Jha, Amit Kumar;Pokhrel, Anaya Raj;Chaudhary, Amit Kumar;Park, Seong-Whan;Cho, Wan Je;Sohng, Jae Kyung
Molecules and Cells
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제37권10호
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pp.727-733
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2014
Spinosyns A and D are potent ingredient for insect control with exceptional safety to non-target organisms. It consists of a 21-carbon tetracyclic lactone with forosamine and tri-Omethylated rhamnose which are derived from S-adenosyl-methionine. Although previous studies have revealed the involvement of metK1 (S-adenosylmethionine synthetase), rmbA (glucose-1-phosphate thymidylyltransferase), and rmbB (TDP-D-glucose-4, 6-dehydratase) in the biosynthesis of spinosad, expression of these genes into rational screened Saccharopolyspora spinosa (S. spinosa MUV) has not been elucidated till date. In the present study, S. spinosa MUV was developed to utilize for metabolic engineering. The yield of spinosyns A and D in S. spinosa MUV was $244mgL^{-1}$ and $129mgL^{-1}$, which was 4.88-fold and 4.77-fold higher than that in the wild-type ($50mgL^{-1}$ and $27mgL^{-1}$), respectively. To achieve the better production; positive regulator metK1-sp, rmbA and rmbB genes from Streptomyces peucetius, were expressed and co-expressed in S. spinosa MUV under the control of strong $ermE^*$ promoter, using an integration vector pSET152 and expression vector pIBR25, respectively. Here-with, the genetically engineered strain of S. spinosa MUV, produce spinosyns A and D up to $372/217mgL^{-1}$ that is 7.44/8.03-fold greater than that of wild type. This result demonstrates the use of metabolic engineering on rationally developed high producing natural variants for the production.
Eight flavonoids were isolated from the BuOH fraction of the 70% EtOH extract of Zizyphus jujuba var. spinosa seeds along with three known compounds, daucosterol (1), butyl ${\beta}$-D-fructofuranoside (2), and magnoflorine (4). On the basis of spectroscopic methods and comparison with literature values their structures were elucidated as 6"'-feruloylspinosin (3), nicotiflorin (5), 6"'-p-coumaroylspinosin (6), isospinosin (7), 6"'-vanilloylspinosin (8), spinosin (9), hovetrichoside C (10), and camelliaside B (11). Compounds 1, 2, 10, and 11 were isolated from this plant for the first time.
본 연구는 귀화식물인 Solidago altissima, Amaranthus retroflexus, Sida spinosa 등을 이용하여 친환경 농자재로 개발하기 위한 기초자료를 제공하기 위해 수용성 추출액의 농도에 따른 수용체 식물의 발아 및 유식물 생장과 실험 병원균의 생장을 조사하였다. 공여체식물에 따른 수용성 추출액 농도가 증가됨에 따라 대부분 검정식물의 상대발아율은 감소하는 경향을 보이는데 S. spinosa(r=-0.540, p<0.01), Physalis wrightii(r=-0.693, p<0.01), A. retroflexus(r=-0.724, p<0.01), S. altissima(r=-0.728, p<0.01), Eclipta prostrata(r=-0.779, p<0.01) 순으로 감소하는 경향이 큰 것으로 조사되었고 평균발아일수도 처리구 농도가 증가함에 따라 발아하는데 소요되는 시간이 증가 되었으며(r=0.769, p<0.01) 공여체식물과 검정식물에 따라 약간의 정도 차이를 보였다. 또한 공여체식물의 수용성 추출액 농도가 증가함에 따라 유식물의 지상부의 길이(r=-0.587, p<0.01), 지하부의 길이(r=-0.741, p<0.01), 생체량(r=-0.574, p<0.01)과 뿌리털의 발생도 감소하였다. 한편 공여체식물의 수용성추출액 농도 증가에 따른 검정 병원균의 생장은 Botrytis cinerea(r=-0.266, p<0.05), Diaporthe citri(r=-0.323 p<0.01), Colletotrichum gloeosporioides(r=-0.512, p<0.01), Pythium ultimum(r=-0.581, p<0.01), Rhizoctonia solani(r=-0.806, p<0.01) 순으로 생장이 억제되었다. 제초 및 항균활성을 보이는 수용체식물의 총 페놀 함량은 S. altissima $17.3{\pm}0.5mg/g$, A. retroflexus $13.1{\pm}0.3mg/g$, P. wrightii $12.0{\pm}0.4mg/g$, S. spinosa $9.5{\pm}0.1mg/g$, E. prostrata $4.1{\pm}0.1mg/g$ 순으로 분석되었다. 이들 결과를 종합하면 귀화식물인 수용체식물들은 자생식물과의 경쟁을 함에 있어 알레로패시 효과를 나타내는 페놀 화합물 등이 수관 내 토양으로 방출하여 하부식생에 대한 발아 및 생장과 토양미생물 생장 등에 영향을 주기 때문에 경쟁적 우위를 점하고 있으며, 천연제초제 살균제로서의 활용 가능성을 가지고 있는 것으로 판단된다.
