• Laboraroty Animal Research
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• 제34권4호
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• pp.264-269
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• 2018

Cell cycle dysfunction can cause severe diseases, including neurodegenerative disease and cancer. Mutations in cyclin-dependent kinase inhibitors controlling the G1 phase of the cell cycle are prevalent in various cancers. Mice lacking the tumor suppressors $p16^{Ink4a}$ (Cdkn2a, cyclin-dependent kinase inhibitor 2a), $p19^{Arf}$ (an alternative reading frame product of Cdkn2a,), and $p27^{Kip1}$ (Cdkn1b, cyclin-dependent kinase inhibitor 1b) result in malignant progression of epithelial cancers, sarcomas, and melanomas, respectively. Here, we generated knockout mouse models for each of these three cyclin-dependent kinase inhibitors using engineered nucleases. The $p16^{Ink4a}$ and $p19^{Arf}$ knockout mice were generated via transcription activator-like effector nucleases (TALENs), and $p27^{Kip1}$ knockout mice via clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated nuclease 9 (CRISPR/Cas9). These gene editing technologies were targeted to the first exon of each gene, to induce frameshifts producing premature termination codons. Unlike preexisting embryonic stem cell-based knockout mice, our mouse models are free from selectable markers or other external gene insertions, permitting more precise study of cell cycle-related diseases without confounding influences of foreign DNA.

• 미생물학회지
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• 제50권1호
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• pp.73-83
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• 2014

단백질이 풍부한 식품을 고온 하에서 조리하는 과정 중에 주로 발생되는 돌연변이원 heterocyclic amines (HCAs)에 대한 유산균의 결합력 및 제거능을 조사하였다. 당 발효능 및 16S rRNA 염기서열 분석을 통해 동정된 19종의 유산균 중 Lactobacillus acidophilus D11, Enterococcus faecium D12, Pediococcus acidilactici D19, L. acidophilus D38, Lactobacillus sakei D44, Enterococcus faecalis D66 및 Lactobacillus plantarum D70의 세포이나 배양 상등액은 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido[4,3-b]indole (Trp-P-1)과 3-amino-1-methyl-5Hpyrido[4,3-b] indole (Trp-P-2)에 의한 Salmonella typhimurium TA98 및 TA100의 돌연변이 유발을 억제할 수 있었다. HCAs에 대한 유산균 세포의 결합력은 cell wall, exopolysaccharide 및 peptidoglycan 보다 높게 나타났다. 한편, 이들의 결합력은 단백질 분해효소, 가열, sodium metaperiodate 및 산 처리에 의해 유의하게 감소되었으므로 세포벽에 존재하는 당이나 단백질 성분이 이들 HCAs을 결합시키는데 중요한 역할을 하는 것으로 확인되었다. 또한 E. faecium D12, L. acidophilus D38 및 E. faecalis D66의 결합력은 SDS나 금속이온에 의해 감소되었으므로 이들세포와 돌연변이원 사이에는 이온 결합이나 소수성 결합이 작용하는 것으로 추정되었다. 한편, HCAs 결합력이 높은 L. acidophilus D38과 L. plantarum D70은 장관 상피세포에 대한 부착력이 낮으므로 돌연변이원을 세포에 결합시켜 체외로 배출함으로써 독성물질을 제거하는데 효과적인 것으로 확인되었다.

• 대한바이러스학회지
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• 제26권2호
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• pp.259-267
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• 1996

