Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.23
no.6
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pp.1399-1403
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2009
The aim of the present study was to evaluate the possibility of protective effectness of swimming exercise and Gastrodia elata blume oral administration against beta-cell damage in streptozotocin (STZ)-induced diabetes in rats. The animals were divided into five groups: the normal group(n=10), the STZ-induced diabetes group(n=10), the STZ-induced diabetes and moderate-intensity exercise group(n=10), the STZ-induced diabetes Gastrodia elata blume(300 mg/kg) oral administration group(n=10), the STZ-induced diabetes and moderate-intensity exercise and Gastrodia elata blume(300 mg/kg) oral administration group(n=10). Animals in the exercise groups were made to swim moderate swimming exercise protocols once a day for 4 consecutive weeks. Serum glucose concentration and insulin level, superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) were measured in serum. Swimming exercise and Gastrodia elata blume extract administration has shown anti-diabetic effect probably through decreasing serum glucose and insulin level and increasing antioxidant enzyme activity.
Diabetic nephropathy (DN) is the leading cause of end-stage renal disease, and its pathogenesis is complex and has not yet been fully elucidated. Abnormal glucose and lipid metabolism is key to understanding the pathogenesis of DN, which can develop in both type 1 and type 2 diabetes. A hallmark of this disease is the accumulation of glucose and lipids in renal cells, resulting in oxidative and endoplasmic reticulum stress, intracellular hypoxia, and inflammation, eventually leading to glomerulosclerosis and interstitial fibrosis. There is a growing body of evidence demonstrating that dysregulation of 50 adenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK), an enzyme that plays a principal role in cell growth and cellular energy homeostasis, in relevant tissues is a key component of the development of metabolic syndrome and type 2 diabetes mellitus; thus, targeting this enzyme may ameliorate some pathologic features of this disease. AMPK regulates the coordination of anabolic processes, with its activation proven to improve glucose and lipid homeostasis in insulin-resistant animal models, as well as demonstrating mitochondrial biogenesis and antitumor activity. In this review, we discuss new findings regarding the role of AMPK in the pathogenesis of DN and offer suggestions for feasible clinical use and future studies of the role of AMPK activators in this disorder.
The oxidative degradation of BPA with laccase from Trametes versiclor was conducted in a closed, temperature controlled system containing acetate buffer for pH control. The effects of medium pH, buffer concentration, temperature and mediator on degradation of BPA were investigated. The inactivation of the enzyme by temperature and reaction product was also studied. The optimal pH for BPA degradation showed about 5. Buffer concentration did not affect BPA degradation. On the other hand, the enzyme stability was higher at low concentration buffer(25 mM). Temperature rise increased the degradation rate of BPA up to 45$^{\circ}C$. The valuable mediator of laccase for BPA was ABTS. Elevated temperature and reaction product irreversibly inactivated the enzyme.
In this study, the biological activity of water and ethanol extracts from Saururus chinensis by ultra-fine grinding for functional food source are examined. It is more effective to use ethanol than water when extracting phenolic compounds. Approximately 2.5 times higher extraction yield were shown when it was ultra-fine grinded because the particle size decreases, thereby increasing the extraction yield. Normal grinded sample extracts showed 69.8% of DPPH inhibition effect, while fine grinded and ultra-fine grinded sample extracts showed 70.7% and 83.8% each, respectively. Normal extract, as well as fine grinded and ultra-fine grinded extracts, showed over 97% of ABTS inhibition effect, thereby indicating only a slight difference in the anti-oxidative activity with the grinding method. Higher PF was determined with fine grinded and ultra-fine grinded extracts than the normal grinded extract, while ultra-fine grinded 50% ethanol extracts showed the highest anti-oxidative activity value of 1.8 PF. The fine grinded and ultra-fine grinded particle sizes are smaller than the normal grinded particle size, thus increasing the inhibition rate of the TBARS. Furthermore, the ethanol extract was revealed to have a higher effect than the water extracts. The xanthin oxidase inhibition, on the other hand, was identified as ultra-fine grinded that led to the increase in the enzyme inhibition effect. In the angiotensin-converting enzyme, water extracts with normal grinding did not show inhibition activity, while 50% ethanol extracts showed 24% inhibition activity. Moreover, the ethanol extracts showed higher inhibition effect compared to the water extracts. Ultra-fine grinded 50% ethanol extracts showed a slight antibacterial effect on the Staphylococcus aureus and Escherichia coli, while the other extracts showed none. The result suggests that Saururus chinensis extracts by ultra-fine grinding may be more useful than normal grinding as potential sources due to anti-oxidation, angiotensin converting enzyme and xanthine oxidase inhibition.
