A 2${\times}$3 factorial arrangement of treatments was used to determine the effects of olaquindox and cyadox on immune response of Landrace${\times}$Large-White geld piglets that had been orally given 10$^{10}$ CFU of Escherichia coli (E. coli, O$_{139}$:K$_{88}$). Factors included (1) E. coli inoculation or control, and (2) no antimicrobials, 100 mg/kg olaquindox and 100 mg/kg cyadox in the basal diet respectively. E. coli inoculums were orally administered 7 days after the diets were supplemented with olaquindox and cyadox. The effects of the two antimicrobials were assessed in terms of: (1) average daily gain (ADG), (2) systemic immune response (the number of white blood cells and lymphocytes, leukocyte bactericidal capacity, lymphocyte proliferation response to PHA, immunoglobulin concentrations, and total serous hemolytic complement activity), and (3) intestinal mucosal immunity including the number of intraepithelial lymphocytes (IELs) and immunoglobulin A secreting cells (ASCs) in the intestinal lamina propria. E. coli inoculation reduced ADG (p<0.05) during the period of d 0 to d 14 after the challenge while the antimicrobial supplementations improved ADG (p<0.01) during the experiment. ADG in cyadox-supplemented pigs was higher (p<0.05) than that in olaquindox-supplemented pigs. The antimicrobials decreased IEL and ASC counts in the jejunum and ileum (p<0.01) while E. coli inoculation caused them to increase (p<0.01). Jejunal ASCs in the cyadox-supplemented pigs were lower (p<0.05) than those in the olaquindox-supplemented. E. coli elicited increase (p<0.05) in white blood cell counts, leukocyte bactericidal capacity, lymphocyte proliferation rate, serous IgA concentrations, and serous hemolytic complement activity. The antimicrobials decreased the measured systemic immune parameters, but not significantly (p>0.05). The data suggest that olaquindox and cyadox suppress E. coli-induced immune activation, especially intestinal mucosal immune activation, which may be involved in the observed growth promotion.
천마의 분말과 50% 에탄올 및 열수추출물이 돼지기름(lard 10%)을 첨가한 고지방식이를 급여한 흰쥐의 체중증가율, 혈청지질과 테스토스테론농도, 혈당치 및 정소상체지방패드(EFP) 등에 미치는 영향을 조사하였다. 시험기간 중 체중증가율은 식이군간 통계적인 차이는 없었지만 대조군(A, B)과 열수추출물군(G)이 높았고, 그 외 천마식이군은 비슷하였다. 장기무게는 식이군간에 통계적인 차이가 있었다(p<0.05). 혈청지질중 TC와 TG농도는 두 대조군이 가장 높았고, 열수추출물군(H)이 유의하게 낮았다(p<0.05). HDL농도는 천마식이군중 50% 에탄올추출물군(E)이 가장 높았고 A군이 가장 낮았다(p<0.05). LDL+VLDL농도는 A군이 가장 높았고 천마식이군에서는 50% 에탄올추출물군(E)와 열수추출물군(G, H)이 유의하게 낮았다(p<0.05). 테스토스테론농도는 식이군간에 통계적인 차이는 나타나지 않았지만 천마군중에서는 E군, D군 및 H군이 높았고 대조군을 포함한 다른 천마군은 비슷하였다. 혈당치는 B군과 G군이 식이군 중 통계적으로 가장 높았고 H군은 통계적으로 가장 낮았다(p<0.05). 체지방의 축적정도를 나타내는 EFP무게는 두 대조군이 천마식이군 보다 유의하게 높았고 분말군(C, D)과 열수추출물군(H)이 유의하게 낮았다(p<0.05). 이상의 결과로 볼 때 천마 분말 보다 50% 에탄올추출물 2 brix군(E)과 열수추출물 10 brix군(H)이 고지방식이를 급여함에도 혈청지질과 체지방의 축적을 감소시키는 것으로 나타났고 혈청 테스토스테론농도도 E군이 통계적인 유의성은 없었지만 식이군 중 가장 높았다.