In order to evaluate the effect of viral load on the prognosis of human immunodeficiency virus-1 (HIV-1)-infected individuals, immune complex dissociated (ICD) serum p24 antigen (p24) by acid treatment was retrospectively measured for 50 HIV-infected patients for 60 months. Among them, 27 patients were p24 positive (p24+) above 25pg/ml for $40.4{\pm}12$ months and 23 patients were negative (p24-). Follow-up periods from HIV diagnosis were $63.0{\pm}19$ months (range; 40-112) for the p24+ and $68.4{\pm}19$ months (range; 38-106) for the p24-, respectively (P>0.05)Mean CD4+T cell counts in the p24+ group decreased from $473{\pm}$277/ul (median;373) to $157{\pm}150/ul$ (median; 111) for $60{\pm}16$ months (5.3/month P280/ul (median; 476) to $432{\pm}285/ul$ (median;382) for $63{\pm}19$ months (2.5/month, P<0.01). From CD4+T cell count >200/ul, the patient who progressed to AIDS of <200/ul were 13 of 23 (56%) in the p24+ and 4 of 22 (18%) in p24-, respectively (p<0.01). And the number of death in two groups were 6 (22%) and 1 (4%), respectively (p<0.01). Presumed survival in two groups were about 12 and 24.5 years. These data suggest that viral load itself be very important for the prognosis of HIV-infected patients.

• 미생물과산업
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• 제19권2호
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• pp.2-10
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• 1993

이 총론에서는 cell cycle의 조절에 관계하는 p34cdc kinase의 특성과 기질 그리고 cell cycle에서의 역할을 살펴보고, 또 cell cycle에서와 여러가지 세포내의 현상에 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 casein kinase II의 특성과 기질 그리고 cell cycle에서의 역할을 살펴보고자 한다. 그리고 이런 효소들을 연구하는 데 필수적인 방법이나 시약들로 소개하고자 한다.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제19권4호
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• pp.411-418
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• 2011

Ginsenoside Rp1 (G-Rp1) is a novel ginseng saponin derivative with anti-tumor activity. However, the biochemical and molecular mechanisms of G-Rp1 on anti-tumor activity are not fully understood. In the present study, we report that G-Rp1 inhibits lung cancer cell proliferation, migration and adhesion in p53 wild-type A549 and p53-defi cient H1299 cells. Anti-proliferative activity of G-Rp1 in lung cancer cells is mediated by enhanced nuclear localization of cyclin-dependent kinase inhibitors including $p27^{Kip1}$ and $p21^{WAF1/Cip1}$, and subsequent inhibition of pRb phosphorylation. We also show that these anti-tumor activities of G-Rp1 in both A549 and H1299 cells appear to be mediated by suppression of mitogenic signaling pathways such as ERK, Akt and $p70^{S6K}$. Taken together, these findings suggest further development and evaluation of G-Rp1 for the treatment of lung cancers with mutated p53 as well as wild-type p53.

• Journal of Chest Surgery
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• 제30권9호
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• pp.899-907
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• 1997

