이 실험은 추백리의 병원성을 연구하고자 2006년 2월부터 12월까지 Salmonella enterica serovar. enterica subspecies (S.) Pullorum 야외주를 분리한 후, 이를 건강한 닭에 실험적으로 감염시킨 다음 임상증상, 여러 기관의 육안 및 조직병리학적 검색과 아울러 공격주의 재분리와 동정을 시도하였다. S. Pullorum에 혈청학적으로 음성인 12주령의 100수의 암탉을 $A{\sim}E$까지 20수씩 5그룹으로 구분하였다. $A{\sim}DS$. Pullorum을 $10^6\;CFU$, $10^7\;CFU$, $2{\times}10^7\;CFU$, $10^8\;CFU$로 각각 경구 감염시켰고, E는 비감염 대조군으로 삼았다. 실험 방법으로는 부검, 조직병리학적 검사, Salmonella에 대한 세균 배양, 염색, 생화학적 특성을 조사하고 그 결과를 기술하였다.
$^{123}I$, which is applied for the thyroid and other in vivo kinetic study, has a special role in life sciences. The 159 KeV $\gamma-ray$ from $^{123}I$ is almost ideally appropriate for the current imaging instrumentation. Its decay mode (electron capture) and short half-life (13.3 hr) reduced the burden of radiation dose to the patients, and its chemical property makes it easy to synthesize the labelling compounds. In this experiment, the production of $^{123}I$ via the nuclear reaction $^{124}Te(p,2n)^{123}I$ with 28 MeV protons was sutdied. $TeO_2$ is used as a target material, because it has good physical properties. The target was prepared with $TeO_2$ powder and was molten into a ellipsoidal cavity (a=14 mm, b=10 mm, $270.8mg/cm^2$ thick) of pure platinum. The irradiation was carried out in the external proton beam with incident energies range from 28 MeV to 22 MeV, and current was $30{\mu}A$. The loss of $TeO_2$ target was significantly reduced by using $4\pi-cooling$ system in irradiation. The dry distillation method was adopted for the separation of $^{123}I$ from irradiated target, and when it was kept 5 minutes at $780^{\circ}C$, its result was quantitative. The loss of the target material $(TeO_2)$ was below 0.2% for each production run and $^{123}I$ from the dry distillation apparatus was captured with 0.01 N NaOH in $Na^{123}I$ form, then the pH of the solution was adjusted to $7.5\sim9.0$ with HC1/NaOH. The $Na^{123}I$ solution was passed through $0.2{\mu}m$ membrane filter, and sterilized under high pressure and temperature for 30 minutes. The production of $^{123}I$ is acceptable for clinical application based on the quality of USP XXI.
To investigate the possible mechanism of ${\alpha}-spinasterol$ as a candidate of anti-cancer drug, I examined the effects of ${\alpha}-spinasterol$ on the apoptosis of U937 cells MTT assay, flow cytometric analysis, SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, Western blot analysis, and RT-PCR were performed. ${\alpha}-spinasterol$ treatment reduced the cell viablilty of U937 cells in a dose-dependent manner, which was associated with the induction of apoptotic cell death. ${\alpha}-spinasterol$ treatment also reduced the levels of Bcl-xL anti-apoptotic protein expression and increased the levels of caspase-3, p53, pro-apoptotic protein, in U937 cells. After treatment the level of Bcl-xL, anti-apoptotic gene expression was decreased and the level of ICE pro-apoptotic gene expression was increased. These findings suggest that ${\alpha}-spinasterol$ induced the apoptotic cell death via regulation of several growth regulatory gene products. The abbreviations used are: FBS, fetal bovine serum; PBS, phosphate buffered saline; PI, propidium iodide; OD, optical density; DiOC6, 3,3-dihexyloxa carbcyanine iodide; MTT, 3 [4-5-dimethylthiazol-2-yl] -2-diphenyltetrazolium bromide.
Objective: This study investigated the effects of different dietary energy sources on early postmortem muscle metabolism of finishing pigs. Methods: Seventy-two barrow ($Duroc{\times}Landrace{\times}Yorkshire$, DLY) pigs ($65.0{\pm}2.0kg$) were allotted to three iso-energetic and iso-nitrogenous diets: A (44.1% starch, 5.9% crude fat, and 12.6% neutral detergent fibre [NDF]), B (37.6% starch, 9.5% crude fat, and 15.4% NDF) or C (30.9% starch, 14.3% crude fat, and 17.8% NDF). After the duration of 28-day feeding experiment, 24 pigs (eight per treatment) were slaughtered and the M. longissimus lumborum (LL) samples at 45 min postmortem were collected. Results: Compared with diet A, diet C resulted in greater adenosine triphosphate and decreased phosphocreatine (PCr) concentrations, greater activity of creatine kinase and reduced percentage bound activities of hexokinase (HK), and pyruvate kinase (PK) in LL muscles (p<0.05). Moreover, diet C decreased the phosphor-AKT level and increased the hydroxy-hypoxia-inducible $factor-1{\alpha}$ ($HIF-1{\alpha}$) level, as well as decreased the bound protein expressions of HK II, PKM2, and lactate dehydrogenase A (p<0.05). Conclusion: Diet C with the lowest level of starch and the highest levels of fat and NDF could enhance the PCr utilization and attenuate glycolysis early postmortem in LL muscle of finishing pigs.