유전자 구조 및 유전정보 흐름의 차이로 인하여 고등생물의 유전자를 미생물에 직접 cloning하면 원하는 유전자 산물을 얻지 못하는 경우가 많다. 이것을 극복하기 위해서는 화학적인 방법으로 유전자를 합성하든지, 또는 역제효소를 사용하여 고등생물의 mRNA로부터 유전자를 합성하여 cloning하는 방법을 사용한다. 본 연구에서는 oligo(dT)-cellulose column 방법으로 순수분리한 plasmid pBR322의 Pst I site에 cloning하였다. 우선 AMV reverse transcriptase로 primary cDNA를 합성하고, 알칼리를 처리하여 주형 RNA를 제거했다. 이번에는 이 primary cDNA를 주형으로 Klenow enzyme과 reverse transcriptase를 차례로 처리하여 double stranded DNA를 합성하고, 이 때 5' end 근처에 형성되는 hairpin loop을 Sl nuclease로 제거했다. Terminal deoxynucleotidyl transferase를 사용하여, 합성된 dsDNA에는 poly(dC) track을, Pst I endonuclease를 처리한 plasmid DNA에서는 poly(dG) track을 각각 붙인다음 이들을 서로 annealing시키고 E. coli에 transformation시켜서 크기가 큰 plasmid를 갖는 clone을 cracking 방법으로 일처 선별하였다. 이렇게 선별된 clone을 in 냐셔 hybridization 방법으로 조사하여 globin DNA가 들어간 colony를 이차 선별하고 여러 restriction enzyme으로 잘라보아 globin DNA가 cloning된 것을 확인하였다. 토끼 hemoglobin으로 immunize한 rat (Wistar)에서 뽑은 제일차 혈청과 염소에서 뽑은 제이차 혈청의 antibody를 사용한 radioimmunoassay방법으로, cloning된 globin gene이 대장균내에서 발현되는 지의 여부를 살펴 보았는데, 박테리아의 $\\beta$-lactamase와 토끼의 globin이 결합된 chimeric protein이 대장균 내에서 다량 합성되며, 이 단백질은 토끼 hemoglobin의 antigenic determinant를 가지고 있음을 알 수 있었다.
Three experiments were conducted with broilers to study the effects of early feed restriction. In all studies, treatments were represented by three replicated floor pens, each containing 20 birds. In Experiment 1, broilers were fed at 0.75 kcal ME/g BW/sup0.67 for 3 d, 1.5kcal m/E BW/sup0.67 for 5 d or 2.25 kcal ME/g BW/sup0.67 for 7 d, all imposed beginning at 7 d of age. Birds were smaller following feed restriction(P<0.05), although growth compensation occurred, and at 49 d all restricted birds were same(P>0.05) to full-fed control buds in body weight. Growth compensation was associated with improved feed conversion(P<0.05), although carcass composition was unchanged. In a second study, all birds were fed at 0.75 kcal ME/g BW/sup0.67 for 3 or 5 d, starting at either 4, 7, or 10 d of age. When feed restriction was applied for shorter periods of time, growth compensation occurred(P>0.05). With more severe feed restriction, birds were smaller(P<0.05) at 49 d compared to control. Feed conversion was improved following prior feed restriction(P<0.05, 4 to 49). In a third trial, broilers were fed a starter diet diluted with 50% rice hulls. Birds failed to consume enough of this diluted feed, and so were initially smaller, However 49 d weight was not affected (P>0.05). When periods of 24 h feed withdrawal were imposed in conjunction with the diluted diets, birds were under weight at 49 d. It is concluded that physical feed restriction at 0.75 to 1.5 kcal ME/g BW$\^$0.67 imposed for 3 to 5 d in the early life currently presents the best option as a means of controlling broiler growth so as to improve feed efficiency.
