Src homology (SH) domains of phospholipase C-$\gamma1$ (PLC-$\gamma1$) impair NGF-mediated PC12 cells differentiation. However, whether the enzymatic activity is also implicated in this process remains elusive. Here, we report that the enzymatic activity of phospholipase C-$\gamma1$ (PLC-$\gamma1$) is at least partially involved to the blockage of neuronal differentiation via an abrogation of MAPK activation, as well as sustained Akt activation. By contrast, Overexpression of WT-PLC-$\gamma1$ exhibited sustained NGF-induced MAPK activation, and triggered transient Akt activation resulting in profound inhibition of neurite outgrowth. However, lipase-inactive mutant (LIM) PLC-$\gamma1$ cells fail to suppress neurite outgrowth, although it contains intact SH domains, specifically enhancing the expression of cyclin D1 and p21 proteins, which regulate the function of retinoblastoma Rb protein. These observations show that the lipase inactive mutant of PLC-$\gamma1$ does not alter NGF-induced neuronal differentiation via enzymatic inability and the modulation of cell cycle regulatory proteins independent on SH3 domain.
Kang, Sun-Young;Kim, Su-Na;Kim, Sang Hee;Jeon, Sang-Hak
Molecules and Cells
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v.21
no.3
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pp.436-442
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2006
Different proliferation of neuroblast 6-4 (NB6-4) in the thorax and abdomen produces segmental specific expression pattern of several neuroblast marker genes. NB6-4 is divided to form four medialmost cell body glia (MM-CBG) per segment in thorax and two MM-CBG per segment in abdomen. As homeotic genes determine the identities of embryonic segments along the A/P axis, we investigated if temporal and specific expression of homeotic genes affects MM-CBG patterns in thorax and abdomen. A Ubx loss-of-function mutation was found to hardly affect MM-CBG formation, whereas abd-A and Abd-B caused the transformation of abdominal MM-CBG to their thoracic counterparts. On the other hand, gain-of-function mutants of Ubx, abd-A and Abd-B genes reduced the number of thoracic MM-CBG, indicating that thoracic MM-CBG resembled abdominal MM-CBG. However, mutations in Polycomb group (PcG) genes, which are negative transregulators of homeotic genes, did not cause the thoracic to abdominal MM-CBG pattern transformation although the number of MM-CBG in a few percent of embryos were partially reduced or abnormally patterned. Our results indicate that temporal and spatial expression of the homeotic genes is important to determine segmental-specificity of NB6-4 daughter cells along the anterior-posterior (A/P) axis.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2011.08a
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pp.377-377
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2011
Organic solar cells (OSCs) with low cost have been studied to apply on flexible substrate by solution process in low temperature [1]. In previous researches, conventional organic solar cell was composed of metal oxide anode, buffer layer such as PEDOT:PSS, photoactive layer, and metal cathode with low work function. In this structure, indium tin oxide (ITO) and Al was generally used as metal oxide anode and metal cathode, respectively. However, they showed poor reliability, because PEDOT:PSS was sensitive to moisture and air, and the low work function metal cathode was easily oxidized to air, resulting in decreased efficiency in half per day [2]. Inverted organic solar cells (IOSCs) using high work function metal and buffer layer replacing the PEDOT:PSS have focused as a solution in conventional organic solar cell. On the contrary to conventional OSCs, ZnO and TiO2 are required to be used as a buffer layer, since the ITO in IOSC is used as cathode to collect electrons and block holes. The ZnO is expected to be excellent electron transport layer (ETL), because the ZnO has the advantages of high electron mobility, stability in air, easy fabrication at room temperature, and UV absorption. In this study, the IOSCs based on poly [N-900-hepta-decanyl-2,7-carbazole-alt-5,5-(40,70-di-2-thienyl-20,10,30-benzothiadiazole)] (PCDTBT) : [6,6]-phenyl C71 butyric acid methyl ester (PC70BM) were fabricated with the ZnO electron-transport layer and MoO3 hole-transport layer. Thickness of the ZnO for electron-transport layer was controlled by rotation speed in spin-coating. The PCDTBT and PC70BM were mixed with a ratio of 1:2 as an active layer. As a result, the highest efficiency of 2.53% was achieved.