Mifepristone (MIF)은 프로게스테론 유사체이며, 강한 항프로게스테론 효과 때문에 전립선암 치료에 사용되고 있다. 본 연구에서는 MIF의 세포독성효과가 세포 내 칼슘농도 조절에 의한 것임을 밝힌다. 5-40 $\mu$M의 MIF를 처리 시 LNCaP 전립선암세포의 성장이 농도와 시간의존적으로 감소하였다. 반대로, 세포 내 칼슘의 레벨은 MIF의 처리시간과 농도도 의존적으로 증가하였다. MIF를 처리한 세포를 PI 혹은 Hoechst로 염색한 결과, 전형적인 세포자살의 징후인 응축된 염색질과 핵 조각단편들이 관찰되었다. 이들 세포자살징후 역시 MIF의 처리시간과 농도가 증가 할수록 심화되었다. 세포자살에 직접적으로 관여하는 중요한 단백질인 Bcl-2 그룹 단백질의 발현을 조사해 본 결과, 세포자살 억제단백질인 Bcl-2의 발현은 MIF처리시 치명적으로감소하였고, 대신에 세포자살 촉진단백질인 Bax의 발현은 2배로 증대되었다. 이상의 결과로 보아 MIF의 세포독성효과는 세포 내의 칼슘조절에 따른 세포자살에 의한 것으로 생각된다.
광산주변의 광해대책 없이 방치된 대부분의 잔류광미는 광산지역의 하류 농경지뿐만 아니라 재배 작물의 중금속 오염의 주원인이 될 수 있다. 본 연구는 폐금속광산의 중금속 오염 특성을 평가하기 위하여 국내 25개 광산 주변에서 채취한 광미를 대상으로 수용성, 산가용성 및 전함량 중금속을 분석 검토하였다. 광미 중 수용성 무기이온들의 함량은 ${SO_4}^{2-}>Ca^{2+}>Mn^{2+},\;Na^+,\;Al^{3+}>Mg^{2+},\;Fe^{3+}>Cl^-$ 순으로 높았으며, 특히 pH, EC, ${SO_4}^{2-}$ 및 $Ca^{2+}$ 함량은 광산별로 큰 편차를 보였다. 광미중의 중금속 전함량은 Cd 31.8, Cu 708, Pb 4,961, Zn 2,275 및 As 3,235 mg/kg이었고, 중금속 중 Cd, Zn 및 As는 우리나라 토양환경보전법의 토양오염대책 기준을 초과하였다. 광미 중 전함량에 대한 수용성 중금속 비율은 Cd > Zn > Cu > Pb > As 순으로 높게 나타나 토양 환경내에서 이동성이 높은 순위와 일치하였다. 또한 0.1M-HCl 산가용성 침출비율은 각각 Cd 17.4, Cu 10.2, Pb 6.5, Zn 6.8 및 As 11.4%(1M-HCl 추출성)이었고, 광미 중 중금속 전함량에 대한 수용성 함량비율은 화학성분 조성과 관련성이 큰 것을 알 수 있었다. 광미중의 중금속 부화계수(EF)는 As > Pb > Cd > Cu > Zn 순이었고, 오염지순(PI)는 Au-Ag 광산이 다른 광산보다 높은 것으로 나타났다. 이러한 광산 주변 광미의 중금속 부화계수와 오염지수를 근거로 볼 때 심각한 수준으로 중금속이 농집되어 있어 폐광산 주변의 주요 오염원은 광미를 포함한 광산폐기물로 판단할 수 있었다. 따라서 폐광산 주변에서 중금속을 다량 함유된 광미의 유실 및 강우에 의한 유출은 하부 수계 및 농경지에 심각한 문제를 야기 시키며,특히 산성 황화물을 함유하는 광산폐수는 산성배수를 일으켜 중금속 용출 부화를 가중시킬 수 있어 이에 대한 대책이 강구되어야 할 것이다.