본 연구에서는 다양한 약리 활성 및 항산화 활성이 높다고 보고된 신선초 추출물을 대상으로 in vitro 및 in vivo계에서 알코올성 간세포 손상을 유도하여 그 효과를 검토하였다. 알코올 산화 효소인 cytochrome P4502E1(CYP2E1)이 과발현된 HepG2 세포에서 200 mM의 알코올과 신선초 추출물을 투여하였을 때 농도 의존적으로 세포생존률 및 catalase(CAT) 활성이 증가하였다. In vitro에서 신선초 추출물의 보호 효과를 확인한 후 7주령의 C57BL/6J 마우스에 알코올과 신선초 추출물 20, 100 mg/kg BW/d를 급여한 결과 혈중 ALT, AST, GGT의 농도는 대조군보다 유의적으로 증가한 알코올군에 비해 신선초 추출물을 급여한 군에서 유의적 감소했음을 확인할 수 있었다. 그뿐만 아니라 알코올 투여로 세포변성과 지방구가 보이는 간 조직의 변화가 신선초 투여로 의해 대조군과 유사하게 관찰되었다. 항산화 효소의 변화와 지질과산화 수준은 대조군보다 알코올군이 유의적 증가했으며, 신선초 추출물 급여군에서 감소하는 결과를 보였고, 특히 신선초 20 mg/kg BW/d로 급여한 군에서 CAT, glutathione peroxidase, glutathione reductase, malondialdehyde(MDA) 등의 유의적 감소를 보였다. 이 같은 변화를 매개했다고 생각되는 CYP2E1의 발현과 활성은 대조군보다 알코올 투여군에서 유의적으로 상승하였으며, 특히 항산화 효소와 MDA 함량에서 유의적 감소했던 20 mg/kg BW/d의 신선초 투여군에서 유의적 감소하는 것으로 나타났다. 그러므로 이는 신선초 추출물에 함유된 luteolin, quercetin, chalcone 화합물 등의 성분에 의해 알코올 유도 산화적 스트레스가 감소하였다고 생각되며, 신선초 추출물은 알코올 대사과정에서 산화적 스트레스를 억제하여 간 보호 효과가 있을 것으로 생각한다.
Kollati, Yedukondalu;Akella, Radha Rama Devi;Naushad, Shaik Mohammad;Patel, Rajesh K.;Reddy, G. Bhanuprakash;Dirisala, Vijaya R.
Genomics & Informatics
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제19권3호
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pp.29.1-29.10
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2021
In our previous studies, we have demonstrated the association of certain variants of the thyroid-stimulating hormone receptor (TSHR), thyroid peroxidase (TPO), and thyroglobulin (TG) genes with congenital hypothyroidism. Herein, we explored the mechanistic basis for this association using different in silico tools. The mRNA 3'-untranslated region (3'-UTR) plays key roles in gene expression at the post-transcriptional level. In TSHR variants (rs2268477, rs7144481, and rs17630128), the binding affinity of microRNAs (miRs) (hsa-miR-154-5p, hsa-miR-376a-2-5p, hsa-miR-3935, hsa-miR-4280, and hsa-miR-6858-3p) to the 3'-UTR is disrupted, affecting post-transcriptional gene regulation. TPO and TG are the two key proteins necessary for the biosynthesis of thyroid hormones in the presence of iodide and H2O2. Reduced stability of these proteins leads to aberrant biosynthesis of thyroid hormones. Compared to the wild-type TPO protein, the p.S398T variant was found to exhibit less stability and significant rearrangements of intra-atomic bonds affecting the stoichiometry and substrate binding (binding energies, ΔG of wild-type vs. mutant: -15 vs. -13.8 kcal/mol; and dissociation constant, Kd of wild-type vs. mutant: 7.2E-12 vs. 7.0E-11 M). The missense mutations p.G653D and p.R1999W on the TG protein showed altered ΔG(0.24 kcal/mol and 0.79 kcal/mol, respectively). In conclusion, an in silico analysis of TSHR genetic variants in the 3'-UTR showed that they alter the binding affinities of different miRs. The TPO protein structure and mutant protein complex (p.S398T) are less stable, with potentially deleterious effects. A structural and energy analysis showed that TG mutations (p.G653D and p.R1999W) reduce the stability of the TG protein and affect its structure-functional relationship.