The effect of KamiTongJonHaaATang extracts on hypercholesterolemia, platelet aggregation, pulm onary thrombosis, KCN-induced coma, forcal brain ischemia, cytotoxicity of PC12 cells induced by amyloid ${\beta}$ protein(25-35), and NO production in RAW cells stimulated lipopolysaccharide were investigated, respectively. The results were summarized as follows; 1. KTJHAT extracts showed a significant decrease of serum total cholesterol, triglyceride, phospholipid, LDL-cholesterol, and VLDL-cholesterol in hypercholesterolemia induced by 2% cholesterol diet in NZW rabbit. 2. KTJHAT extracts induced a significant inhibition of human platelet aggregation induced by thrombin and ADP but did not affect human platelet aggregation induced by collagen. 3. KTJHAT extracts showed a protective effect on pulmonary thrombosis induced by collagen and epinephrine. 4. KTJHAT extracts prolonged the duration of KCN-induced coma. 5. KTJHAT extracts showed a significant decrease of brain ischemic area and edema in MCA occlusion. Also, KTJHAT extracts showed a decrease of neurologic grade in hind limb but did not affect neurologic grade in fore limb. 6. KTJHAT extracts showed a protective effect on cytotoxicity of PC 12 cells induced by amyloid ${\beta}$ protein(25-35) in a dose dependent manner. 7. KTJHAT extracts showed a significant decrease of NO production in RAW cells induced by lipopolysaccharide. These results suggested that KTJHAT extracts might be usefully applied for prevention and treatement of thrombosis and brain damage.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.101-101
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2003
Main strategy for a treatment of Parkinson's disease (PD), due to a progressive degeneration of dopaminergic neurons, is a pharmaceutical supplement of dopamine derivatives or ceil replacement therapy. Both of these protocols have pros and cons; former exhibiting a dramatic relief but causing a severe side effects on long-term prescription and latter also having a proven effectiveness but having availability and ethical problems Embryonic stem (ES) cells have several characteristics suitable for this purpose. To investigate a possibility of using ES cells as a carrier of therapeutic gene(s), human ES (hES, MB03) cells were transfected with cDNAs coding for tyrosine hydroxylase (TH) in pcDNA3.1 (+) and the transfectants were selected using neomycin (250 $\mu /ml$). Expression of TH being confirmed, two of the positive clone (MBTH2 & 8) were second transfected with GTP cyclohydrolase 1 (GTPCH 1) in pcDNA3.1 (+)-hyg followed by selection with hygromycin-B (150 $\mu /ml$) and RT-PCR confirmation. By immune-cytochemistry, these genetically modified but undifferentiated dual drug-resistant cells were found to express few of the neuronal markers, such as NF200, $\beta$-tubulin, and MAP2 as well as astroglial marker GFAP. This results suggest that over-production of BH4 by ectopically expressed GTPCH I may be involved in the induction of those markers. Transplantation of the cells into striatum of 6-OHDA- denervated PD animal model relieved symptomatic rotational behaviors of the animals. Immunohistochemical analyses showed the presence of human cells within the striatum of the recipients. These results suggest a possibility of using hES cells as a carrier of therapeutic gene(s).
We investigate the effect of light intensity and wavelength of a solar cell device using photoconductive atomic force microscopy(PC-AFM). A $POCl_3$ diffusion doping process is used to produce a p-n junction solar cell device based on a polySi wafer, and the electrical properties of prepared solar cells are measured using a solar cell simulator system. The measured open circuit voltage($V_{oc}$) is 0.59 V and the short circuit current($I_{sc}$) is 48.5 mA. Moreover, the values of the fill factors and efficiencies of the devices are 0.7 and approximately 13.6 %, respectively. In addition, PC-AFM, a recent notable method for nano-scale characterization of photovoltaic elements, is used for direct measurements of photoelectric characteristics in limited areas instead of large areas. The effects of changes in the intensity and wavelength of light shining on the element on the photoelectric characteristics are observed. Results obtained through PC-AFM are compared with the electric/optical characteristics data obtained through a solar simulator. The voltage($V_{PC-AFM}$) at which the current is 0 A in the I-V characteristic curves increases sharply up to $18W/m^2$, peaking and slowly falling as light intensity increases. Here, $V_{PC-AFM}$ at $18W/m^2$ is 0.29 V, which corresponds to 59 % of the average $V_{oc}$ value, as measured with the solar simulator. Furthermore, while the light wavelength increases from 300 nm to 1,100 nm, the external quantum efficiency(EQE) and results from PC-AFM show similar trends at the macro scale but reveal different results in several sections, indicating the need for detailed analysis and improvement in the future.
Resistance to apoptosis is a major obstacle preventing effective therapy for malignancies. Bcl-2 plays a significant role in inhibiting apoptosis. We reconstructed a stable human Bcl-2 transfected cell line, BIU87-Bcl-2, that was derived from the transfection of human bladder carcinoma cell line BIU87 with a plasmid vector containing recombinant Bcl-2 [pcDNA3.1(+)-Bcl-2]. A cell line transfected with the plasmid alone [pcDNA3.1(+)-neo] was also established as a control. BIU87 and BIU87-neo proved sensitive to adriamycin induced apoptosis, while BIU87-Bcl-2 was more resistant. In view of the growing evidence that NF-${\kappa}B$ may play an important role in regulating apoptosis, we determined whether Bcl-2 could modulate the activity of NF-${\kappa}B$ in bladder carcinoma cells. Stimulation of BIU87, BIU87-neo and BIU87-Bcl-2 with ADR resulted in an increase expression of NF-${\kappa}B$ (p<0.001). The expression of NF-${\kappa}B$ in BIU87-Bcl-2 was higher than in the other two cases, with a concomitant reduction in the $I{\kappa}B{\kappa}$ protein level. These results suggest that the overexpression of Bcl-2 renders human bladder carcinoma cells resistant to adriamycin-induced cytotoxicity and there is a link between Bcl-2 and the NF-${\kappa}B$ signaling pathway in the suppression of apoptosis.