본 연구는 미니 돼지와 일반 돼지(Duroc)의 동결융해 후 정자의 수정 능력을 비교하여 동결 보존체계의 기틀을 확립하고자 하였다. 정액 제조는 수압법으로 정액 채취하여 1차 희석하였다. 동결은 LEY (1차: 11% ${\alpha}$-lactose+egg yolk, 2차: 1차 동결액+glycerol+OEP) 동결액을 이용하여 동결을 실시하여 동결 보존하였다. 동결 정액의 융해는 0.5 ml straw를 각각 20, 37 및 $50^{\circ}C$ water bath에서 1분, 40 초 및 10초간 융해하여 세척 과정 후 BTS 5 ml를 첨가하여 $37^{\circ}C$에서 배양하였다. 정자 성상 검사로는 기형율(Rose Bengal staining), 첨체율(Chlortetra-cycline staining) 및 생존율(SYBR-14/PI staining)등을 배양 후 0, 3, 6, 9 및 12시간에서 검토하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 정자의 보존 시간에 따른 기형율은 동결 융해 직후 miniature pig가 $19.5{\pm}1.7%$ 로 Duroc의 $13.9{\pm}0.3%$에 비해 유의적으로 높았다. (p<0.05). 첨체 검사에서 수정능 획득이 일어나지 않은 F pattern은 동결 융해 후 miniature pig와 Duroc 종 정액이 $24.1{\pm}2.8%$와 $37.9{\pm}1.1%$로 Duroc 종에서 유의적(p<0.05)으로 높게 나타났으며, 동결 융해후 miniature pig와 Duroc 종의 AR pattern은 $21.1{\pm}1.6%$ 및 $15.5{\pm}2.2%$로 miniature pig가 유의적(p<0.05)으로 높게 나타났다. 융해 온도별 생존율에서는 20과 $37^{\circ}C$에서는 두 종간에서 유의적 차이는 없었으나, $50^{\circ}C$에서는 miniature pig가 $63.8{\pm}3.6%$로 $47.4{\pm}3.2%$인 Duroc 종에 비해 유의적(p<0.05)으로 높게 나타났다. 본 연구의 결과로부터 첨체율과 기형율에 대한 연구를 보완함으로써 miniature pig정액의 안정적인 동결 체계를 확립할 수 있을 것으로 판단된다.
Phospholipase C gamma (PLCγ)는 phosphatidylinositol을 가수분해하여 신호전달 과정에 참여하는 PLC의 주요한 isotype으로 γ-specific array의 특징적인 구조를 바탕으로 receptor tyrosine kinases 및 non-receptor tyrosine kinase 신호를 주로 매개한다. PLCγ1과 PLCγ2의 두 isozyme이 존재하며 다양한 세포에서 발현하여 cell proliferation, migration 및 differentiation 등 여러 세포작용을 조절하고 있다. 최근의 연구들에서 PLCγ 돌연변이가 cancer와 immune disease 및 brain disorder 등에 연관된다는 것이 밝혀지고 있으며 genetic model을 통해 PLCγ의 생리적·병리적 기능이 제시되었다. 본 리뷰에서는 최신의 연구 결과들을 바탕으로 PLCγ의 구조와 활성 조절 기전에 대해 기술하고 나아가 여러 질병의 발병과 진행에서 보고된 PLCγ의 돌연변이와 knockout 마우스를 활용한 연구 결과를 바탕으로 생리적·병리적 관점에서 PLCγ의 역할에 대해 고찰하였다.
This study examined the viability of canine oocytes following storage at 4 or $38{\circ}C$ for 5 hrs. The ovaries were collected from domestic dog following ovariohysterectomy at a local veterinary clinics and transported to laboratory In two different transport temperature at 4 or $38{\circ}C$ within 5 hrs. The cumulus oocyte complexes (COCs) were recovered after slicing with blade. In Exp. 1, the oocytes collected were matured in DMEM supplemented with l0% FBS, 0.6 mM/mlcysteine, 0.2 mM Pyruvic acid, 20 ng/ml $E_2$ and 1 $\mu g/ml$ rbST at humidified atmosphere containing 5% $CO_238{\circ}C$ for 24 or 48 hrs to analysis of survivability. In Exp 2, to assess nuclear development at 38{\circ}C$ group, the oocytes were matured in maturation medium for 24, 48 or 96 hrs. Survivability was judged by a morphological appearance and PI staining. Survivability rates were analyzed by General Linear Models procedure in SAS. The survival rates at 4{\circ}C$ ovary transport group showed significantly lower than at 38{\circ}C$ group (0 vs 72.9% in 48 hrs and 13.2 vs 77 8% in 24 hrs; P<0.05). The nuclear development of oocytes to MI to MII stages at 24, 48 and 96 hrs was 8.3% (6/72), 8.9% (9/101), and 9.5% (8/84). These results showed that the canine oocytes were remarkably sensitive to a low temperature and did not increase nuclear development rate depend on maturation time to 96 hrs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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