Agrobacterium-mediated transformation of American ginseng (Panax quinquefolius L.) with strain LBA 4404 containing a rice thaumatin-like protein gene is described. The selectable markers used were phosphinothricin acetyltransferase and hygromycin phosphotransferase genes. Epicotyl explants from seedlings were precultured for 5-7 days on Murashige and Skoog medium with ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid and 2,4 dichlorophenoxyacetic acid at 10 ${\mu}$M and 9 ${\mu}$M, respectively (ND medium), prior to Agrobacterium infection. The explants were immersed in a bacterial suspension for 20 min. A post-infection co-culture period of 3-4 days was provided on ND medium. Selection for transformed calli was conducted on ND medium with 20 mg/L phosphinothricin followed by 100 mg/L hygromycin over an 8-month period. it transformation frequency of 24.8% was achieved at the callusing phase. The presence of the transgenes in calli was confirmed by Southern hybridization and polymerase chain reaction analysis. The expression of the thaumatin-like protein gene in ginseng calli was demonstrated by Western blot analysis. Somatic embryos were produced from both transgenic calli and suspension cultures, and plantlets were recovered that expressed the transgenic thaumatin-like protein gene.
Proctor, John T.A.;Sullivan, Alan J.;Rupasinghe, Vasantha P.V.;Jackson, Chung-Ja C.
Journal of Ginseng Research
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v.35
no.2
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pp.155-161
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2011
Leaf characteristics of mature 2, 3 and 4-year-old North American ginseng (Panax quinquefolius L.) leaves on fruiting and non-fruiting(NF) plants were studied. Leaflets of the 2-year-old plants had the lowest fresh and dry weight, area, volume and internal gas volume. Inflorescence removal in 3-year-old plants did not affect leaf characteristics or ginsenoside concentration but in 4-year-old plants it increased leaf fresh (38.6%) and dry (43.9%) weight, leaf area (29.1%), specific leaf mass (11.4%), leaf volume (43.1%), and leaf thickness (12.1%), and decreased leaf water content (6.2%). Cultivated ginseng, although an understorey plant, had the specific leaf mass, 35.6 g $m^{-2}$ (range, 36 to 39 g $m^{-2}$) and a chlorophyll a/b ratio of 2.40 to 2.61, both suggesting the ability to perform like a sunny habitat plant. Also, specific leaf mass of 35.6 g $m^{-2}$ is similar to that reported for perennial plants, 36.8 g $m^{-2}$, rather than that for annuals, 30.9 g $m^{-2}$.
Yang, Seung-Ok;Lee, Sang Won;Kim, Young Ock;Sohn, Sang-Hyun;Kim, Young Chang;Hyun, Dong Yoon;Hong, Yoon Pyo;Shin, Yu Su
Journal of Ginseng Research
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v.37
no.2
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pp.248-253
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2013
Leaves from Panax ginseng Meyer (Korean origin and Chinese origin of Korean ginseng) and P. quinquefolius (American ginseng) were harvested in Haenam province, Korea, and were analyzed to investigate patterns in major metabolites using HPLC-based metabolic profiling. Partial least squares discriminant analysis (PLS-DA) was used to analyze the the HPLC chromatogram data. There was a clear separation between Panax species and/or origins from different countries in the PLS-DA score plots. The ginsenoside compounds of Rg1, Re, Rg2, Rb2, Rb3, and Rd in Korean leaves were higher than in Chinese and American ginseng leaves, and the Rb1 level in P. quinquefolius leaves was higher than in P. ginseng (Korean origin or Chinese origin). HPLC chromatogram data coupled with multivariate statistical analysis can be used to profile the metabolite content and undertake quality control of Panax products.
