We have designed a 20-residue hybrid peptide CA(1-8)-MA(1-12) (CAMA) incorporating residues 1-8 of cecropin A (CA) and residues 1-12 of magainin 2 (MA) with high bacterial cell selectivity. CAMA-P2 is an ${\alpha}$-helical antimicrobial peptide designed from a CAMA hybrid peptide and substitution of Gly-Ile-Gly hinge sequence of CAMA to Pro influences the flexibility at central part of CAMA. Based on structure-activity relationships of CAMA peptides, to investigate the effects of the total positive charges on antimicrobial activity of CAMA-P2, the $Ser^{14}{\rightarrow}$Lys analogue (CAMA-syn1) was synthesized. The role of tryptophan at C-terminal ${\alpha}$-helix on its antimicrobial activity as well as synergistic activity was also investigated using $Ser^{14}{\rightarrow}$Lys/$Phe^{18}{\rightarrow}$Trp analogue (CAMA-syn2). Also, we designed CAMA-syn3 by substitution of $Lys^{16}$ located opposite side of substituted $Lys^{14}$ of CAMA-syn1 with Leu residue, resulting in increase of hydrophobicity and amphipathicity of the peptide. All of CAMA-syn analogues showed good antimicrobial activities similar to those of CAMA and CAMA-P2. The CAMA-syn1 and CAMA-syn2 showed low hemolytic activity and cytotoxicity against human keratinocyte Haca-T cells while CAMA-syn3 showed hemolytic activity and cytotoxicity at its MIC value. We then investigated their abilities to act synergistically in combination with the antimicrobial flavonoids and synthetic compounds screened in our laboratory. The results showed that all peptides exhibited synergistic effects with dihydrobinetin, while only CAMA-syn2 exhibited synergistic effects with YKAs3001 against both S. aureus and MRSA, suggesting that Trp residue at C-terminus of CAMA-syn2 may facilitate the polar antibiotic flavonoids and synthetic compounds to permeabilize the membrane. This study will be useful for the development of new antibiotic peptides with potent antimicrobial and synergistic activity but without cytotoxicity.
For the development of functional food and cosmetics using hot water extract of Muraenesox cinereus's skin, contents of vitamin, amino acid and element, and antioxidant activity were investigated. The results are shown as follows: among vitamins, A(0.21mg/100 g), C (78.12mg/100 g), $D_3$ (0.03 mg/100 g), E (1.97 mg/100 g) and Niacin (2.53mg/100 g) were detected, respectively.Mineral contents were an order of K > P > Na > Mg > Ca > Fe and Zn. Contents of total amino acids were an order of Pro > Gly > Arg > Glu > Phe > Ala. Especially, the sum of total amino acids was 27.17 mg/100 mL, which was about 4.0 fold higher than that of free amino acid. DPPH radical scavenging activity of hot water extract of M. cinereus's skin at 25 mg/mL was 63.5% and did not increase at above 50 mg/mL. Activities of antioxidant enzymes in the liver of ethanol-treated rats using hot water extract of M. cinereus's skin were investigated. Compared to control group, activities of ADH and GSH-px were decreased. In the case of CAT and SOD activity, they were increased. These results showed that the hot water extract of M. cinereus's skin can be applied to raw macterial for functional food and cosmetics.
This study was performed in order to analyze the fibrinolytic, thrombin inhibitory, anti-oxidative, acetylcholinesterase inhibitory, and immuno-enhancing activities of the water extract and solvent fractions isolated from Grifola frondosa. Fibrinolytic activity was analyzed using the fibrin plate method, and thrombin inhibitory activity was assayed using the substrate H-D-Phe-piparg- pna. Anti-oxidative activity was estimated using the DPPH assay, and AChE inhibitory activity was measured using the spectrophotometric method. Immuno-enhancing activity was examined using the nitric oxide (NO) production in RAW 264.7 macrophage cells. Cell viability was determined using the MTS assay. Fibrinolytic activities were the highest in water extract (1.55 plasmin units/mL) followed by water fraction (0.85 plasmin units/mL). The thrombin inhibitory activities of the water and ethyl acetate fractions were determined to be 76.43% and 72.59%, respectively. The acetylcholinesterase inhibitory activities of chloroform and hexane fractions exhibited values of 95.14% and 94.74%, respectively. The butanol fraction showed the highest anti-oxidative activity at 94.47%. Anti-proliferating activity against Raw 264.7 cells showed no cytotoxicity. The production of NO in Raw 264.7 cells increased up to 2-fold by adding the water fraction compared to the untreated control. These results suggest that Grifola frondosa may serve as a useful functional food for the enhancement of immune function and the prevention and therapy of cardiovascular diseases.
