파밤나방 핵다각체병바이러스(Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus: SeNPV)의 온도별, 농도별로 병원활성을 조사한 결과는 다음과 같다. SeNPV의 온도에 따른 $LC_{50}$은 2령 $20^{\circ}C$에서는 $9.797{\times}10^{3}PIBs/mL$, $32^{\circ}C$에서는 $3.351{\times}10^{2}PIBs/mL$로 온도가 높아질수록 낮아졌으며, 다른 영기에서도 같은 경향이었다. $20^{\circ}C$에서 SeNPV $1.0{\times}10^{3}PIBs/mL$의 파밤나방 3령 유충에 대한 $LT_{50}$은 9.0일이었으나 SeNPV $1.0{\times}10^{4-6}PIBs/mL$에서는 6.9일-3.5일로 더 짧았다. 24, 28, $32^{\circ}C$의 SeNPV $1.0{\times}10^{4}PIBs/mL$에서는 5.7일, 5.5일, 4.9일의 병원 활성을 보여 온도가 올라갈수록 $LT_{50}$은 짧아졌다. 또한 바이러스 농도가 높고 유충의 영기가 어릴수록 짧아져 $LT_{50}$은 온도 바이러스 농도, 유충영기에 따라 차이가 있었다.
담배거세미나방 핵다각체병바이러스(SINPV)의 살충력 증가를 위하여 유기산 및 기능성 물질을 첨가하여 활성을 검정한 결과는 다음과 같다. 핵다각체병바이러스(NPV) 1${\times}$$10^{5}$ PIBs/$m\ell$에 ascorbic acid, succinic acid, sulfanilic acid 2,000ppm을 바이러스 1${\times}$$10^{5}$ PIBs/$m\ell$에 첨가하였을 때 각각 7.0일, 7.일, 10.7일로 바이러스 단독으로 처리한 6.0일보다 더 높게 나타났으나 boric acid 2,000ppm을 첨가한 경우 L $T_{50}$은 4.5일로서 단독처리보다 1.5일 짧았다. 유충 체중변화에서도 boric acid는 2,000ppm에서 7일째 이후 생존하는 개체가 없어 가장 효과가 좋은 것으로 나타났으며 1,000ppm과 500ppm에서도 체중이 증가하지 않아 바이러스 활성 증진을 지속시키는 물질로 판단되었다. 기능성 물질과 혼합 처리에서는 바이러스 1${\times}$$10^4$ PIBs/$m\ell$ 단독 처리는 L $T_{50}$이 7.4일이 걸리는 반면 담배거세미나방 핵다각체병바이러스와 전해산화수, 키토산, 목초액 혼합처리는 모두 살충기간이 길어져 혼합효과가 없었다. 담배거세미나방 핵다각체병바이러스 농도 1.0${\times}$10$_{6}$, $10^{8}$ PIBs/$m\ell$와 기능성 물질을 혼합하였을 때도 같은 경향으로 오히려 바이러스 병원성 억제효과가 나타났다.
담배거세미나방 방제를 위한 핵다각체병바이러스의 병원성 검정결과는 다음과 같다. 국화 유묘에서 병원성 검정은 핵다각체병바이러스 1.0$\times$$10^{6.8}$ PIBs/ml에서 노지의 LT$_{50}$ 은 6.2-5.1일이 소요되어 비닐하우스의 6.9-5.4일 보다 짧았으며, 누적 살충율은 노지에서 10일째에 1.0$\times$$10^{7.8}$ PIBs/ml에서 100%의 살충율을 보였으나 비닐하우스에서는 95%였다. 포장의 살충력은 유기합성농약(endosulfan)이 살포 2일 안에 효과가 나타나는 반면 바이러스에 의한 살충은 4일째부터 나타나기 시작하여 14일까지 지속되었다. 노지포장에서는 SINPV 1.0$\times$$10^{8}$ PIBs/ml의 살충율이 94.0%로 대조약제인 endosulfanfsoppm의 91.4%보다 높았으며, 비닐하우스에서는 1.0$\times$$10^{7}$ PIBs/ml이 92.0%로 가장 높았으나 다른처리와 통계적인 유의차가 없었다. 이상의 결과로 보아 노지포장과 비닐하우스에서 1.0$\times$$10^{7}$ PIBs/ml 이상의 농도로 처리하면 담배거세미나방을 방제할 수 있을 것으로 판단되었다.
