It has been reported that liver is a very important organ to xenotransplantation. Pig is known to be a most suitable species in transplantation of human organs. However, the physiological function of pig hepatocytes is not clear elucidated. Epidermal growth factor (EGF) is known to be a mitogen in various cell systems. Thus, we examined the effect of EGF on cell proliferation and its related signal cascades in primary cultured pig hepatocytes. EGF stimulates cell proliferation in a dose (>1ng/ml) dependent manner. EGF-induced increase of $[^3H]-thymidine$ incorporation was blocked by AG 1478 ($10^{-6}M$, an EGF receptor antagonist) genistein and herbymycin A (tyrosine kinase inhibitors, $10^{-6}M$), suggesting the role of activation and tyrosine phosphorylation of EGF receptor. In addition, EGF-induced increase of $[^3H]-thymidine$ incorporation was prevented by neomycin $(10^{-4}M)$, U73122 $(10^{-5}M)$ (phospholipase C [PLC] inhibitors), staurosporine ($(10^{-8}M)$, or bisindolylmaleimide I $(10^{-6}M)$ (protein kinase C [PKC] inhibitors), suggesting the role of PLC and PKC. Moreover, EGF-induced increase of $[^3H]-thymidine$ incorporation was blocked by PD 98059 (a p44/42 mitogen activated protein kinase [MAPK] inhibitor), SB 203580 (a p38 MAPK inhibitor), and SP 600125 (a JNK inhibitor). EGF increased the translocation of PKC from cytosol to membrane fraction and activated p42/44 MAPK, p38 MAPK and JNK. In conclusion, EGF stimulates cell proliferation via PKC and MAPK in cultured pig hepatocytes.
Purpose: Chitin and chitosan are nontoxic natural chelators that chelate radiostrontium effectively. The purpose of this study was to compare radiostrontium chelation of chitin and chitosan with that of well known chemical chelators, namely EDTA and DTPA. Materials and Methods: The chelaton rates of chitin, chitosan, EDTA and DTPA were compared using a column chromatography method (Sephadex G-25M, Sweden). Three kinds of chitins and four kinds of chitosans were used. All of them were water soluble. Results: Phosphated chitosan showed the highest chelation yield of 97% at pH 7. All of chitins, chitosans, EDTA and DTPA showed chelation yield of more than 90% independent of varing pH level. Conclusion: Chitin and chitosan have similar chelation rate as compared with EDTA and DTPA.
Kim, Jisu;Lee, Kang Pa;Kim, Bom Sahn;Lee, Sang Ju;Moon, Byung Seok;Baek, Suji
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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v.24
no.3
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pp.241-248
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2020
Luminespib (AUY922), a heat shock proteins 90 inhibitor, has anti-neoplastic and antitumor effects. However, it is not clear whether AUY922 affects events in vascular diseases. We investigated the effects of AUY922 on the platelet-derived growth factor (PDGF)-BB-stimulated proliferation and migration of vascular smooth muscle cells (VSMC). VSMC viability was detected using the XTT (2,3-bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide) reagent. To detect the attenuating effects of AUY922 on PDGF-BB-induced VSMCs migration in vitro, we performed the Boyden chamber and scratch wound healing assays. To identify AUY922-mediated changes in the signaling pathway, the phosphorylation of protein kinase B (Akt) and extracellular signal-regulated kinase (ERK) 1/2 was analyzed by immunoblotting. The inhibitory effects of AUY922 on migration and proliferation ex vivo were tested using an aortic ring assay. AUY922 was not cytotoxic at concentrations up to 5 nM. PDGF-BB-induced VSMC proliferation, migration, and sprout outgrowth were significantly decreased by AUY922 in a dose-dependent manner. AUY922 significantly reduced the PDGF-BB-stimulated phosphorylation of Akt and ERK1/2. Furthermore, PD98059 (a selective ERK1/2 inhibitor) and LY294002 (a selective Akt inhibitor) decreased VSMC migration and proliferation by inhibiting phosphorylation of Akt and ERK1/2. Greater attenuation of PDGF-BB-induced cell viability and migration was observed upon treatment with PD98059 or LY294002 in combination with AUY922. AUY922 showed anti-proliferation and anti-migration effects towards PDGF-BB-induced VSMCs by regulating the phosphorylation of ERK1/2 and Akt. Thus, AUY922 is a candidate for the treatment of atherosclerosis and restenosis.