Sea cucumber, Holothuria scabra, is a well-known traditional Asian medicine that has been used for suppressing inflammation, promoting wound healing, and improving immunity. Moreover, previous studies demonstrated that the extract from H. scabra contains many bioactive compounds with potent inhibitory effect on tumor cell survival and progression. However, the effect of the methanolic extract from the body wall of H. scabra (BWMT) on human prostate cancer cells has not yet been investigated. In this study, we aimed to investigate the effects and underlying mechanism of BWMT on prostate cancer cell viability and metastasis. BWMT was obtained by maceration with methanol. The effect of BWMT on cell viability was assessed by MTT and colony formation assays. The intracellular ROS accumulation was evaluated using a DCFH-DA fluorescence probe. Hoechst 33342 staining and Annexin V-FITC/PI staining were used to examine the apoptotic-inducing effect of the extract. A transwell migration assay was performed to determine the anti-metastasis effect. BWMT significantly reduced cell viability and triggered cellular apoptosis by accumulating intracellular ROS resulting in the upregulation of JNK and p38 signaling pathways. In addition, BWMT also inhibited the invasion of PC3 cells by downregulating MMP-2/-9 expression via the ERK pathway. Consequently, our study provides BWMT from H. scabra as a putative therapeutic agent that could be applicable against prostate cancer progression.
This study was conducted to investigate the effects of dietary herbal plant mixture on growth performance, blood immunological parameters, fecal VFA and NH3-N concentrations in growing pigs. The dietary treatments were 1) NC (negative control; antibiotics-free diet), 2) PC (positive control; NC diet added 0.16% antibiotic), 3) NCK0.2 (NC diet added 0.2% herbal plant mixture (koppuul??)) and 4) PCK0.1 (PC diet added 0.1% herbal plant mixture (koppuul??)). Eighty crossbred (Landrace×Yorkshire×Duroc) pigs (16.35±0.05kg average initial body weight) were used for 42 days. The pigs were assigned to the treatments according to body weight and each treatment had 5 replicates of 4 pigs per pen in a randomized complete block design. During the whole experimental period, PCK0.1 and PC treatments had significantly higher ADG than NC treatment (P<0.05). Gain/feed of pigs fed PC diet was higher than that of pigs fed NC diet (P<0.05). For blood immunological parameters investigations, white blood cells (WBC) counts and IgG level increased in the pigs fed PC, NCK0.2 and PCK0.1 diets compared to pigs fed NC diet. In addition, higher (P<0.05) serum lymphocyte concentration was found in PCK0.1 treatment compared to NC treatment. NH3-N concentration in pigs fed NCK0.2% diet was lower than that in pigs fed PC and NC diets. There were no significant differences in DM and N digestibilities among the treatments. In conclusion, the results suggested that the dietary additions of herbal plant mixture or antibiotics increase ADG, the concentrations of WBC counts and IgG, lymphocyte, while decrease NH3-N concentration in feces.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2002.11a
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pp.75-75
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2002
The present study was conducted for the production of transgenic cloned cows by somatic cell nuclear transfer (SCNT) that secrete human prourokinase into milk. To establish an efficient production system for bovine transgenic SCNT embryos, the offset was examined of various conditions of donor cells including cell type, size, and passage number on the developmental competence of transgenic SCNT embryos. An expression plasmid far human prourokinase (pbeta-ProU) was constructed by inserting a bovine beta-casein promoter, a green fluorescent protein (GFP) marker gene, and a human prourokinase target gene into a pcDNA3 plasmid. Three types of bovine somatic cells including two adult cells (cumulus cells and ear fibroblasts) and fetal fibroblasts were prepared and transfected using a lipid-meidated method. In Experiment 1, developmental competence and rates of GFP expression in bovine transgenic SCNT embryos reconstructed with cumulus cells were significantly higher than those from fetal and ear fibroblasts. In Experiment 2, the effect of cellular senescence in early (2 to 4) and late (8 to 12) passages was investigated. No significant differences in the development of transgenic SCNT embryos were observed. In Experient 3, different sizes of GFP-expressing transfected cumulus cells [large (>30 ${\mu}{\textrm}{m}$) or small cell (<30 ${\mu}{\textrm}{m}$)] were used for SCNT. A significant improvement in embryo development and GFP expression was observed when small cumulus cells were used for SCNT. Taken together, these results demonstrate that (1) adult somatic cells could serve as donor cells in transgenic SCNT embryo production and cumulus cells with small size at early passage were the optimal cell type, and (2) transgenic SCNT embryos derived from adult somatic cells have embryonic development potential.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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