Proceedings of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers Conference
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2001.05a
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pp.6-10
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2001
We synthesized polypyrrole (PPy) nanotubules by oxidative polymerization of the pyrrole monomer on the pore of a polycarbonate membrane. The electrochemical behavior was investigated using cyclic voltammetry and AC impedance. The redox potential was about -0.5 V vs. Ag/AgCl reference electrode, while the potential was about 0 V for electro-synthesized PPy film. It is considered as the backbone grows according to the pore wall. Therefore, it is possible to be arranged regularly. That leads to improvement in the electron hopping. The AC impedance plot gave a hint of betterment of mass transport. PPy nanotubules have improved in mass transport, or diffusion. That is because the diffusion occurs through a thin pore wall of PPy nanotubules. The kinetic parameter of PPy nanotubules enzyme electrode with glucose solution was evaluated. The formal Michaelis constant and maximum current calculated by computer were about 23.8 mmol $dm^{-3}$ and $440\;{\mu}A$ respectively. Obviously, an affinity for the substrate and current response of the PPy nanotubules enzyme electrode are rather good, comparing with that of PPy film. What is more, the enzyme electrode is sensitive to blood sugar of a diabetic serum despite an obstruction of ascorbic acid, oxygen, some protein and/or hormone.
Phenoxazinone synthase catalyzes the oxidative condensation of two molecules of substituted o-aminophenol to the phenoxazinone chromophore of actinomycin. Mutant strain, Streptomyces sp. V-8-M-1 producing higher phenoxazinone synthase, was obtained from Streptomyces sp. V-8 by treatment of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine. The phenoxazinone synthase was purified from extract of mutant strain of Streptomyces sp. V-8-M-l by successive steps of streptomycin sulfate, ammonium sulfate precipitation. DEAE-cellulose and Sephadex G-200 column chromatography. Molecular weight of the enzyme was 360,000 daltons. The enzyme was composed of octamer of a single subunit of 45,000 daltons. The Km value and Vmax value for 3-HAA were $14.9{\;}{\mu}M$ and 9.5 mg/U, respectively. The optimal pH and temperature for the enzyme activity were 9.0 and $25~30^{\circ}C$, respectively. Treatment of the enzyme with group specific reagents, phenylglyoxal, p-hydroxymercury-benzoate, Nbromosuccinimide, 5.5'-dithiobis-nitrobenzoic acid and ethylmaleimide resulted in loss of enzyme activity, which shows arginine and cysteine residues are at or near the active site.
Flavonoids are class of polyphenolic compounds widely distributed in the plant kingdom, which display a variety of biological activities, including antiviral, antithrombotic, antiinflammatory, antihistaminic, antioxidant and free-radica 1 scavenging abilities. The antioxidant enzyme (AOE) system plays an important role in the defense against oxidative stress insults. To determine whether flavonoid, myricetin can exert antioxidative effects not only directly by modulating the AOE system but also scavenging free radical, we investigated the influence of the flavonoid myricetin on cell viability, different antioxidant enzyme activities, ROS level and the expression of different antioxidant emzyme in B16F10 murine melanoma cells. Myricetin in a concentration range from 6.25 to $50\;{\mu}M$ decreased superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx) enzyme activities, but catalase (CAT) activity was increased. In the myricetin-treated group, ROS levels were decreased dose-dependently. Antioxidant enzyme expression was measured by RT-PCR. Myricetin treatment of B16F10 cells increased catalase expression. Expression levels of copper zinc superoxide dismutase (CuZn SOD) were not affected by exposure of myricetin. Manganese superoxide dismutase (Mn SOD) and GPx expression levels decreased slightly after myricetin treatment. In conclusion, the antioxidant capacity of myricetin was due to CAT and free-radical scavenging.
