fractionated extracts of several mammalian cell lines all produced a single band of molecular mass 33 kDa. We believe that these PLP phosphatase mAbs could be used as valuable immunodiagnostic reagents for the detection, identification, and characterization of various neurological diseases related to vitamin $B_6$ abnormalities.
The purpose of this study was to evaluate the concentration of vitamin B6 in 16 pregnant-infant pairs and 15 nonpregnant women and to investigate the relationships between vitamin B6 status of maternal-umbilical cord plasma and pregnancy outcomes. dietary intake was obtained from semiquantitative frequency questionnaire. The daily mean energy and protein intakes were higher than the recommended dietary allowance, while daily vitamin B6 was only 74% of RDA in pregnant and 73% of RDA in nonpregnant women. The main sources of vitamin B6 were vegetables and fruits in pregnant women, while cereal and starch in nonpregnant women. The plasma PLP and PL levels of pregnant women were 14.85nmol/l and 20.56nmol/l, significantly lower than those of nonpregnant women. the PLP/PL ratios of pregnant and nonpregnant women were 1.65 and 0.33, indicating that the levels of vitamin B6 was altered during pregnancy. The PLP and PL levels of umbilical cord plasma were 63.55nmol/l and 32.25nmol/l, respectively. The vitamin B6 levels of umbilical cord plasma were significantly higher than that of maternal plasm. This finding indicates that the uptake of vitamin B6 in the fetus may be due to an active placental transport mechanism. The PLP level of maternal plasma correlated positively with that of umbilical cord plasma, showing the PLP concentration of umbilical cord plasma is affected by maternal vitamin B6 status. The maternal plasma PL level showed a positive correlation to infant birth weight. The positive association has bee also found between plasma PL level of umbilical cord and Apgar 1 min score.
In previous study, the linlog(linear log) RASTA(J-RASTA) approach based on PLP was proposed to deal with both the channel effect and the additive noise. The extraction of PLP required generally more steps and computation than the extraction of widely used MFCC. Thus, in this paper, we apply the linlog function to the MFCC for investigating the possibility of simple compensation method that removes both distortion. With the experimental results, the proposed method shows the similar tendency to the linlog RASTA-PLP_ When the J value is set to le-6, the best ERR(Error Reduction Rate) of 33% is obtained. For applying the linlog function to the feature extraction process, the J value plays a very important role in compensating the corruption. Thus, the study for the adaptive J or noise dependent J estimation is further required.
Chronophin is a phosphatase responsible for the dephosphorylation of cofilin, which regulates the rearrangement of actin cytoskeleton. It is also known as a phosphatase for pyrodoxal 5'-phosphate (PLP), an active form of vitamin $B_6$, and maintains the level of PLP in the cytoplasm. Since this phosphatase belongs to a HAD subfamily containing a cap domain, it is expected to undergo a conformational change for the binding of a substrate. However, the crystal structure of chronophin has a disulfide bridge between the cap and core domains preventing a movement of the cap domain against the core domain. It is possible that the disulfide bond between C91 and C221 was formed by an oxidation during the crystallization. Here, we obtained chronophin crystals under a reduced condition and determined the crystal structure. This reduced chronophin does not contain a disulfide bridge and shows a closed conformation like the oxidized form. It implies that an active chronophin binds its substrate under the closed conformation without the disulfide bond and shows a high substrate specificity in the cell.