In this untreated classic phenylketonuria (PKU) case, mental retardation is severe; however, there have been individuals- like the mother of this case- who have escaped mental retardation and all the other potential sequelae of phenylketonuria, despite having high blood phenylalanine levels, and very poor dietary control. It appears that they have nearly normal brain phenylalanine levels despite high blood phenylalanine (Phe) levels. A number of studies have now demonstrated considerable variability in blood vs. brain phenylalanine levels in phenylketonuria patients. Outcome of phenylketonuria appears to be related to brain phenylalanine levels. We report a case of "undiagnosed" maternal phenylketonuria syndrome. A female infant had low birth weight (2,400 g) with microcephaly. We examined her family and discovered that her mother was an undiagnosed phenylketonuria patient with a borderline intelligence quotient (IQ). The infant's sister, six years old, was diagnosed with phenylketonuria at the age of four years was mentally retarded and had received an operation for cleft lip and palate. the sister had also had a low birth weight (2,300 g). Her sister and mother were compound heterozygotes (mother: R243Q/Y325X; sister: Y325X/P407S). The infant and father were heterozygous carriers (baby: R243Q/ -; father: P407S/ - ).
This study was carried out to investigate the ACE inhibitory materials of Raja kenojei. Raja kenojei was sperated to fillet and viscera, and these were extracted with hot water. Antihypertensive activity was examined by mesearing angiotensin converting enzyme ACE inhibitory activity. ACE inhibitory activity of viscera at the concentration of 2% for Day 0 showed the highest value by 71.0%. But ACE inhibitory activity of fillet at 2% showed by 29%, which was lower antihypertensive activity than viscera. The protein content of viscerial hot water extracts in proximate composition showed the highest. And also, there was a large amount of aromatic and branched aliphatic amino acids in viscera than those in fillet. For the purification of antihypertensive material in visceral hot water extracts, it was separated and collected by Sephadex G-25 gel chromatography. The fraction (B) of 111 to 160 showed the highest ACE inhibitory activity by 65.1% at the concentration of 0.05%. But the other fractions (A and C) showed lower activity than B. These results demonstrate that crude hot water extracts of viscera from Raj kenojei may be useful as functional food ingredient with antihypertensive property.
We were investigated the cognitive ability enhancement in rats using B. mori fibroin molecular controlled hydrolysate by preparative recycle HPLC system. Also, some of its physicochemical properties and free amino acid components were investigated, too. Nuclear magnetic resonance (NMR) spectrum are measured different pattern between high (HF) and low (LF) molecular controlled B. mori fibroin samples, respectively. The in vitro test by neuron primary cell culture are showed dependent on molecular weight (Mw) of B. mori fibroin in the order of LF > MF > HF, too. However, the memorial effects in rats by in vivo test are large dependent molecular weight on that maximum 50% than control. Also, the memorial effect was higher than the enzymatic relative and acid hydrolysate, which was 50.0$\pm$2.1 and 25.9$\pm$0.32%, respectively.
The peptidyl prolyl sis-trans isomerase (PPIase, EC 5.2.1.8) from bacillus stearothermophilus was extracted from the cells treated with by lysozyme. PPIase was purified from the cell extracts by heat treatment, ammonium sulfate precipitation, ion exchange chromatography and finally gel filtration, sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE). The molecular weight of the purified PPIase was estimated as 18kDa by SDS-PAGE. The 39 amino acid residues from the N-terminus were determined by the protein sequencer. The enzyme showed the optimum pH at 8.0 and was stable at the range of pH 7.0∼8.0. The enzyme was considerably stable after heat treatment at 60$\^{C}$ for 30minutes, and the enzyme was quite stable up to 65$\^{C}$. The presence of the PPIase in the refolding solution accelerated the isomerization rate of the assay peptide. PPIase gene of Bacillus stearothermophilus was screened from a genomic library by plaque hybridization using the A-l primer as a probe. A PPIase positive plaque contained a 3.0kb insert of the chromosomal DNA. A 3.0kb fragment was subcloned into pUC18, resulting pPI-40. A DNA fragment encoding the N-terminal portion of the PPIase in pPI-40 was amplified by polymerase chain reaction(PCR) method using the A-1 and B-2 primers. The amplified fragment was cloned into the Sma I site of pUC18 and recombinant plasmid was designated as pSN-18. The nucleotide sequence of 167bp fragment was determined. The deduced amino acid sequence of PPIase was completely matched with the determined N-terminal amino acid sequence of PPIase B. stearothermophilus.