It has been known that quercetin, a bioflavonoid widely distributed in fruits and vegetables as dietary-derived flavonoid and exert significant multiple biological effects such as antioxidant and anti-inflammatory, anti-tumor effects. In addition, it has been shown to have a chemoprotective role in cancer, though complex effects on signal transduction involved in cell proliferation and angiogenesis. The present study investigated whether quercetin can enhance antioxidant enzyme activity (glutathione peroxidase: GPx, superoxide dismutase: SOD, catalase: CAT) and regulate the reactive oxygen species (ROS) generation in the presence of vitamin E, L-ascorbic acid, reduced glutathione (GSH) on B16F10 murine melanoma cells. After 48h treatment of cells with quercetin in the presence of vitamin E, L-ascorbic acid, GSH, we measured the cytotoxicities by MTT assay. The cells exhibited a dose-dependent inhibition in their proliferation in the presence of vitamin E, L-ascorbic acid, GSH respectively. We also investigated the effects of antioxidant enzyme activity and ROS generation. The antioxidant enzyme activity of quercetin in the presence of vitamin E was stronger than GSH, L-ascorbic acid, the same treatments decreased ROS generation in B16F10 murine melanoma cells. Taken together, these result demonstrate that the antioxidant effect of quercetin can enhanced in the presence of vitamin E and it might plays an important role in anti-oxidative effects.
This protocol clarifies a simple and precise method for measuring the activity of xanthine oxidase (XO) enzyme inhibitor. XO enzyme, which accelerates oxidative stress-related disorders through its capacity to generate hydrogen peroxide and superoxide anion radicals (O2•-), has been found to be inhibited by several plant extracts. Enzyme samples were incubated with a suitable buffer containing adequate amounts of xanthine as a substrate to determine XO activity. The method depends on direct measurements of uric acid and hydrogen peroxide production to test XO with and without interference. The CUPRAC reagent (Cu(Nc)22+) was used to inhibit enzyme reaction after incubation was complete. The generated urate and peroxide reduced the Cu(II)-neocuproine complex (Cu(Nc)22+) to a brightly colored Cu(I)-neocuproine complex (Cu(Nc)2+), which was assessed with a spectrophotometer at 450 nm. XO activity was found to be directly related to the increased absorbance of the colored Cu(I)-neocuproine complex (Cu(Nc)2+). To eliminate catalase enzyme interference, the proposed method used sodium azide and was validated against XO activity using the UV method in matched samples with t-test analysis. The proposed assay can determine XO activity with high precision, as indicated by the correlation coefficient (R2 = 0.9935) from comparison with the reference protocol.
Plant disease resistance occurs as a hypersensitive response (HR) at the site of attempted pathogen invasion. This specific event is initiated in response to recognition of pathogen-associated molecular pattern (PAMP) and subsequent PAMP-triggered immunity (PTI) and effector-triggered immunity (ETI). Both PTI and ETI mechanisms are tightly connected with reactive oxygen species (ROS) production and disease resistance that involves distinct biphasic ROS production as one of its pivotal plant immune responses. This unique oxidative burst is strongly dependent on the resistant cultivars because a monophasic ROS burst is a hallmark of the susceptible cultivars. However, the cause of the differential ROS burst remains unknown. In the study here, we revealed the plausible underlying mechanism of the differential ROS burst through functional understanding of the Magnaporthe oryzae (M. oryzae) AVR effector, AVR-Pii. We performed yeast two-hybrid (Y2H) screening using AVR-Pii as bait and isolated rice NADP-malic enzyme2 (Os-NADP-ME2) as the rice target protein. To our surprise, deletion of the rice Os-NADP-ME2 gene in a resistant rice cultivar disrupted innate immunity against the rice blast fungus. Malic enzyme activity and inhibition studies demonstrated that AVR-Pii proteins specifically inhibit in vitro NADP-ME activity. Overall, we demonstrate that rice blast fungus, M. oryzae attenuates the host ROS burst via AVR-Pii-mediated inhibition of Os-NADP-ME2, which is indispensable in ROS metabolism for the innate immunity of rice. This characterization of the regulation of the host oxidative burst will help to elucidate how the products of AVR genes function associated with virulence of the pathogen.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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