원발성 폐암은 최근 들어 급격히 증가되고 있다. 전북대학교 의과대학 흉부외과학 교실에서는 1979년 7월 부터 1996년 6월까지 비소세포성 폐암으로 수술받은 183례를 대상으로 관찰하였다. 성별은 남자 164명, 여자 19명(M:F=8.6:1)이었고, 호발연령군은 50대와 60대로 모두 135례(73.7%)였다. 대부 분의 증상은 호흡기 계통으로 기침 44.8%,흉통 30.1%,호흡곤란 20.8%. 객혈 19.7%, 객담 15.3%,그리고 무 증상이 12.0%였다. 병리 조직학적 분류로 편평상피세포암이 68.9%,선암 19.7%, 기관지 폐포암 2.2%, 선편평상피세포암 1.6%, 대세포암 7.7%였다. 수술방법은 일측 전폐절제술이 75례(41.0%), 폐엽절제술이 77례(42.1%), 이 엽절제술이 24례(13.1%), 구역 및 부분 절제술이 3례(1.6%), 시험개흉술이 4례(2.2%)였으며, 절제율은 97.8%였다. 수술후 합병증은 32.2%에서 발생하였으며, 수술로 인한 조기 사망은 1.6%였다. 병기별 분포는 stage 138.3%, stage II 14.8%, stage IIIa 31.1%, stage IIIb 15.8%였다. 전체 생존율은 1년, 3년, 5년에서 각각 77.8%, 42.7%, 39.5%였으며, 병기별 5년 생존율은 stage 153.0%, stage II 46.5%, stage IIIa 28.2%, stage IIIb 13.8%로 통계적으로 유의한 차이를 보였고(p<0.05), 수술방법에 의한 5년 생존율은 폐엽절제술이 45.0%, 일측 전계절제술이 30.3%로 유의한 차이를 보였으며(p<0.05), 종격동 림프절 전이가 있는 N2 환자의 5년 생존율은 11.1%였고 Nl환자는 32.0%로 유의한 차이를 보였다(p<0.05). 조직형별 5년 생존율은 편평상피세포암이 43.1%, 선암이 23.3%, 거대세포암이 30.3%였다(p>0.05).치료법이며 앞으로 장기적인 추적검사가 필요하리라 생각된다.ricuspid valve pouch 19례), 우심실 유출로폐쇄(4례), 아급성심내막염(1례) 및 동반질환을 부가적인 수술적응으로 삼았다. 6. 수술후 관찰결과 사망률은 없었고, 잔존 심실중격결손증도 없었다. 이상의 결과로 경삼첨판륜 절개방법(TATV)은 삼침판맹낭을 가지고 있는 막성주위형 심실중격결손증 (PMVSD) 수술시 좋은 방법이며, 또한 막성주위형 심실중격결손증(PMVSD)에서 수술시 시야를 좋게하고 수술후 삼첨판폐쇄부전에 악영향을 미치지 않는 결과로 안전하고 효과적인 방법으로 사료된다.량치가 뜻하는 의 미는 서로 달랐으며, 암조직내에서 대조조직내보다 CYFRA 21-1 치가 더 낮게 나온 것은 암세포내 에서는 세 포질 성분의 고갈로 인한 것으로 추정되며 암세포의 활동성과는 무관한 것으로 판단된다. EGF-R은 세포벽내에 존재하는 수용체로서 암세포의 증식에 따라 증가하는 양상을 보이며 대조조직보다는 암세포에서 유의한 증가를 보이는 것은 종양 증식과 암표지자로서 의의가 있는 것으로 판단된다.것이 수술 결과를 좋게 하는 방법이라고 사료된다.료의 축적을 통한 신생대동맥근위부 확쏭 진행여부에 주의를 기울여야하겠다.록 mosaic 형태로 외래유전자가 발현되었지만 대조구에서 87.0% (26/30개) 배반포기가 $\beta$-Gal 활력을 보인 반면, G418 처리구에서는 모든 배반포기가 $\beta$-Gal 활력을 보였다 (P<0.05). 그러나 대조구 및 G418 처리구의 ICM colony에서는 영양배엽과 내배엽을 제외한 epiblast에서는 확인되지 않았다. 그러나 이 결과로부터 $\beta$-actin promoter/lacZ gene이 integration되지 않는 것인지 또는 다만 염색 확인이 되지 않는 것인지를 판단할 수는 없다. 이상의 결과는 미세주입후

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제42권2호
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• pp.149-155
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• 1995