In environmental friendly aspects, the synthesis of glycerol carbonate from glycerol using carbon monoxide and oxygen gases which were produced in petrochemical plants was studied. The oxidative carbonylation of glycerol under batch reaction system was performed on parameter conditions such as effect of various metals (Cu, Pd, Fe, Sn, Zn, Cr), oxidizing agents, mole ratio of carbon monoxide to oxygen, catalyst amount, solvent types, reaction temperature and time and dehydrating agents. In particular copper chloride catalysts showed the excellent activities, and the glycerol carbonate yields over CuCl and $CuCl_2$ catalysts were the maximum of 44% and 64%, respectively at the following reaction conditions: solvent as nitrobenzene, mole ratio of 1:3:0.15 (glycerol:carbon monoxide:catalyst), mole ratio of 2:1 (carbon monoxide:oxygen), the total pressure of 30 bar at 413 K for 4 hr. It was found that reactivity were significantly different depending on the oxidation number of Cu catalysts, and oxygen plays an important role as oxidizing agents in producing H2O during oxidation reaction after carbonylation of glycerol.
Objectives : Acupuncture is frequently used as an alternative therapy for Parkinson's disease(PD) in Korea. Using 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine(MPTP)-induced Parkinson's disease mouse model, the present study investigated a possible role of acupuncture stimulation at GB34 in suppressing dopaminergic neuronal death and regulating the phosphorylation of protein kinase B(Akt) in substantia nigra(SN) and striatum(ST). Methods : Eight-week-old male C57BL/6 mice were administered intraperitoneally with 30 mg/kg of MPTP at 24-h intervals for 5 days. Acupuncture stimulation at GB34 or SI3 was performed once a day for 12 days consecutively from the first MPTP injection. After the last acupuncture stimulation, pole test was performed to assess the effect of the acupuncture stimulations. Dopaminergic neuronal survival in the SN and the ST, dopamine transporter( DAT) and caspase-3 expression in the ST were evaluated by immunohistochemistry. The phosphorylations of Akt in the SN and the ST were measured by Western blotting. Results : MPTP administration caused behavioral impairment and dopaminergic neuronal death in the SN and the ST. It also decreased DAT expression and increased caspase-3 expression in the ST. Acupuncture stimulation at GB34 alleviated these MPTP-induced impairments. Moreover, MPTP suppressed Akt phosphorylation in the SN and the ST, whereas acupuncture stimulation at GB34 alleviated the phosphorylation in the SN. Conclusions : These results indicate that acupuncture stimulation at GB34 can inhibit MPTP-induced dopaminergic neuronal death and alleviate the Akt phosphorylation in the SN, suggesting a possible role for acupuncture in the treatment of PD.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.17
no.10
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pp.199-203
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2016
Apolipophorin-III (apoLp-III) was isolated and purified from the last larval hemolymph of Galleria mellonella by KBr gradient ultracentrifugation and gel chromatography (Sephadex G-100). After KBr gradient ultracentrifugation, the lipophorin-free fractions were used as the samples for gel chromatography. The purity of the finally purified apoLp-III was confirmed by SDS-PAGE after gel chromatography. In this study, we found that apoLp-III is taken up into the adult testes in Galleria mellonella. The testes were dissected from day-1 or -2 adults in cold Ringer's solution and used for tissue culture. The protein moiety of apoLp-III was labeled with FITC dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) at room temperature under conditions of continuous stirring for 1 h. The FITC-labeled apoLp-III was purified with a Sephadex G-25 PD-10 column. The tissues of the adult testes were incubated at room temperature for 30 min with fluorescein isothiocyanate (FITC)-labeled apoLp-III. Fluorescein microscopy and sodium dodecyl sulfate (SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) revealed that the adult testis tissues internalize the FITC-labeled apoLp-III. The results showed that apoLp-III is taken up by the adult testes.
This research was conducted to investigate the changes in soil chemical properties of root media as influenced by incorporation rate of a polyacryl amide hydrogel, Stocksorb C. The pH at 5 weeks after treatment in four root media such as peatmoss + vermiculite (1:1, v/v; PV), peatmoss + composted rice hull (1:1; PR), peatmoss + composted saw dust (1:1; PD) and peatmoss + composted pine bark (1:1; PB) containing STSB were in the range from 7.04 to 7.30, which was too high. Elevated incorporation rate of STSB resulted in increase of EC in soil solution of four root media with linear and quadratic response. The concentrations of $NH_4^+-N,\;NO_3^--N,\;PO_4-P^{3-},\;K^+,\;Ca^{2+}and\;Mg^{2+}$ in four kinds of root media increased as incorporation rates of STSB were elevated. But the $NO_3^-$-N concentrations in PS media were lower than those in other there root media tested. The Fe concentrations in PV, PR and PS media increased as incorporation rates of STSB were elevated, but those in PB medium did not show significant different. The concentrations of $Fe^{2+},\;Mn^{2+},\;Zn^{2+}and\;Cu^{2+}$ in PS media were higher than those in other three root media.
