The transition from primary to secondary metabolism in antibiotic-producing Streptomyces correlates with expression of genes involved in stress responses. Consequently, regulatory pathways that regulate specific stress responses are potential targets to manipulate to increase antibiotic titers. In this study, genes encoding key proteins involved in regulation of the osmotic stress response in Streptomyces avermitilis, the industrial producer of avermectins, are investigated as targets. Disruption of either osaBSa, encoding a response regulator protein, or osaCSa, encoding a multidomain regulator of the alternative sigma factor SigB, led to increased production of both oligomycin, by up to 200%, and avermectin, by up to 37%. The mutations also conditionally affected morphological development; under osmotic stress, the mutants were unable to erect an aerial mycelium. In addition, we demonstrate the delivery of DNA into a streptomycete using biolistics. The data reveal that information on stress regulatory responses can be integrated in rational strain improvement to improve yields of bioactive secondary metabolites.
Marcelo de Oliveira, Santos;Albuquerque de Barros, Erika Valeria Saliba;Penha Tinoco, Maria Laine;Miranda Brasileiro, Ana Cristina;Lima Aragao, Francisco Jose
Journal of Plant Biotechnology
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제4권2호
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pp.71-76
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2002
In order to achieve repetitive somatic embryogenesis in cacao (Theobroma cacao L.), callus derived from floral tissues were continuously cultured in a medium containing 2,4-D. In 5% of the explants, repetitive somatic embryogenesis was observed after 8 weeks and maintained in a globular stage for several weeks. This is the first report showing repetitive somatic embryogenesis in cacao. The calli were bombarded with a plasmid containing $\beta$-glucuronidase (gus) as reporter gene. Two week old calli showed the high average number of cells expressing the us gene. The effect of osmotic agents (mannitol, sorbitol and sucrose) on gene expression was evaluated. Pre-treatment during 16 h with 0.25 M mannitol revealed an improvement in gene expression. The potential utilization of the repetitive embryogenesis, combined with osmotic treatment, is discussed as an alternative to achieve stable transgenic cacao plants.
삼투정 펠렛은 경구를 통한 약물전달 시스템에 폭넓게 사용되고 있으며, 이러한 삼투정 펠렛은 수팽윤성 시드층과 모델약물인 니페디핀을 포함하는 약물층 그리고 약물의 방출을 조절하는 반투막 층으로 구성되어 있다. 이번 연구에서는 모델약물인 니페디핀을 포함한 삼투정 펠렛을 제조하고, 반투막층으로 사용되는 초산셀룰로오스(CA)와 Eudragit RS의 코팅두께에 따른 약물방출 거동과 알긴산 나트륨과 알긴산 나트륨의 가교가 삼투정 펠렛의 약물방출에 미치는 영향에 대하여 확인하고자 하였다. 모델약물인 니페디핀을 포함한 삼투정 펠렛의 제조는 유동층코팅기를 이용하여 제조하였으며, 비교적 높은 코팅 수율로 $1500{\sim}1700{\mu}m$ 내외의 펠렛이 제조됨을 SEM을 통하여 확인하였다. 이렇게 얻어진 펠렛의 반투막 층의 코팅두께에 따른 약물방출 거동을 보면 반투막의 코팅 두께가 증가할수록 약물의 방출이 지연됨을 확인하였다. 알긴산 나트륨을 반투막층 위에 코팅하였을 경우 인공위액(pH 1.2)에서는 약물방출이 거의 일어나지 않았으며, 인공장액(pH 6.8)으로 교체한 후 약물방출이 서서히 증가함을 알 수 있었다. 또한 알긴산 나트륨을 염화칼슘을 이용하여 가교시켰을 경우 약물의 방출이 급격히 감소함을 알 수 있었다. 이번 실험을 통하여 삼투정 펠렛의 약물방출은 반투막충의 코팅두께에 영향을 받으며, 알긴산 나트륨이 삼투정 펠렛의 약물방출에 영향을 끼침을 확인하였다.