연구목적: Cytokeratin 19는 기관지의 상피세포와 같은 단순 또는 가중층상피세포에 국한된 40KD의 산성 분자로 면역조직학적 검사를 통해 cytokeratin 19가 폐암 조직에서 많이 발현되는 것으로 알려져 있다. Cytokeratin 19에 특징적인 단일 클론 항체 BM 19-21과 KS 19-1을 이용한 면역방사계수법, CYFRA 21-1을 이용하여 cytokeratin 19분절이 폐암 특히 편평상피세포암의 진단에 유용한 표지자가 될 수 있다는 보고가 있어 폐암 표지자로서 CYFRA 21-1의 유용성을 조사해 보기 위하여 본 연구를 하였다. 방법: 저자 등은 영남대학교 의과대학 부속병원 내과에 1993년 4월부터 1994년 8월까지 입원한 원발성 폐암 환자 39명(편평상피 세포암 19명, 선암 11명, 소세포암 9명)을 폐암군으로, 비악성 호흡기질환자 15명(폐결핵 8명, 만성 폐색성 폐질환 3명, 폐렴 2명, 만성 폐색성 폐질환과 폐결핵이 동반된 환자 2명)을 대조군으로 하여 새로운 폐암 표지자의 가능성이 있는 CYFRA 21-1의 유용성을 조사하였다. CYFRA 21-1의 측정은 면역방사계수측정 kit인 ELSA-CYFRA 21-1을 사용하였다. 결과: 폐암의 조직학적 분류에 따른 CYFRA 21-1의 혈중 측정치는 편평상피세포암이 $20.2{\pm}4.7ng/ml$, 선암이 $7.2{\pm}1.6ng/ml$, 비소세포암이 $15.5{\pm}4.7ng/ml$로 모두 대조군의 $1.7{\pm}0.5ng/ml$보다 유의하게 증가되어 있었다(p<0.01). 또한 비소세포암중 편평상피세포암에서 선암보다 유의하게 증가되어 있었다(p<0.05). 그러나 소세포암에서는 $2.9{\pm}0.9ng/ml$로 대조군과 유의한 차이가 없었다. CYFRA 21-1의 정상 범위를 3.3ng/ml 이내로 하였을때 소세포암에서는 민감도 11.1%, 특이도 65.2% 였으나, 비소세포암에서는 민감도 70.0%, 특이도 62.5%였고 이 중 편평상피 세포암인 경우 민감도 73.7%, 특이도 75%였으며 선암인 경우 63.6%, 78.9%로 산출되었다. 결론: CYFRA 21-1은 비소세포암의 종양 표지자로 유용성이 있을 것으로 생각되며, 특히 편평상피 세포암의 진단에 도움이 될 것으로 생각되었다.

• 대한의생명과학회지
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• 제17권3호
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• pp.267-271
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• 2011

P19 cells are pluripotent embryonal carcinoma cells and can be differentiated into neuronal cell type by treatment with retinoic acid (RA) and aggregation culture. Cannabinoids are the active components of Cannabis sativa and they have diverse pharmacologic activities, such as pain control, anti-inflammatory effects, neuro-protection effects and tumor regression. Cannabinoids also involved in neuronal proliferation, migration, differentiation and survival in developing brain. Here, we studied the role of cannabinoids on neuronal differentiation of P19 cells. Treatment with cannabinoids increased the neuronal differentiation induced by RA and also promoted transcriptional activity of neurogenin 1, key transcription factor for neuronal differentiation of P19 cells. These results suggest that the cannabinoids can accelerate neuronal differentiation of P19 cells.

• Current Research on Agriculture and Life Sciences
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• 제7권
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• pp.83-97
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• 1989