The conformational transition of poly(L-proline) (PLP), Form Ⅱ → Form Ⅰ and the intermolecular aggregation of the product, Form Ⅰ, during and after the transition in water-propanol (1:7, 1:9, 1:15.7, and 1:29 v/v) were studied. For the study, the viscosity change and excess light scattering intensity were measured in the course of the transition which was determined by the Form Ⅰ fraction, fI of the sample solution. For the PLP sample of molecular weight Mv=31,000 the experimental results show that the reaction course is roughly divided into three regions: in the first region [fI=0.27 to 0.40 (- [α]D=400 to 330)], the conformational change of Form Ⅱ → Form Ⅰ occurs with decrease of viscosity, in the second region [fI=0.40 to 0.80 (- [α]D=330 to 120)], a partial side-by-side (p-S-S) type aggregation in which Form Ⅰ blocks interact with each other, which induces the increase of viscosity, starts to occur, and in the third region [fI=0.80 to 1.00 (- [α]D=120 to 15)], a side-by-side type (raft like) aggregation of Form Ⅰ or an end-to-end (E-E) type aggregation occurs according to the solvent situation, i.e., in a water-rich medium [water-propanol (1:9 or 1:7 v/v)], the (S-S) type aggregation with a gross decrease in viscosity occurs while in a water-poor medium [water-propanol (1:29 or 1:15.7 v/v), the (E-E) type aggregation with a large increase in viscosity occurs. The (S-S) type aggregation was promoted at high temperatures. Based on the structure of PLP, a reasonable mechanism for the (p-S-S) and (S-S) aggregation which occurs with the transition of Form Ⅱ → Form Ⅰ is considered. The suggested mechanism was also supported by the result of chain length effect of PLP for the aggregation.
The purpose of this study was to assess vitamin $B_6$ intake and status in Korean patients with newly diagnosed type 2 diabetes. Sixty-four patients with newly diagnosed type 2 diabetes and 8-11% glycated hemoglobin (A1C), along with 28 age-matched non-diabetic subjects, participated. Dietary vitamin $B_6$ intake was estimated by the 24 hour recall method and plasma pyridoxal 5'-phosphate (PLP) was measured. There was a significant difference in daily total calorie intake between the diabetic and non-diabetic groups ($1,917{\pm}376$ vs $2,093{\pm}311\;kcal$). There were no differences in intake of total vitamin $B_6$ ($2.51{\pm}0.91$ vs $2.53{\pm}0.81\;mg/d$) or vitamin $B_6$/1,000 kcal ($1.31{\pm}0.42$ vs $1.20{\pm}0.32\;mg$) between the diabetic and non-diabetic groups, and I intakes of total vitamin $B_6$ were above the Korean RDA in both groups ($180.0{\pm}57.9$ vs $179.0{\pm}65.4$). There was a higher percentage of diabetic subjects whose plasma PLP concentration was < 30 nmol/L compared to non-diabetic group. Plasma PLP levels tended to be lower in the diabetic subjects than in the non-diabetic subjects, although the difference was not statistically significant due to a large standard deviation ($80.0{\pm}61.2\;nmol/L$ vs $68.2{\pm}38.5\;nmol/L$). Nevertheless, plasma PLP levels should be monitored in pre-diabetic patients with diabetic risk factors as well as in newly diagnosed diabetic patients for long-term management of diabetes, even though this factor is not a major risk factor that contributes to the development of degenerative complications in certain patients.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers A
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v.31
no.5
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pp.609-616
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2007
Palletizing is necessary to promote the efficiency of storage and shipping tasks. These are, however some of the most monotonous, heavy and laborious tasks in the factory. Therefore many types of robot palletizing systems have been developed, but many robot motion commands still depend on the teaching pendent. That is, an operator inputs the motion command lines one by one. It is very troublesome, and most of all, the user must know how to type the code. That is why we propose a new GUI (Graphic User Interface) Palletizing System. To cope with this issue, we proposed a 'PLP' (Pallet Loading Problem) algorithm, Fast Algorithm and realize 3D auto-patterning visualization interface. Finally, we propose the robot palletizing simulator. Internally, the schematic of this simulator is as follows. First, an user inputs the physical information of object. Second, simulator calculates the optimal pattern for the object and visualizes the result. Finally, the calculated position data of object is passed to the robot simulator. To develop the robot simulator, we use an articulated robot, and analyze the kinematics and dynamics. Especially, All problem including thousands of boxes were completely calculated in less than 1 second and resulted in optimal solutions by the Fast Algorithm.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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