Kim, Jong Youn;Adhikari, Prakash Babu;Ahn, Chang Ho;Kim, Dong Hwi;Kim, Young Chang;Han, Jung Yeon;Kondeti, Subramanyam;Choi, Yong Eui
Journal of Ginseng Research
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v.43
no.1
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pp.38-48
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2019
Background: Interspecific ginseng hybrid, Panax ginseng ${\times}$ Panax quenquifolius (Pgq) has vigorous growth and produces larger roots than its parents. However, F1 progenies are complete male sterile. Plant tissue culture technology can circumvent the issue and propagate the hybrid. Methods: Murashige and Skoog (MS) medium with different concentrations (0, 2, 4, and 6 mg/L) of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) was used for callus induction and somatic embryogenesis (SE). The embryos, after culturing on $GA_3$ supplemented medium, were transferred to hormone free 1/2 Schenk and Hildebrandt (SH) medium. The developed taproots with dormant buds were treated with $GA_3$ to break the bud dormancy, and transferred to soil. Hybrid Pgq plants were verified by random amplified polymorphic DNA (RAPD) and inter simple sequence repeat (ISSR) analyses and by LC-IT-TOF-MS. Results: We conducted a comparative study of somatic embryogenesis (SE) in Pgq and its parents, and attempted to establish the soil transfer of in vitro propagated Pgq tap roots. The Pgq explants showed higher rate of embryogenesis (~56% at 2 mg/L 2,4-D concentration) as well as higher number of embryos per explants (~7 at the same 2,4-D concentration) compared to its either parents. The germinated embryos, after culturing on $GA_3$ supplemented medium, were transferred to hormone free 1/2 SH medium to support the continued growth and kept until nutrient depletion induced senescence (NuDIS) of leaf defoliation occurred (4 months). By that time, thickened tap roots with well-developed lateral roots and dormant buds were obtained. All Pgq tap roots pretreated with 20 mg/L $GA_3$ for at least a week produced new shoots after soil transfer. We selected the discriminatory RAPD and ISSR markers to find the interspecific ginseng hybrid among its parents. The $F_1$ hybrid (Pgq) contained species specific 2 ginsenosides (ginsenoside Rf in P. ginseng and pseudoginsenosides $F_{11}$ in P. quinquefolius), and higher amount of other ginsenosides than its parents. Conclusion: Micropropagation of interspecific hybrid ginseng can give an opportunity for continuous production of plants.
Ethylene was released from leaf and fruit but root of Panax ginseng. Root callus showed higher ethylene release (ER) than fruit ER increased with leaf senesence. Fruit during ripening showed decreasing ER in the order of green stage, early stage of reddening and fully ripened stage. between leaves from the plant with fruits in different stages of ripening showed similar trend of fruit in ER but it was about 10 times higher in leaves than in fruits. Leaves of P. quinquefolius showed about 200 times higher ER than that of P ginseng on 22 July Fruits from the plant treated with ethephon showed higher ER after 109 days. Forty-five day-old seedlings grown with various growth regulators showed a significant decrease of stem length and significant increase of ER only in Uniconazole (0.1 ppm) and H-9 (0.0, 5 ppm) solution.
Background: The incidence of halitosis has a prevalence of 22-50% throughout the world and is generally caused by anaerobic oral microorganisms, such as Fusobacterium nucleatum, Clostridium perfringens, and Porphyromonas gingivalis. Previous investigations on the structure-activity relationships of ginsenosides have led to contrasting results. Particularly, the antibacterial activity of less polar ginsenosides against halitosis-related bacteria has not been reported. Methods: Crude saponins extracted from the Panax quinquefolius leaf-stem (AGS) were treated at $130^{\circ}C$ for 3 h to obtain heat-transformed saponins (HTS). Five ginsenoside-enriched fractions (HTS-1, HTS-2, HTS-3, HTS-4, and HTS-5) and less polar ginsenosides were separated by HP-20 resin absorption and HPLC, and the antimicrobial activity and mechanism were investigated. Results: HPLC with diode-array detection analysis revealed that heat treatment induced an extensive conversion of polar ginsenosides (-Rg1/Re, -Rc, -Rb2, and -Rd) to less polar compounds (-Rg2, -Rg3, -Rg6, -F4, -Rg5, and -Rk1). The antimicrobial assays showed that HTS, HTS-3, and HTS-4 were effective at inhibiting the growth of F. nucleatum, C. perfringens, and P. gingivalis. Ginsenosides-Rg5 showed the best antimicrobial activity against the three bacteria, with the lowest values of minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration. One major reason for this result is that less polar ginsenosides can more easily damage membrane integrity. Conclusion: The results indicated that the less polar ginsenoside-enriched fraction from heat transformation can be used as an antibacterial agent to control halitosis.