Heliothis zea (HzAM1) insect cells were immobilized in microspheres by sodium-cellulosesulfate (NaCS) and polydiallyldimethylammoniumchloride (PDADMAC). The highest HzAMl cell density was $7.5{\times}10^7$ cells/mL in the microspheres. After infection of the immobilized cells by Heliothis zea single nuclear polyhedrosis virus (HzSNPV), the highest concentration of HzSNPV (polyhedral inclusion bodies: PIBs) produced was $2.87{\times}10^{10}$ PIBs/mL in the microspheres.
담배거세미나방 핵다각체병 바이러스(Spodoptera litura nuclear polyhedroses virus: SINPV) 미생물살충제로 개발하기 위하여 기주식물, 온도 보관조건 및 태양광선에 의한 병원성 및 안정성에 대하여 조사하였다. 콩잎에 살포한 SlNPV의 담배거세미나방 3령과 5령 유충에 대한 $LC_{50}$은 각각 $1.301\times10^{4 PIBS}/ml$와 $1.087\times10^{5 PIBS}/ml$였으며 $1.0\times10^{6 PIBS}/ml$에 대한 $LC_{50}$은 3령과 5령에 대하여 각각 7.3일파 8.9일이었다. SINPV는 $60^{\circ}C$에서 4시간, $60^{\circ}C$에서 1 10분 처리하였을 때 활성이 저하되었으며 처리시간이 길어질수록 급격한 활성감소현상을 보였다. 또한 SINPV는 $-20^{\circ}C$ 동결보관이 $4^{\circ}C$나 $25^{\circ}C$ 보관보다 안정적인 활성을 유지하였다. 콩잎표변에 살포한 SINPV는 콩잎표변에 살포한 경우 3일 후에 불활화하였으나 콩잎 이면살포에서는 10일간 활성이 지속되었다.
담배거세미나방 핵다각체병바이러스의 온도별, 농도별로 병원성 검정결과는 다음과 같다. SINPV의 온도에 따른 담배거세미나방 유충 영기별 LC$_{50}$ 은 20-28$^{\circ}C$범위에서는 1,3,5령에서 온도가 높아질수록 낮아졌으나 32$^{\circ}C$에서는 높아졌다. LT$_{50}$ 은 핵다각체병바이러스 1.0$\times$$10^{5.7}$ Polyhedral inclusion bodies (PIBs)/ml에서 온도조건(20-32$^{\circ}C$)이 2$0^{\circ}C$와 24$^{\circ}C$에 비하여 28$^{\circ}C$와 32$^{\circ}C$에서 짧았다. 또한 바이러스 농도가 높고, 유충의 영기가 어릴수록 짧아져 LT$_{50}$ 은 온도조건, 바이러스 농도, 유충 영기에 의존하였다.
담배나방 유충에서 분리한 세포질다각체병 바이러스의 형태, 다각체 단백질 및 핵산의 전기영동상과 바이러스의 병원성을 조사하여 본 바이러스를 이용한 담배나방의 생물적 방제 이용성을 검토하고자 본 실험을 수행하였다. 다각체의 형태는 외관상 6각형으로 0.5~3.7 ${\mu}m$ 크기이고 바이러스 입자는 정 20면체로 55nm였다. SDS-PAGE에 의한 다각체 단백질은 단일 롤리?타이드인 24.3 Kd와 5개의 작은 구성분으로 이루어졌다. 바이러스입자는 7개의 폴리?타이드로 구성되어 있으며 분자량은 28.0~133.6 Kd였다. 바이러스 게놈은 10개의 조각으로 된 총 분자량 18.08 Md인 이본쇄 RNA로 각 조각의 분자량 범위는 0.65~2.79 Md이였다. 3령 유충에 대한 담배나방 세포질 다각체병바이러스의 $LC_{50}$은 $2.895{\times}10^5PIBs/ml$이었으며 $5.0{\times}10^{6}PIBs/ml$의 농도에서 $LT_{50}$에서 16.4일이었다.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제19권2호
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pp.237-241
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2009
The objective of our study was the evaluation of pathogenicity of a local strain of Mamestra brassicae nucleopolyhedrovirus-K1 (MabrNPV-K1) derived from a diseased larva of M. brassicae found in Korea. The effect of temperature and larval instar on the pathogenicity and production of MabrNPV-K1 was determined under laboratory conditions. The median lethal concentration ($LC_{50}$) values of MabrNPV-K1 for 3rd instar larvae were $3.7\times10^4$ PIBs/larva at $20^{\circ}C$, $9.9\times10^2$ PIBs/larva at $25^{\circ}C$ and $3.8\times10^2$ PIBs/larva at $30^{\circ}C$, respectively. The $LC_{50}$ for the 4th instar larvae was similar to that for the 3rd instar larvae. However, the pathogenicity to the 3rd instar larvae was higher than that to the 4th instar larvae. The median lethal time ($LT_{50}$) values of MabrNPV-K1 were 11.4 to 5.0 days at $30^{\circ}C$ and 18.3 to 5.5 days at $25^{\circ}C$ for the 3rd instar larvae. The $LT_{50}$ value was lowered as temperature went up to $30^{\circ}C$ and dependent on viral concentration. In production efficiency of MabrNPV-K1 using M. brassicae larvae, the mortality of the 3rd instar larvae was 100% when inoculated with $1.0\times10^5$ PIBs/larva and the yield of MabrNPV-K1 was maximal. Regarding the mortality, yield of polyhedra, inoculation doses and required time, the $1.0\times10^4$PIBs/larva at $30^{\circ}C$ was determined as optimal conditions producing polyhedra efficiently.