본 실험은 일정한 발달단계(發達段階)에 있는 생쥐배(胚)를 응집시킬때 세포응집소인 Phytohemagglutinin-P(PHA-P)를 첨가 라화배(裸化胚)의 응집율과 응집된 배(胚)를 in vitro에서 배양하였을때의 배양율 및 적당한 PHA-P의 첨가농도를 조사하여 Chimera배(胚)를 생산하는데 필요한 기초지식을 얻기 위하여 실시(實施)하였다. Albino BALB/C와 CBA계통 및 C57BL 계통의 생쥐에 pregnant mare Serum gonadotropin와 human chorionic gonadotropin를 투여하여 과배란 생쥐에 PMSG와 hCG를 투여하여 과배란을 유기, 회수된 생쥐의 4세포기, 8세포기 및 상실배기 수정란을 1.0% Protease 용액으로 투명대를 제거(除去)하고 PHA-P를 첨가한 배양액에서 미세한 초자봉(硝子棒)으로 계통(系統)이 다른 두 계통(系統)의 생쥐의 배(胚)를 응집시킨 다음 응집된 배를 $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 95% Air의 배양기 조건하에서 13~50 시간 배양하면서 Chimera배(胚)의 발달상태를 조사하였다. 본(本) 실험에서 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 1.0% Protease 또는 1.0% Protease 및 $5ug/m{\ell}$ PHA-P가 첨가된 산성 Tyrode액에서 투명대를 제거한 라화배(裸化胚)를 배반포까지 배양했을때 유의차는 없었으나 4세포기배와 8세포기배 보다 상실기배가 더 잘 발달되었으며 또한 PHA-P를 첨가하였을때가 첨가하지 아니한 때 보다 다소 좋은 경향을 보였다. 2. PHA-P $2ug/m{\ell}$첨가시 4세포기, 8세포기 및 상실기배의 응집율은40.0~82.0%, $5ug/m{\ell}$첨가시에는 52.0~94.0%, $10ug/m{\ell}$ 첨가시에는 48.0~96.0%로 배(胚)의 발달단계(發達段階)에 따라서는 4세포기, 8세포기가 상실배기 보다 유의적으로 높았다 (P<.05). PHA-P의 처리수준에 의한 응집율에 있어서는 5 또는 $10ug/m{\ell}$첨가구가 $2ug/m{\ell}$첨가구 보다 조금 높게 나타났으나 유의차는 없었다. 3. 응집배의 상실배까지의 배양율은 PHA-P의 각(各) 수준간 및 각(各) 세포기간에 유의차가 인정되지 않았다. 응집배의 배반포까지의 배양율은 PHA-P 수준사이에는 유의차가 없었으나 4세포기와 8세포기의 배(胚)는 상실기 배(胚)보다 유의적으로 높은 배양율을 보였다 (P<.05). 4. 응집된 배(胚)가 배반포까지 발달하는데 소요되는 평균시간은 4세포기배가 38.5~40시간, 8세포기배가 26~27시간, 상실기배가 19~20시간이었다. 5. 응집율은 34.0~94.0%의 범위로서 PHA-P를 첨가할때 응집율이 더 좋은 경향을 보였으나 유의성은 인정되지 않았다. 4세포기와 8세포기의 배(胚)가 상실기배 보다 유의적으로 높았다(P<.05). 6. 응집배의 상실배까지의 발달율은 4세포기배가 52.7~84.7%, 8세포기배가 73.8~872% 였으며 세포기 사이에는 유의차는 나타나지 않았다. 그러나 PHA-P를 첨가한 것이 발달이 더 좋았다. 7. 응집배의 배반포까지의 발달율은 4세포기의 배(胚)가 41.7~77.7%, 8세포기의 배(胚)는 78.7~83.0% 상실기배가 0~19.2%였으며 4세포기의 PHA-P 처리가 미처리(未處理) 보다 유의적으로 높았다(P<.05). PHA-P를 처리했을 때 4세포기와 8세포기가 상실기의 배(胚) 보다 더 높은 발달율을 보였다.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제19권4호
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• pp.299-306
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• 2014

Hesperetin has been shown to possess a potential anti-angiogenic effect, including vascular formation by endothelial cells. However, the mechanisms underlying the potential anti-angiogenic activity of hesperetin are not fully understood. In the present study, we evaluated whether hesperetin has anti-angiogenic effects in human umbilical vascular endothelial cells (HUVECs). HUVECs were treated with 50 ng/mL vascular endothelial growth factor (VEGF) to induce proliferation as well as vascular formation, followed by treatment with several doses of hesperetin (25, 50, and $100{\mu}M$) for 24 h. Cell proliferation and vascular formation were analyzed using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide and tube formation assay, respectively. In addition, cell signaling related to cell proliferation and vascular formation was analyzed by western blot. Furthermore, a mouse aorta ring assay was performed to confirm the effect of hesperetin on vascular formation. Hesperetin treatment did not cause differences in HUVECs proliferation. However, hesperetin significantly inhibited VEGF-induced cell migration and tube formation of HUVECs (P<0.05). Moreover, hesperetin suppressed the expression of ERK, p38 MAPK, and PI3K/AKT in the VEGF-induced HUVECs. In an ex vivo model, hesperetin also suppressed microvessel sprouting of mouse aortic rings. Taken together, the findings suggest that hesperetin inhibited vascular formation by endothelial cells via the inhibition of the PI3K/AKT, ERK and p38 MAPK signaling.