본 실험은 한우 종빈우의 임신말기에 Se과 Vit. E 투여가 종빈우에서 태어난 송아지의 발육능력을 조사하고 혈액화학치 및 혈중 Vit. E 농도에 미치는 영향을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Se과 Vit. E를 분만 1개월전에 투여 한 한우 종빈우에서 태어난 송아지의 혈액성분에 미치는 영향을 검토한 결과, 평균 혈중 albumin은 3.36, 3.51, 3.43, 3.45, 3.83 및 3.31g/d1로서 Vit. E 2000IU 투여구가 여타구보다 높은 성적을 나타냈다(P<0.05). 평균 혈중 cholesterol함량은 Vit. E 1500IU 투여구가 여타구보다 높은 함량을 나타냈으나, 혈중 BUN, creatiine, glucose, inorganic phosphorous, calcium, total protein 및 triglycerides 함량은 처리구간 유의적인 차이는 없었다(P>0.05). 2. Se과 Vit. E를 분만 2개월 전에 투여한 한우 종빈우에서 태어난 송아지의 혈액성분에 미치는 영향을 검토한 결과, 평균 혈중 albumin, cho-lesterol, BUN, creatiine, glucose, inorganic phos-phorous, calcium, total protein 및 triglycerides 함량은 처리구간 유의적인 차이는 없었다(P>0.05). 3. 분만 1개월 전에 Se과 Vit. E 투여한 한우 종빈우에서 태어난 송아지의 혈중 vitamin E 농도에 미치는 영향을 검토한 결과, 한우 종빈우에서 태어난 송아지의 생후 15일째 혈중 Vit. E 농도는 처리구간 커다란 차이가 없었으나, 생후 45일째 혈중 Vit. E 농도는 투여구가 대조구보다 높은 농도를 나타냈다. 모든 처리구에서 송아지의 생후 일령이 증가함에 따라 혈중 Vit. E 농도가 증가하는 경향을 보였다. 4. 분만 전 2개월 전에 Se과 Vit. E를 투여한 한우 종빈우에서 태어난 송아지의 생후 15일과 45일째 혈중 Vit. E의 농도는 처리구간 커다란 차이는 없었다(P>0.05).
$\beta$-Galactosidase 유전자 조작된 두 대장균 숙주-벡터 시스템의 단백질 생산가 배양특성을 비교하였다. Tac 프로모터를 갖는 Escherichia coli JM109/ pTBG10 균주가 pL 프로모터를 갖는 E. coli MH 3000(pRKcI857)/ pASl(lacz) 균주보다도 단백질 생산성에 있어서 훨씬 우수하였으며 초기 및 중간 대수 증식기에서의 발현 유도가 단백질 생산에 있어서 유리함을 관찰하였다. 또한 유전자 발현시기에 있어서는 산소요구량이 매우 높았으나 pH를 일정하게 조절함에 의해 산소요구량을 어느 정도 낮출 수 있었고 생산성도 향상됨을 관찰할 수 있었다. 고생산성 균주(E. coli JM109/pTBG10)의 경우 플라스미드 함유 균체의 플라스미드 상실 균체에 대한 비증식속도의 비 $\mu$ + /$\mu$- 가 저생산성 균주보다도 낮았으며 이것은 유전자발현에 따른 단백질 합성부담이 매우 큰 때문으로 판단되었다. 또 플라스미드 안정성을 30세대까지 추적하였는바 유전자 발현 조건하에서 두 균주 모두 25세대 후 10% 정도의 안정성을 보였으나 E. coli JM109/pTBG10 균주의 안정성이 상대적으로 우수하다고 판단되었다.
