Pseudomonas sp. DJ77의 chromosomal DNA로부터 6.9kb XhoI 절편 상에 존재하는 phenanthrene 분해에 관련된 유전자군을 vector pBLUESCRIPT SK(+)에 클로닝하였다. 이렇게 얻은 재조합 plasmid인 pHENX7을 가지고 있는 JM101 균주는 3-methylcarechol을 노란색의 meta-cleavage 화합물로 전환할 수 있었다. 그러나 삽입된 절편의 방향이 반대가 되도록 제조한 pHENX7은 extradiol dioxygenase 활성을 나타내지 않기 때문에 전사방향을 알 수 있었다. pHENX7과 이의 듀도체들을 지니는 JH101균주에서 PhnC(24kDa), PhnD(31KDa), PhnE(34kDa), PhnF(KDa)의 4 polypeptide를 확인 할 수 있었고 개개의 유전자의 위치와 범위를 알 수 있었다. 유전자 순서는 phnC-phnD-phnE-phnF-phnG이었으며, phnC, phnD, phnE, phnF, phnG는 각기 glutathione S-transferase, meta-cleavage compound hydrolase extradiol dioxygenase, meta-cleavage compound dehydrogenase의 유전자이었다.
Objective: This study was conducted to investigate basic information on genetic structure and characteristics of Limousin population in Hungary. Obtained results will be taken into consideration when adopting the new breeding strategy by the Association of Hungarian Limousin and Blonde d'Aquitaine Breeders (AHLBB). Methods: Genetic diversity and phylogenetic relationship of 3,443 Limousin cattle from 16 different herds were investigated by performing genotyping using 18 microsatellite markers. Amplified DNA was genotyped using an automated genetic analyzer. Results: Mean of effective alleles ($n_e$) of the populations was 3.77. Population C had the lowest number of effective alleles (3.01) and the lowest inbreeding coefficient ($F_{IS}$) value (-0.15). Principal component analysis of estimated genetic distance ($F_{ST}$) values (p<0.000) revealed two herds (C and E) distinct from the majority of other Limousin herds. The pairwise $F_{ST}$ values of population C compared to the others (0.066 to 0.120) fell into the range of moderate genetic distance: 0.050 to 0.150, while population E displayed also moderate genetic distance ($F_{ST}$ values in range 0.052 to 0.064) but only to six populations (G, H, J, L, N, and P). $F_{ST(C-E)}$ was 0.148, all other pairs -excluding C and E herds- displayed low genetic distance ($F_{ST}$<0.049). Population D, F, I, J, K, L, N, O, and P carried private alleles, which alleles belonged to 1.1% of the individuals. Most probable number of clusters (K) were 2 and 7 determined by Structure and BAPS software. Conclusion: This study showed useful genetic diversity and phylogenetic relationship data that can be utilized for the development of a new breeding strategy by AHLBB. The results presented could also contribute to the proper selection of animals for further whole genome scan studies of Limousins.
Pigs from four sire lines were allocated to a series of low energy (LE, 3.15 to 3.21 Mcal ME/kg) corn-soybean meal-based diets with 16% wheat midds or high energy diets (HE, 3.41 to 3.45 Mcal ME/kg) with 4.5 to 4.95% choice white grease. All diets contained 6% DDGS. The HE and LE diets of each of the four phases were formulated to have equal lysine:Mcal ME ratios. Barrows (N = 2,178) and gilts (N = 2,274) were fed either high energy (HE) or low energy (LE) diets from 27 kg BW to target BWs of 118, 127, 131.5 and 140.6 kg. Carcass primal and subprimal cut weights were collected. The cut weights and carcass measurements were fitted to allometric functions (Y = A $CW^B$) of carcass weight. The significance of diet, sex or sire line with A and B was evaluated by linearizing the equations by log to log transformation. The effect of diet on A and B did not interact with sex or sire line. Thus, the final model was cut weight = (1+$b_D$(Diet)) A($CW^B$) where Diet = -0.5 for the LE and 0.5 for HE diets and A and B are sire line-sex specific parameters. Diet had no affect on loin, Boston butt, picnic, baby back rib, or sparerib weights (p>0.10, $b_D$ = -0.003, -0.0029, 0.0002, 0.0047, -0.0025, respectively). Diet affected ham weight (bD = -0.0046, p = 0.01), belly weight (bD = 0.0188, p = 0.001) three-muscle ham weight ($b_D$ = -0.014, p = 0.001), boneless loin weight (bD = -0.010, p = 0.001), tenderloin weight ($b_D$ = -0.023, p = 0.001), sirloin weight ($b_D$ = -0.009, p = 0.034), and fat-free lean mass ($b_D$ = -0.0145, p = 0.001). Overall, feeding the LE diets had little impact on primal cut weight except to decrease belly weight. Feeding LE diets increased the weight of lean trimmed cuts by 1 to 2 percent at the same carcass weight.