Ohh, S.H.;Han, K.N.;Chae, B.J.;Han, In K.;Acda, S.P.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.15
no.12
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pp.1765-1772
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2002
Three experiments were conducted to determine the feed processing method best suited for early and conventionallyweaned pigs, and to investigate the effects of different extrusion temperatures on ileal digestibility of amino acids in diets containing different protein sources. In exp.1, a total of 108 pigs (Landrace${\times}$Yorkshire${\times}$Duroc; 24 d of age and 7.60 kg average body weight) were alloted on the basis of sex, weight and ancestry to three treatments in a randomized complete block design. Feed processing methods used were mash (M), simple pellet (SP), and expanded pellet (EP). In exp. 2, a total of 96 pigs (Landrace${\times}$Yorkshire${\times}$Duroc; 14 d of age) were allotted on the basis of sex, weight, and ancestry to three treatments in a randomized complete block design. Diets were mash (M), expanded pellet (EP), and expanded pellet crumble (EPC). In exp. 3, a study was designed to investigate the effect of different extrusion temperatures (100, 120, and $140^{\circ}C$) over the control (untreated) on the ileal digestibility of amino acids in diets containing protein sources such as spray-dried plasma protein (SDPP), whey protein concentrate (WPC), and fish meal (FM). Results in exp.1 showed that ADG, ADFI and the F/G ratio of pigs fed the SP diet were improved (p<0.05) compared with those fed the M or the EP diets, but the digestibility of nutrients was not different (p>0.05) among the treatments. In exp. 2, pigs fed expanded pellet treatments (EP or EPC) had a significantly improved (p<0.05) F/G ratio compared to the pigs fed the M diet which was primarily attributed to the significant reduction (p<0.05) in ADFI, but the overall growth rate of pigs fed expanded pellet diets was not improved. In exp. 3, there was a significant interaction effect (p<0.05) between the extrusion temperature and protein source on the ileal digestibility of amino acids. With an extrusion temperature of $100^{\circ}C$, the ileal digestibility of Lys, Val, Gly and Ser was significantly lower in the diet containing WPC compared to the diet containing SDPP. Increasing the temperature to $120^{\circ}C$ led to significant differences (p<0.05) in the digestibility of Thr and Tyr between diets containing WPC and SDPP. Regardless of extrusion temperatures, the weaned pigs' diet containing either SDPP or FM had significantly higher Lys, Phe, Thr, Val, and Gly digestibility relative to the WPC diet. Results of the present study suggest that simple pelleting of diets containing protein sources such as whey protein concentrate, spray-dried plasma protein and fish meal would be better than the extruded or expanded pellet diets. Extruder or expander processing of weaned pigs' feed could reduce palatability and ileal digestibility of several amino acids and therefore may be responsible for a negative growth response in weaned pigs.
In this study, the biochemical characterization of strong proteolytic bacteria and their extracellular pretense isolated from fermented fish paste were experimented for the purpose of industrial large scale-production by accelerated fermentation. The results obtained were as follows: Among 4 strains isolated from fermented fish paste, B. subtilis p-4 and B. licheniformis p-5, which grow well at $40^{\circ}C$, pH 7.0 and $1\%$ of salt contents, were the best proteolytic bacteria and were shown $0.48hr^{-1}$, $0.49hr^{-1}$ of specific growth rate in TPY medium, respectively. Maximum enzyme activity of B. subtilis p-4 was 335n mole-Tyr/min.ml after 30 hrs and that of B. licheniformis p-5 was 300n mole-Tyr/min.ml after 28 hrs of shaking culture. Purified pretense produced by B. subtilis p-4 and B. licheniformis p-5 showed maximum activity at $50^{\circ}C$, pH 7.0 and molecular weight were estimated to be 18,000, 30,000 by sephadex G-100 gel filtration, respectively. These were supposed to be a kind of metal chelator sensitive neutral pretense from the result of high sensitivity against EDTA, o-phe-nanthroline and metal ions such as $Cu^{2+},\;Ni^{2+},\;Zn{2+}$.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.37
no.1
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pp.83-90
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2020
Plate heat exchangers(PHE) have been commercialized since the 1920s. Since then, although the basic concept of PHEs has changed little, its design and construction have progressed significantly to accommodate higher temperatures, higher pressures, and large heat exchanging capacities. The development trend of PHEs is consistent with heat plate developments with better thermal efficiency, lower pressure drop, and good flow distribution. The purpose of this paper is to introduce the main development processes of a plate cooler for medium-speed engine lubricant oil cooling in vessels which is in line with the development trend of PHEs and to provide its thermal performance data that were found out during experimental tests. The plate cooler in this study cannot measure the wall temperatures directly due to its structural characteristics, so the heat transfer coefficients were calculated using the modified Wilson Plot method. The water-to-water tests were first conducted experimentally to figure out the characteristics of heat transfer coefficients and pressure drops on the water side and then the water-to-oil tests followed to obtain the heat transfer coefficients on the oil side. The test results showed that heat transfer coefficients and pressure drops on both water and oil side increased with flow rates, and it was also found that all the development targets of the plate cooler in this study were achieved successfully.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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