Campeau, Cindy;Proctor, John T.A.;Murr, Dennis P.;Schooley, Jan
Journal of Ginseng Research
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v.27
no.4
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pp.188-194
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2003
Rust-spot on North American ginseng roots (Panax quinquefolius L.) is considered a physiological, not a pathological disorder. Ginseng rust-spot starts as an orange spot on the surface of the root and may spread forming a sunken, round to irregular lesion. 5 mm in diameter. Pieces of root, 7 mm in length and containing a rust-spotted lesion, were embedded in agar and sectioned using a vibratome. These sections and hand sections, cut with a two-sided razor blade, were examined using fluorescence microscopy. The 4-5 cell layers of the periderm were destroyed in the area of the lesion and orange substance:, were deposited in and around the lesion. Sections stained with vanillin-HCI and viewed using bright field microscopy confirmed that the orange substances were phenolic compounds. Scanning electron micros-copy showed that the periderm had pulled away from the root, or was completely destroyed, in the area of the lesion. The smooth surface of the lesion indicates the deposition of phenolic compounds in surrounding cells as a wound response. Roots sprayed or dipped in ethephon (1500 mgㆍL$^{-1}$ ) developed rust-spots, more so at 21$\pm$2$^{\circ}C$ than at 3$\pm$0.2$^{\circ}C$. Roots held at 21$\pm$2$^{\circ}C$ were yellowish and developed white cell proliferations. Comparable control roots also developed rust-spots likely due to the high undecomposed organic matter content of the incubation soilless mix.
A validated and reproducible HPLC method was developed for the profiling and quantitative analysis of ginsenosides in commercial products available in North America. Analysis of 280 Panax ginseng and Panax quinquefolius products showed profiles indicative of the presence of ginsenosides in the majority of these products. However, the quantitative contents of the products vary greatly, not only in products of different formulations, but also of products within each of the fromulations examined.
Little is known about the genetics or genomics of Panax ginseng. In this study, we developed 70 expressed sequence tagderived polymorphic simple sequence repeat markers by trials of 140 primer pairs. All of the 70 markers showed reproducible polymorphism among four Panax species and 19 of them were polymorphic in six P. ginseng cultivars. These markers segregated 1:2:1 manner of Mendelian inheritance in an $F_2$ population of a cross between two P. ginseng cultivars, 'Yunpoong' and 'Chunpoong', indicating that these are reproducible and inheritable mappable markers. A phylogenetic analysis using the genotype data showed three distinctive groups: a P. ginseng-P. japonicus clade, P. notoginseng and P. quinquefolius, with similarity coefficients of 0.70. P. japonicus was intermingled with P. ginseng cultivars, indicating that both species have similar genetic backgrounds. P. ginseng cultivars were subdivided into three minor groups: an independent cultivar 'Chunpoong', a subgroup with three accessions including two cultivars, 'Gumpoong' and 'Yunpoong' and one landrace 'Hwangsook' and another subgroup with two accessions including one cultivar, 'Gopoong' and one landrace 'Jakyung'. Each primer pair produced 1 to 4 bands, indicating that the ginseng genome has a highly replicated paleopolyploid genome structure.
Ju, H.Y.;Asiedu, S.K.;Hong, S.C.;Gray, B.;Sampson, G.;LeBlanc, P.
Proceedings of the Ginseng society Conference
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1998.06a
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pp.103-108
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1998
The Canadian production of American ginseng (Panax quinquefolius L.) occurs mainly in Ontario, British Columbia and the Atlantic provinces. Although ginseng is a profitable crop, its successful production is dependent on careful consideration of cultural management f include site selection, site preparation, seed selection and handling, shading actors which and mulching, pest and nutritional management, and handling of harvested crops. Diseases of particular concern in Atlantic Canada are root rots caused by Phytopkthora cactorum, Cylindrocarpon destructans and Fusarium sp. Recently two systemic fungicides (metalaxyl and fosetylal) were registered; however, growers in Atlantic Canada have experienced metalaxyl resistance resulting from the reliance on this single compound for the control of Phytophthora sap. Current research being conducted on alternative control of these diseases will be discussed. In weed control research, 2, 4-D, MCPA, clopyralid have continued to show promise for weed contro1 at low rates. In trials to evaluate non-selective herbicides as post-senescence or pre-emergence in ginseng, glyphosate (Round-up) provided control of perennials as well as willowherb and lambsquarters. In phytoxicity trials, ginseng significantly tolerated grass herbicides, including clethodim, rimsulfuron, trakloxydim, nicosulfuron and fenoxyprop. For broadleaf herbicides, significant tolerance was shown for bromoxynil, thifensulfuron methyl, flumetulam/clopyralid, thifensulfuro/tribenuron. Disease and weed management of ginseng in Atlantic Canada will be discussed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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