In this study, an attempt was made to increase the survival rate of bifidobacteria entrapped in alginate in the gastrointestinal tract, and to investigate the potential industrial applications, for example lyophilized capsules and yogurt. First, the protective effect of various food additives on bifidobacterial survivability was determined after exposure to simulated gastric juices and bile salts. The additives used in this study were skim milk (SM), polydextrose (PD), soy fiber (SF), yeast extract (YE), chitosan (CS), $\kappa$-carageenan ($\kappa$-C) and whey, which were added at 0.6% concentration (w/v) to 3% alginate-bifidobacterial solution. In the simulated gastric juices and bile salts, the protective effect of 0.6% skim milk-3% alginate (SM-A) beads on the survival rate of bifidobacteria proved to be higher than the other additives. Second, the hydrogen ion permeation was detected through SM-A vessel without bifidobacterial cells at different SM concentrations (0.2%, 0.4%, 0.6%, 0.8%, and 1.0%). There were no differences in terms of the pH decrease in SM-A vessels at 0.6%, 0.8%, and 1.0% (w/v) SM concentrations. The survival rate of bifidobacteria in SM-A beads would appear to be related to the SM buffering capacity against hydrogen ions and its tendency to reduce the pore size of bead. In this experiment, the survival rate of bifidobacteria entrapped in beads containing 0.6% SM showed the highest viability after exposure to simulated gastric juices for 3h, thereby indicating that 0.6% SM is the optimum concentration fir 3% alginate bead preparation. Third, the effect of SM-A beads on the freeze-drying and yogurt storage for 10 days was investigated. SM-A beads were found to be more efficient for freeze drying and yogurt storage than untrapped cells and the alginate bead. Consequently, the survival rate of bifidobacteria entrapped in SM-A beads was increased in simulated gastric juices, bile salts and probiotic products, such as lyophilized capsules and yogurt, SM-A beads can be expected to produce high value probiotic products.
Free Radical Scavening and inflammatory of the methanol extracts, which were prepared from 6 difffrent bran of rice, were evaluated to investigate bioactive substances. Among them, the extract of C3GHibyeo and Heugjinjubyeo showed strong DPPH scavening activities (73.25% and 50.38% at 0.4 mg/ml, respectively). The extract of C3GHibyeo and Heugjinjubyeo showed strong thrombin inhibition activities (258.76% and 243.52% inhibition at 5 mg/ml, respectively). The result of antibacterial activity by Zone assay showed that C3GHi rice extract $(250{\mu}g\;and\;500{\mu}g)$ inhibited attachment of Helicobactor pylori on the ATCC48504 and COO1 cell line. But no effect on the SEO cell line. Cytotoxicity of blackish purple rice extract on the H. pylori doesn't showed. These result support a functional superiority of rice-base livelihood, and suggest that the development of healthy food using functional ingredients of rice is possible.
Kim, Jack-C.;Kim, Ji-A;Park, Jin-Il;Kim, Si-Hwan;Kim, Seon-Hee;Choi, Soon-Kyu;Park, Won-Woo
Archives of Pharmacal Research
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v.20
no.3
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pp.253-258
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1997
Ten, heretofore unreported, $ 5^I-methyl-5^I-[2-(5-substituted uracil-1-yl)ethyl)]-2^I-oxo-3^I$-methylenetetrahydrofurans (H, F, Cl, Br, I, $ CH_3$,$CF_3$,$CH_2CH_3$,$ CH=CH2$, SePh) (7a-j) were synthesized and evaluated against four cell lines (K-562, FM-3A, P-388 and U-937). For the preparation of ${\alpha}$-methylene-${\gamma}$-butyrolactone-linked to 5-substituted uracils (7a-j), the convenient Reformasky type reaction was employed which involves the treatment of ethyl ${\alpha}$-(bromomethyl)acrylate and zinc with the respective 1-(5-substituted uracil-1-yl)-3-butanone (6a-j). The 5-substituted uracil ketones (6a-j) were directly obtained by the respective Michael type reaction of vinyl methyl ketone with the $K_2CO_3$(or NaH)-treated 5-substituted uracils (5a-j) in the presence of acetic acid in the DMF solvent. The .alpha.-methylene-.gamma.-butyrolactone compounds showing the most significant antitumor activity are 7e, 7f, 7h and 7j (inhibitory concentration $(IC_50)$ ranging from 0.69 to $2.9 {\mu}g/ml$), while 7b, 7g and 7i have shown moderate to significant activity. The compounds 7a, 7c and 7d were found to be inactive. The synthetic intermediate compounds 6a-j were also screened and found marginal to moderate activity where compounds 6b and 6g showed significant activity $(IC_50:0.4~2.8 {\mu}g/ml)$.
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