담배거세미나방 방제를 위한 핵다각체병 바이러스와 NeemAzal-T/S의 혼합처리 효과는 다음과 같다. 인공사료에 혼합 처리하여 실내 검정한 결과 핵다각체병 바이러스$ 1$\times$10^{8}$ PIBs/ml과 NeemAzal-T/S ppm 혼합한 경우에 $LT_{50}$ 과 $LT_{95}$가 각각 1.94일과 8.33일로 다른 처리구보다 빠르게 나타났다. 핵다각체병 바이러스 $1$\times$10^{6~8}$ PIBs/ml과 NeemAzal-T/S ppm 혼합살포로 단독처리보다 $LT_{95}$에서 3일 정도의 살충기간을 단축할 수 있었다. 배추유묘에서의 병원성 검정 결과 바이러스 단독처리는 4일째의 살충율이 10.7~6.7%로 낮으나, 핵다각체병 바이러스와 NeemAzal-T/S혼합 처리시에 살충효과가 빠르고 살충율도 높게 나타났다. 특히 핵다각체병 바이러스 $1$\times$10^{8}$ PIBs/m1과 NeemAzal-T/S 75~200 ppm처리에서는 9일째에 100%의 살충율을 보였다. 핵다각체병 바이러스를 처리하지 않은 담배거세미나방 유충은 초기 235mg에서 7일째에 2,194 mg으로 9.4배의 체중이 증가하였다. NeemAzal-T/S 단독처리시에는 200 pprn에서 1,120mg으로 4.8배 체중이 증가하였으며 바이러스 단독처리에서는 $1$\times$10^{8}$ PIBs/ml에서 7.0배 증가하였다. 그러나 두처리를 혼합하면 7일째에 $SINPV1$\times$10^{4~8}$ /+NeemAzal 75~200 ppm에서 3.9~2.9배만이 증가하여 단독처리보다 체중증가가 둔화되어 혼합처리에 의한 상승효과가 있었다.
1975년 수원 잠업시험장에서 분리한 흰불나방 핵다각체 바이러스 성상과 령기, 화기별 및 병원체 보존조건에 따른 병원성을 검정하기 위하여 핵다각체 바이러스를 현탁액 및 건조시켜 실온$(18.5^{\circ}C)$, 냉장$(5^{\circ}C)$, 냉동$(-80^{\circ}C)$에 각각 보존, 이병사체는 그대로 양지 음와 지에 보존하였고 야외에서의 병원성, 가잠에 대한 교우감염을 검정한 결과 다음과 같다. 1. 흰불나방 핵다각체는 4면체와 6면체로 크기는 약 $2.0{\mu}$이고 바이러스 입자는 간상형의 $2\~12$본으로 $33m\mu\times35m\mu$이었다. 2. 6각형의 흰불나방 중장핵다각체 바이러스는 중장의 핵에서만 발견되었다. 3. 령기별 $LD_{50.}$ 2,3,4 및 5령에 대해 $8.377\times10^4,\;4.974\times10^5,\;2.621\times10^6$ 및 $9.471\times10^6PIBs/ml$ 였으며 $1.45\times10^6\;PIBs/ml$에 대한 $LT_{50}$은 각각 9.6, 11.5, 12.0 및 17.3일 이었다. 4. 핵다각체 바이러스는 1화기 유충보다 2화기 유충에서 감수성이 높았다. 5. 핵다각체 보존은 둔화건조하여 냉동 및 냉장보존하거나 이병사체를 음지에 보존하는 것이 바이러스 활성도의 감소가 적었다. 6. 야외에서의 효과적인 살포농도는 $6.4\times10^7\;PIBs/ml$이며 이의 $LT_{50}$은 3령은 4.8일, 5령은 14.2일이었다. 7. 흰불나방 핵다각체 바이러스와 가잠의 핵다각체 바이러스는 상호 교우감염을 일으키지 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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