著者는 한국산 八放珊瑚類의 계통분류학적 연구를 하기 위하여 1965년부터 1978susRK지 동해의 울릉도 (苧洞, 道洞, 沙洞)와 남해의 尾浦, 海金剛, 鴻島, 황천도, 濟州, 爲美里, 林島, 地歸島, 西歸浦, 鳥島, 門島, 虛島등 15개 지역으로부터 채집된 標本들을 同定分類한 결과 다음과 같은 全軸類에 속하는 3科 7屬 15種을 얻었다. 이들은 모두 韓國 未記錄種이었으며 다음과 같다. Anthoplexaura dimorpha, Euplexaura anastomosans, E. abietina, E. crassa, E. recta, Ellisella maculata, E. rubra, E. limbaughi, Verrucella umbraculum, V. stellata, Primnoa reseda pacifica, Callogorgia pseudoflabellum, Plumarella spinosa, P. rigida 및 P. adharens.
Prunus cerasifera, P. domestica 및 P. salicina에서 기원된 자두 53 종 또는 품종으로 부터 27 형태형질의 특성을 조사하여 품종 동정에 필요한 기초자료를 제공하고, 그들간의 분류적 관계를 알아보기 위하여 주성분분석 및 집괴분석을 실시하였다. 조사된 형태형질 중 잎의 크기, 잎의 형태 및 엽내 털 발생정도 등이 자 두아속 식물의 동정 및 분류적 관계 해석에 있어서 상당히 유용하게 이용될 수 있을 것으로 단되었으며, 잎의 길이, 엽병 길이, 밀선수, 형, 엽저, 만개기 등은 P. domestica계 자두와 P. salicina계 자두간에 명확한 차이를 나타내었다. 또한 주성분분석 득점치를 이용한 비가 평균결합법에 의한 집괴분석 결과 53개 분류 군들은 평균거리 1.0을 기준으로 할 때 P. alicina-P. cerasifera 표현군, P. domestica 표현군 및 P. pinosa 표현군 등 3개의 표현군으로 분류될 수 있어, 분류군들의 대략적인 분류적 관계 분석이 가능하였다. 그러나 정확한 종군 분류를 위해서는 보다 많은 형태형질의 용이 필요할 것으로 판단되었다.
인산축적 시설재배지에서 Arbuscular 균근균의 이용을 위한 기초자료를 얻고자 영남지역 시설재배지의 토착 Arbuscular 균근균의 분포밀도를 조사하고 in vitro에서 Arbuscular 균근균의 포자 표면살균 조건에 따른 포자발아 및 균사생장정도를 검토하였다. 시설재배지 토양에서 재배작물별 Arbuscular 균근균의 포자분포수는 수박에서 가장 높았으며 오이, 참외, 고추의 순이었으며 건토 100 g당 포자수는 101~207개 범위에 있었다. 한편, Arbuscular 균근균의 포자분포수는 B/F비가 낮을수록 증가하는 경향이었고 토양유효인산의 함량과는 $r=0.416^*$의 유의성 있는 정의 상관을 나타내었다. Acaulospora spinosa와 Gigaspora margarita 두 균주를 대상으로 기내실험한 결과 Arbuscular 균근균의 포자표면살균은 두 균주 모두 2% Chloramin T 및2% Chloramin T와 항생제 혼합 처리시 50%이상의표면 살균력과 포자발아율을 보여 다른 화합물 처리보다 양호하였다. pH에 따른 Gigaspora margarita의 포자발아와 균사생장은 pH 5.0 ~ 9.0 사이의 넓은 범위에서 50%이상의 발아율을 보였으며, 초기 pH가 증가 할수록 균사생장이 양호한 경향이었으나 Acaulospora spinosa의 경우에는 pH 9.0에서 포자발아율이 가장 높았으며 균사생장은 실험한 pH의 범위에 상관없이 저조하였다.