자작나무, 박달나무, 느티나무, 산벚나무, 고로쇠나무 1년생 유묘에 5수준의 인공피음처리를 실시하면서 이들의 수분특성에 미치는 피음의 영향을 조사하기 위하여 P-V curve에 의한 분석을 실시하였다. 최대 팽압 하에서의 osmotic potential(${\phi}_{{\pi}o}$)은 전광처리구에서 6월, 7월, 9월에 각각 -1.04~-1.27MPa, -1.03~-1.48MPa, -0.94~-1.44MPa(1차 연도), -0.90~-1.37MPa, -1.05~-1.79MPa, -0.99~-1.30 MPa(2차 연도)의 범위에서 수종이나 계절에 따라 변화를 보였다. 최대 팽압 하에서의 osmotic potential(${\phi}_{{\pi}o}$)은 전기간을 통해 조사된 모든 수종에서 전광 처리구(A)는 -0.90~-1.79MPa, 강피음구(E)는 -0.58~1.23MPa의 범위 내에서 피음수준이 높아지면서 증가하는 모습을 보였다. 초기위조점에서 측정된 수분 potential(${\phi}_{{\pi}p}$)은 전광 처리구(A)에서 6월, 7월, 9월에 각각 -1.64~-2.11MPa, -1.67~-2.15MPa, 1.47~-2.11MPa(1차 연도)과 -1.45~-2.04MPa, -1.30~-2.00MPa, -1.28~-2.33MPa(2차 연도)의 범위 내에서 변화를 보였다. ${\phi}_{{\pi}p}$ 측정치 대부분은 ${\phi}_{{\pi}o}$ 측정치에 비해서 약 0.5MPa 정도의 낮은 값을 보였다. ${\phi}_{{\pi}p}$ 측정치 또한 피음처리를 강하게 할수록 증가하는 경향을 보였으며 피음처리에 따른 ${\phi}_{{\pi}p}$ 측정치의 차이는 수종이나 생육시기에 따라 일부 예외는 있지만 일반적으로 ${\phi}_{{\pi}o}$ 측정치에서의 차이보다는 더 큰 것으로 나타났다. 최대팽압에서와 마찬가지로 초기위조점에서의 osmotic potential 측정치 대부분은 6월이나 9월에 비해 7월에 측정된 값이 다소 낮은 값을 보였다. 초기위조점에서의 상대수분함량(RWCp)은 전광조건에서 1차 연도 6월, 7월, 9월에 각각 81~88%, 71~86%, 75~84%, 2차연도에는 82~87%, 72~84%, 76~86%로 연도별 차이가 별로 크지 않은 비슷한 범위 내에 있었다. 고로쇠나무, 산벚나무에서의 상대수분함량은 자작나무 박달나무, 느티나무에 비해 다소 높은 값을 보였다. RWCp 또한 전광조건(A)에서는 71~88%, 강피음구(E)에서는 48~77%까지로 대부분 피음처리 수준이 강할수록 감소하는 변화를 나타냈다. 비록 수종이나 계절에 따라 일부 예외는 있지만 몇 가지 P-V 모수들의 변화에 미치는 피음효과는 본 연구에서 분명하게 확인할 수 있었다. 피음처리에 따른 P-V 모수들의 변화는 전해질의 축적, 세포막의 탄성, 세포액 등에서의 변화 등과 관련지어 추론될 수 있다. 그러나 P-V 모수들의 변화에 미치는 피음효과에 대한 생리적인 기작에 대하여 상세한 정보를 얻기 위해서는 반드시 더 많은 실험이 계속되어야만 할 것이다.
Ecophysiological parameters of non-transgenic sweetpotato (NT) and transgenic sweetpotato (SSA) plants were compared to evaluate their resistance to multiple environmental stresses. Stomatal conductance and transpiration rate in NT plants decreased markedly from Day 6 after water was withheld, whereas those values in SSA plants showed relatively higher level during this period. Osmotic potential in SSA plants was reduced more negatively as leaf water potential decreased from Day 8 after dehydration treatment, while such reduction was not shown in NT plants under water stressed condition. SSA plants showed less membrane damage than in NT plants. As water stress and high light stress, were synchronously applied to NT and SSA plants maximal photochemical efficiency of PS II ($F_v/F_m$) in NT plants markedly decreased, while that in SSA plants was maintained relatively higher level. This trend of changes in $F_v/F_m$ between SSA plants and NT plants was more conspicuous as simultaneously treated with water stress, high light and high temperature stress. These results indicate that SSA plants are more resistive than NT plants to multiple environmental stresses and the enhanced resistive characteristics in SSA plants are based on osmotic adjustment under water stress condition and tolerance of membrane.