Synthesis of threonine and methionine in yeast, Saccharomyces cerevisiae shares a common pathway from aspartate via homoserine. HOM6 gene encodes homoserine dehydrogenase (HSDH) which catalyzes the inter-conversion of beta-aspartate semialdehyde and homoserine. The level of HSDH is under methionine specific control. A recombinant plasmid (pEK1: 13.3kb), containing HOM6 gene, has been isolated and cloned into E. coli by complenemtary transformation of a homoserine auxotrophic yeast strain M-20-20D (hom6, trp1, ura3) to a prototrophic M20-20D/pEK1, using a library of yeast genomic DNA fragments in a yeast centromeric plasmid, YCp50(8.0kb). Isolation of HOM6has been primarily confirmed by retransformation of the original yeast strain M20-20D, using the recombinant plasmid DNA which was extracted from M20-20D/pEK1 and subsequently amplified in E. coli. Eleven cleavage sites in the insery (5.3kb) have been localized through fragment analysis for 8 restriction endonucleases; Bgl II(2 site), Bgl II(1), Cla I(3), Eco RI(1), Hind III(2), Kpn I (1), Pvu II(1) and Xho I(1).
We show that when n > m, the following delay differential equation fn(z)f'(z) + p(z)(f(z + c) - f(z))m = r(z)eq(z) of rational coefficients p, r doesn't admit any transcendental entire solutions f(z) of finite order. Furthermore, we study the conditions of α1, α2 that ensure existence of transcendental meromorphic solutions of the equation fn(z) + fn-2(z)f'(z) + Pd(z, f) = p1(z)eα1(z) + p2(z)eα2(z). These results have improved some known theorems obtained most recently by other authors.
Background: In this study, we evaluated the anti-cancer activity and potential molecular mechanism of 70% ethanol extracts of the root of Aralia cordata var. continentalis (Kitagawa) Y. C. Chu (RAc-E70) against human colorectal cancer cells. Methods and Results: RAc-E70 suppressed the proliferation of the human colorectal cancer cell lines, HCT116 and SW480. Although RAc-E70 reduction cyclin D1 expression at the protein and mRNA levels, RAc-E70-induced reduction in cyclin D1 protein level occurred more dramatically than that of cyclin D1 mRNA. The RAc-E70-induced downregulation of cyclin D1 expression was attenuated in the presence of MG132. Additionally, RAc-E70 reduced HA-cyclin D1 levels in HCT116 cells transfected with HA-tagged wild type-cyclin D1 expression vector. RAc-E70-mediated cyclin D1 degradation was blocked in the presence of LiCl, a $GSK3{\beta}$ inhibitorbut, but not PD98059, an ERK1/2 inhibitor and SB203580, a p38 inhibitor. Furthermore, RAc-E70 phosphorylated cyclin D1 at threonine-286 (T286), and LiCl-induced $GSK3{\beta}$ inhibition reduced the RAc-E70-mediated phosphorylation of cyclin D1 at T286. Conclusions: Our results suggested that RAc-E70 may downregulate cyclin D1 expression as a potential anti-cancer target through $GSK3{\beta}$-dependent cyclin D1 degradation. Based on these findings, RAc-E70 maybe a potential candidate for the development of chemopreventive or therapeutic agents for human colorectal cancer.