인공습지를 이용한 오염수 처리를 위해 조성된 시화 인공습지의 개방수 정점에서 식물플랑크톤과 갈대 조성지의 정점에서 갈대 부착 조류 군집의 동태에 대한 연구를 위해 5개의 정점을 선정하여 2001년 10월부터 2002년 6월까지 조사를 실시하였다. 반월천으로부터 유입된 오염수는 정점 1을 통해 갈대군락을 관류하면서 정점 2에서 저감 효과를 나타내었다. 총인/총질소 비는 모든 정점에서 16 이상을 약간 상회하였다. 본 수계는 인이 제한 영양염으로 작용하는 것으로 나타났다. 식물플랑크톤은 총 413종류로서 375종, 21변종, 2품종 및 15미동정이었다. 현존량은 330 ${\sim}$ 36,420 cells $mL^{-1}$의 범위로 정점 5에서 최저였고 정점 1에서 최대였다. 현존량은 정점 1과 2, 정점 3과 4를 관류하면서 영양염류와 같이 감소되는 경향을 나타내었다. 엽록소 농도는 $2.5\;{\sim}\;170.7\;{\mu}g\;L^{-1}$의 범위로 정점 1에서 최대였고 정점 5에서 최저였다. 엽록소 농도 역시 유입수부터 습지 관류후의 정점에서 뚜렷한 차이를 나타내었다. 우점종은 Euglena oblonga, Synura spinosa 등 14종류였으며 정점 1과 2에서는 부영양수역에서 출현율이 높은 종으로 조성되어 있다. 하천수가 유입되는 개방수역과 인공습지를 관류한 이후의 개방수역의 식물플랑크톤 군집은 뚜렷한 차이를 나타내었다. 이것은 습지를 관류하면서 물리화학적 환경변화에 따른 영향으로 사료된다.
Dynamics of certain $N_2$fixing bacteria such as Rhizobium, Azospirillum and Azotobactor, nodule number in dominant legume, Atylosia trinervia, P-solubilizing bacteria, actinomycetes and fungi were studied in unburned and burned site of natural grassland, southern India. Population of $N_2$- fixing bacteria, P-solubilizing bacteria, fungi and nodule number in legume increased significantly in burned sites. On the other hand, the actinomycetes population remained unchanged. Thirty six species of fungi with tricalcium phosphate solubilizing ability were recorded. The most efficient P-solubilizing fungi recognised in the soils of the study sites are Absidia ramosa, Gongronella butlerii, Mortieralla spinosa, Mucor racemosus, Rhizopus nigricans, R. stolonifer, R. oryzae, Aspergillus fumigatus, A. nidulans, A. niger Theilavia terricola and Cheatomium lunasporium.
Dynamics of certain $N_2$ fixing bacteria such as Rhizobium, Azospirillum and Azotobactor, nodule number in dominant legume, Atylosia trinervia, P-solubilizing bacteria, actinomycetes and fungi were studied in unburned and burned site of natural grassland, southern India. Population of $N_2$ - fixing bacteria, P-solubilizing bacteria, fungi and nodule number in legume increased significantly in burned sites. On the other hand, the actino-mycetes population remained unchanged. Thirty six species of fungi with tricalcium phosphate solubilizing ability were recorded. The most efficient P-solubilizing fungi recognised in the soils of the study sites are Absidia ramosa, Gongronella butlerii, Mortieralla spinosa, Mucor racemosus, Rhizopus nigricans, R. stolonifer, R. oryzae, Aspergillus fumigatus, A. nidulans, A. niger, Theilavia terricola and Cheatomium lunasporium.
축산 분뇨의 퇴비화에 관련되는 세균들을 분리하고 이들이 생산하는 효소들 중 퇴비화에 관련되는 것으로 사료되는 amylase, cellulase, protease 및 lipase의 특성을 연구하였다. 발효 중에 있는 축산 분뇨로부터 24주의 균주를 분리하여 이중 protease, cellulase, amylase, 그리고 lipase의 활성을 모두 가진 6개의 균주들을 선별하였다. 분리한 6개의 균주들을 동정해본 결과 Corynebacterium varibilis, Bacillus spp., Pseudomonas spinosa, Acetobacter calcoaceticus 및 Athrobacter cumminsii 등으로 밝혀졌다. 이들이 분비하는 효소들의 특징은 중성에서 알칼리성에 이르는 광범위한 pH에서 효소들이 높은 활성을 보였으며, cellulase를 제외한 대부분의 효소들의 최대 활성 온도가 $60^{\circ}C$ 정도 였으나, cellulase의 경우 $37^{\circ}C$가 최적 활성 온도였다. 이는 발효가 진행되어 축산 분뇨에 고온의 열이 발생할 때, 이 환경하에서 유기물을 분해함으로써 발효과정을 원활히 진행시키는 것으로 생각된다. 다만 cellulase 생산 세균의 경우 축산 분뇨의 초기 발효시에 관여하여 균주의 성장 및 유기물의 분해에 관여하는 것으로 사료된다. 이와같은 결과는 축산분뇨 발효초기와 발효후기의 온도가 상승된 환경에서 작용하는 세균의 균총이 다름을 암시하고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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