The objectives of this study were to compare visual observation and an electronic grazing time method and to evaluate the effects of nutritional plans on intake, grazing behavior and horizontal and vertical locomotion of young bulls in a tropical pasture. Thirty-nine Nellore young bulls with an average body weight of $345{\pm}9.3$ kg kept in pasture were used. The experimental treatments consisted of: restricted: animals kept in a plot with a low mass of forage receiving mineral mixture only; control: animals receiving mineral mixture only; HPHC: a high protein and high carbohydrate supplement; HPLC: a high protein and low carbohydrate supplement; LPHC: a low protein and high carbohydrate supplement; LPLC: a low protein and low carbohydrate supplement. GPS collars equipped with activity sensors were used. Information about head position, latitude, longitude and altitude were recorded. Daytime grazing behavioral patterns monitored by a continuous focal animal recording method was compared to behavior estimated by the activity sensor. Feed intake was estimated by a marker method. The Restricted group presented lower (p<0.05) intake of dry matter and TDN. However, difference in dry matter intake was not found (p>0.05) between non-supplemented and supplemented animals. Difference was not found (p>0.05) in daytime grazing time obtained by visual observation or the activity sensor method. The restricted group showed longer (p<0.05) grazing time (9.58 h/d) than other groups, but difference was not found (p>0.05) in the grazing time between Control (8.35 h/d) and supplemented animals (8.03 h/d). The Restricted group presented lower (p<0.05) horizontal locomotion distance (2,168 m/d) in comparison to other groups (2,580.6 m/d). It can be concluded that the use of activity sensor methods can be recommended due to their being similar to visual observation and able to record 24-h/d. While supplements with high carbohydrates reduce pasture intake, they do not change grazing behavior. Moderate supplementation (until 50% of protein requirement and 30% of energy requirement) of beef cattle on tropical pasture has no effect on daily locomotion.
본 실험에서는 볏짚에 사과박의 첨가비율을 달리하여 조제한 사일리지(볏짚:사과박 = 100:0, 80:20, 60:40, 40:60) 혹은 옥수수 사일리지에 건초 및 시판사료의 혼합 비율을 각각 40:40:20로 조제하여 한국 재래산양에게 급여하였고, 이들에 의한 사료섭취량, 소화율 및 질소 축적율 등을 조사하여 농산 가공 부산물의 사료화 가능성을 제시하고자 실시하였으며 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 시험사료의 화학적 조성분은 조단백질 함량이 6.3∼7.3%이었고 ADF, NDF 및 조회분 함량은 볏짚 혼합비율이 100%(A구)가 각각 39.4, 61.6 및 8.9%로 가장 높았으며 옥수수 사일리지 급여구(E구)가 30.3, 53.4 및 4.9%로 가장 낮은 경향을 보였으나, NSC 함량은 E구가 31.4%로 가장 높았다. 1일 두당 건물섭취량 및 대사체중 당 건물 섭취량은 사과박 혼합 비율이 가장 많은 D구가 각각 605.3과 69.5g으로 옥수수 사일리지 급여구인 E구의 394.0과 46.8g보다 유의하게 높았다.(p<0.05). 일당 증체량은 사과박 혼합비율이 40(C구)과 60%(D구)에서 각각 16.7과 22.9g으로 사과박 혼합비율이 0(A구)과 20%(B구)의 0.17과 4.3g보다 유의하게 높았다(p<0.05). 건물 및 유기물 소화율은 D와 E구가 A와 B구 보다 유의하게 높았으며 ADF와 NDF 소화율도 D구가 각각 50.2와 57.4%로 A, B 및 E구 보다 유의하게 높았다(p<0.05). 질소 축적량과 축적율은 사과박 혼합 비율이 가장 높은 D구가 각각 1.4g과 20.4%로 가장 높았으며 A구가 -0.3g과 -7.75%로 가장 낮았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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