The effect of ionic osmotic potential (Ψ$\pi$), and matric potential (Ψm) in the range of -0.2 to -4.0 Mpa on mycelial growth of three species of Pleurotus (P.florida, P.ostrenatus and P.safor-caju) were determined over a range of temperature (15-3$0^{\circ}C$) on a 2% malt extract agar medium and compared with the Ψ$\pi$ effect on growth of two strains of Trichoderma green mould. With the ionic solute KCl, optimun Ψ$\pi$for growth was -0.2 MPa for P.floreda and in the range of -0.2 to -0.5 MPa, with slight growth at -3.0 MPa and with nogrowth at -4.0 MPa. Of the species of Pleurotus, P.florida grew signigicantly slower than the other two species. Growt of the species of Pleurocus was significantly slower when water potential (Ψ$\omega$) was modified matrically with polyethylene glycol (PEG) 8000 then osmotically with KCl. They were also more sensitive to changes in Ψm than Ψ$\pi$The optimum Ψm of the Pleurotus was -0.5 Ψm, with no growth below -3.0 MPa. Of the species of Pleurotus, P.florida was most sensitive and P.sajor-caju was more tolerent to lowered Ψ$\pi$,but P.sajor-caju was most sensitive to lowered Ψm. The growth rate of the Trichoderma green mould strains was much faster than that observed for the Pleurotus spp. Optimum growth for bot strains of Trichoderma was in the range of -0.2 to -0.5 MPa. Strain CNU 503 was more tolerant to water stress than strain CNU 501. Both strains were able to grow up to 30% of optimum growth at -4.0 MPa at 25-3$0^{\circ}C$.
This study was to investigate the dry weight, the amount of Na+ and K+ water potential and leaf photosynthesis rate in plants for determining the salt tolerance mechanism in rice cultivars on soil and solution culture with NaCl. The results obtained in this study are summarized as follows ; In general, rice cultivars, cv. Tetep and Jinbu, having high salt tolerance in ID(identified on dry matter production level) showed the higher salt tolerance in RGR (relative growth rate), compared with rice cultivars(cv. Nonglim 41ho, Dunraebyeo and Sobackbyeo) having low salt tolerance. The contents of Na in rice differed depending on culivars and plant parts. Tetep contained 2.9times higher amounts of Na+ than leaf blade and root part. High salt tolerance cultivar Obongbyeo showed a larger decrease in osmotic potential than low salt tolerance cultivar Dunraebyeo suggesting that osmotic adjustment was developed under salt stress conditions in a salt tolerant cultivar . In order to know the IY(identified on grain yeild level using rice cultivars having different salt tolerance the capacity of photosyntheiss was investigated. The capapcity of photosynthesis in cv. Tetep and Obongbyeo having high salt tolerance was much higher that in cv.Dunraebyeo and Nonglim 41 having low salt tolerance.
This study evaluated the potential of utilizing the osmotic solution from dried mango processing as alternative raw material for mango wine making. Fermentation was carried out using two kinds of yeast strains Saccharomyces bayanus, Lalvin EC-1118 and Saccharomyces cerevisiae, Lalvin D-47 at 20$^{\circ}C$ for 28 days. Physicochemical analysis during fermentation was performed for each treatment and the resulting wine samples were analyzed for color, volatiles and sensory properties. Results of physicochemical analysis between the two fermenting samples as well as the wine samples show almost similar results regardless of the yeast strains. Wine color of sample wines after storage were not significantly different at p<0.05 and when compared with a commercial mango wine. From the volatile analysis, esters and alcohols constituted majority of the compounds. Production of several esters, alcohols, acids and terpenes were affected by yeast strain used in fermentation. Results of sensory analysis showed that wines fermented by S. bayanus EC-1118 strain was more acceptable although sensory scores between the treatments and the reference wine showed significant differences in all the attributes evaluated, except for bitterness. The utilization of osmotic solution from dried mango process could produce similar properties with existing commercial mango wines although there is still need for further work on the improvement of some sensory attributes of the mango wines.
This study reports the encapsulation of plasmid DNA in erythrocyte ghosts. The plasmid DNA was encapsulated into erythrocyte ghosts using three methods; osmotic shock, electroporation in isotonic medium, and e1ectroporation in hypotonic medium. Of three methods, electroporation in hypotonic medium resulted in the highest encapsulation efficiency of plasmid DNA. The morphology of erythrocyte ghosts prepared by electroporation in hypotonic medium was similar to that by osmotic shock alone. The circulation time of plasmid DNA in mice was prolonged by administration in erythrocyte ghost-encapsulated forms. These results indicated the potential of erythrocyte ghosts for biocompative nonviral delivery system of therapeutic genes for hematological diseases.
The effects of NaCl salinity on the leaf photosynthesis and water relation of two cultivars of rice(Oryza sativa L.) , the salt-tolerant cultivar Seohae and the salt-senstive cultivar Iri-380 were exam-ined. Two cultivars of rice were grown for 14 days in nutrient solution at SOmM NaCl. Comparing theieaf Na content of two cultlvars, Seohae showed high accumulation of Na content in the leaf blade, while Iri-380 showed low. The Na content in leaf blade reduced the rate of leaf photosynthesis. Salt-tolerant cultivar Seohae was less decreased the rate of leaf photosynthesis than salt- sensitive cultivarIri-380. And Seohae showed larger decreased the osmotic potential in the leaves than Iri-380. This in-dicates that in the salt-tolerant cultivar, osmotic adjustment is developed under saliniEation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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