Plasmid pTTY2에 의한 competent cell(P90c/$\phi$ 434)의 형질전환에 의하여 lipase를 생성하는 재조합 대장균(P90c/따434/pTTY2)을 합성하였다. Li pase 활성 조사를 위한 LAT plate, Rhodamine B plate를 이용한 실험에서 P90c/$\phi$434의 경우 halo 형성이 없었고, P90c/$\phi$434/pTTY2의 경우 용해시 켜 얻은 상등액과 용해되지 않은 미생물을 물리적으 로 깨 서 얻은 상등액 모두 halo를 형성하였다. P90c/$\phi$434/pTTY2에 대한 IPTG 유도시점, 유도 시간이 $\phi$434에 의한 미생물 용해에 미치는 영향을 살펴 봄으로써 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 재조합 대장균의 효과적인 용해는 ODGOO 0.5 ~ 2 2.5인 초기 exponential growth phase에서 IPTG 로 유도한 후, mitomycin C 첨가나 uv조사에 의 해 이루어진다. 2. 재조합 대장균의 용해는 IPTG 유도시간이 1 시간일 때 가장 효과적이었으며, 이후 유도시간이 증가할수록 감소하여 유도시간이 4시간일 때는 세포 용해가 이루어지지 않는다. 3. 실험한 범위에서 uv조사보다 mitomycin C 첨가가 세포 용해에 더 효과적이다. 본 연구결과가 대규모의 생물공학 생산물의 정제 에 응용되기 위해서는 고농도 세포에서의 세포용해 에 대한 연구가 펼요한 것으로 판단된다.
Echocardiography is one of the most useful diagnostic techniques for differentiating heart disease as well as mitral valve lesion. Forty client-owned small breed dogs (weight, 2.3-13.2 kg) aged between 8-17 years with myxomatous mitral valve degeneration (MMVD) were included in the present study. The diagnosis of MMVD in dogs was made based on the clinical signs, chest radiography data, and echocardiographic findings. Echocardiographic examinations were conducted in accordance with recommended standards for dogs. M-mode, Doppler, and 2D echocardiography were performed in left and right lateral recumbency. 2D echocardiography was used to measure LA and Ao diameter from 2D short axis at the level of the aortic valve. In the comparison of conventional echocardiography indices in dogs with different stages of heart failure with MMVD, significant differences were observed in E/A ratio (p=0.005), EDV (p<0.001), EDVI (p<0.001), E-peak velocity (p= 0.001), ESV (p=0.028), ESVI (p=0.004), LA (p<0.001), LA/Ao Ratio (p<0.001), LVIDd (p<0.001), LVIDd/Ao Ratio (p<0.001), LVIDs (p=0.036), LVIDs/Ao Ratio (p=0.002), and MR Velocity (p=0.026). In addition, distinct correlations were found in EDV (r=0.712), LA/Ao ration (r=0.830), LVIDd (r=0.724), and LVIDd/Ao ratio (r=0.759). This study found that known conventional echocardiographic indices, including EDV, LA/Ao ratio, LVIDd dimension, and LVIDd/Ao ratio correlated with the severity of MMVD in point of significant differences and distinct correlations.
PASSARINHA L. A.;DIOGO M. M.;QUEIROZ J. A.;MONTEIRO G. A.;FONSECA L. P.;PRAZERES D. M. F.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권1호
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pp.20-24
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2006
Plasmid DNA (pDNA) is a product of interest for many biopharmaceutical companies and research laboratories, because of increase in the number of gene therapy protocols that use nonviral vectors. This work was undertaken to study the effect of antibiotic and dissolved oxygen concentration (DOC) on the production of a ColE 1-type plasmid (pVAX1-LacZ) hosted in Escherichia coli $DH5\alpha$ and cultured in a batch fermentor with 0.751 of Terrific Broth. A decrease in the DOC from $60\%\;to\;5\%$ was shown to increase the specific pDNA concentration approximately 1.5-fold, due to the downregulation of growth. Additionally, this increase in the pDNA concentration led to a 2.2-fold increase in the purity of cell lysates obtained after cell lysis. However, the use of higher DOC led to 2.8-fold higher volumetric productivity as a consequence of a faster growth rate, reducing the fermentation time from 24 to 8 h. Interestingly, the specific pDNA concentration, and pDNA productivity and purity were always higher $(10-15\%)$ in the absence of antibiotic. Overall, the data indicate that nonselective conditions can be used without compromising yield, productivity, and purity of pDNA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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