To assess the potential as biofortified rice varieties, new endosperm and grain mutant lines were selected from $M_4$ generation seeds of the rice cultivar Shindongjin, which were either $\gamma$-irradiated or treated with N-methyl-N-nitrosourea(MNU) and lipid, sugar, and tocopherol content were analyzed. Amylose content in non-waxy mutants ranged from 8.8% in SM-4, a dull-type mutant, to 29.5% in SM-51, compared to 18.9% in the parental variety, Shindongjin. SM-23, a floury-type mutant, contained 0.09 ${\mu}g/g$$\alpha$-tocopherol(40.9% of total tocopherol), was three times higher than in the parental variety. SM-32, a giant embryo-type mutant, had a 2.2-fold higher total tocopherol content, 2.1-fold higher $\alpha$-tocopherol, and 5.5-fold higher $\delta$-tocopherol content(47.3% of total tocopherol) than the parental variety(0.13 ${\mu}g/g$). Total free sugar content was elevated in all selected mutants and 1.2-8.6 times higher than in the parental variety(11.38 ${\mu}g/g$). These increased sugar levels were due to increase in sucrose concentration. SM-23(floury-type mutant) and SM-51(high amylose-type mutant) had 4.6 and 7.0 times more sugar, respectively, than the parental variety(11.38 ${\mu}g/g$). With relatively high concentrations, most mutants showed elevated fatty acid content in the SM 32(giant embryo-type) and SM-51(high amylose-type) mutants, at 124.56 and 89.59 mg/g, respectively. All selected mutants displayed valuable characteristics for the development of new varieties in rice-breeding programs.
일련의 5-benzofuryl-2-[1-(alkoxyimino)alkyl]-3-hydroxycyclohex-2-en-1-one 유도체, (S)중 2,3-dihydro-2,2,4,6,7-pentamethylbenzofuran-5-yl 치환체들의 발아 전 후의 벼 (씨앗 및 3엽기)와 물피 (Echinochloa crus-galli)에 대한 제초활성을 측정한 바, $R_{1}$=methyl 치환체, $1{\sim}5$가 비교적 우수한 제초활성을 나타내었다. Azomethine 결합치 N 원 자상 alkoxy ($R_{2}$)기가 변화함에 따른 구조와 제초활성과의 관계 (SAR)를 정량적으로 검토한 결과, $R_{1}$이 모두 동일하다는 가정하에 벼의 3엽기에는 (S)가 소수성에 의존적으로 적정값, $(logP)_{opt.}=4.57$을 가질 경우에 약해가 가장 클 것이며 물피에 대한 경우에는 소수성보다 $B_{2}$값에 더 의존적이었다. 두 초종에 대한 선택성 조건으로 (S)는 적정값보다 큰 소수성 (logP>4.57)과 길이 (L)와 폭 (B)이 큰 원형이어야 하고 $R_{1}$-치환기는 작아야하며 $R_{2}$-기는 불포화되어야 할 것으로 예상되었다.
수도(水稻)에 대(對)한 가리추비(加里追肥)의 효과(效果)를 재확인(再確認)하고 추비용(追肥用) NK 복비(複肥)의 필요여부(必要與否)를 검토(檢討)하고자 수도품종(水稻品種) AKIBARE를 가지고 몇가지 시제(試製) NK 복비(複肥)의 비효(肥效)를 단비(單肥)(요소(尿素)와 염화가리(鹽化加里))와 대비(對比)하여 포장시험(圃場試驗)을 하였으며 이 시험(試驗)에서 얻어진 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 수도(水稻)에 대(對)한 가리추비(加里追肥)의 효과(效果)는 현저(顯著)하여서 무가리구(無加里區)의 수량(收量)에 대(對)하여 가리(加里)를 전량기비(全量基肥)로 시용(施用)한 구(區)의 수량(收量)은 유의성(有意性)있는 증수(增收)를 못하였으나 염화가리(鹽化加里) 또는 NK 복비(複肥)를 기(基)(2/3)추(追)(1/3)비(肥)에 분시(分施)한 구(區)에서는 유의성(有意性)있는 증수(增收)를 하였다. 2. 소두대(小豆大)로 조립(造粒)한 NK복비(複肥)는 비효(肥效)가 늦어서 수비(穗肥)로 했을때는 증수효과(增收效果)가 적고 유효분벽비(有效分蘗肥)로 했을때는 증수효과(增收效果)가 있었다. 3. 수도(水稻)에 대(對)한 추비용(追肥用) NK 립상복비(粒狀複肥)는 더 세립(細粒)으로하여 용해(溶解)를 촉진(促進)하거나 아니면 수비기(穗肥期)보다 일찍 시용(施用)해야 할 것 같다.
Fenoxaprop-P-ethyl에 대한 bentazon의 길항작용기작을 검정하기 위하여 4엽기의 벼와 피를 대상으로 bentazon 혼합처리에서 나타나는 fenoxaprop-P-ethyl의 흡수, 이행, 대사 및 작용점의 활성 변화를 조사하였다. Fenoxaprop-P-ethyl에 대하여 벼와 피의 지상부에서 생육억제가 크게 나타났다. Fenoxaprop-P-ethyl 단독처리에 있어서 두 초종 모두에서 처리 직후부터 빠른 속도로 약제가 흡수되어, 총 흡수량의 90%이상이 약제처리 6시간 이내에 이루어졌으며, 처리 24시간까지 흡수량의 약 30%가 처리엽의 상, 하위조직으로 이행되었다. Ethyl ester형으로 처리된 약제는 신속히 acid형으로 전환되었으며, 처리 24시간 후부터는 acid형이 conjugate형의 대사물로 전환되었다. 그러나 bentazon에 의한 fenoxaprop-P-ethyl의 흡수, 이행 및 대사활성의 변화는 인정되지 않았다. In vitro ACCase의 활성은 벼와 피 에서 각각 26.5 및 23.2nmol/min/mg protein으로 나타났다. 이 효소 활성의 50% 저해농도에 있어서 fenoxaprop-P-ethyl 단독처리와 bentazon 혼합처리 사이에 유의성은 인정되지 않았다. 그러나 bentazon 처리에 의하여 in vivo ACCase 활성의 감소와 엽록체 thylakoid에서 전자전달의 억제가 나타났다. 따라서 fenoxaprop-P-ethyl에 대한 bentazon의 길항작용기작은 bentazon이 fenoxaprop-P-ethyl 작용점의 활성에 직접적으로 관여하는 것이 아니라, 엽록체 구조 및 활성 저해에 의한 fenoxaprop-P-ethyl의 작용점 감소를 통하여 간접적으로 fenoxaprop-P-ethyl의 활성을 억제하는 것으로 판단된다.
담수표면산파재배시 파종 7~10일전에 oxadiazon, molinate, thiobencarb를 처리하여 앵미와 피에 대한 방제 효과 및 재배벼에 대한 영향을 조사하였다. oxadiazon 처리구 중에 특히 72g ai/10a이상의 고약량구에서는 환경조건에 따라 초기 입모지연 등의 약해증상이 나타날 수도 있으나, 이는 경시적으로 회복되어 그후의 생육에는 지장이 없었다. 따라서 약해에 대한 안전성면에서 60g ai/10a 이하가 적정량으로 생각된다. Molinate와 thiobencarb 처리구는 각각 225~400, 210~420g ai/10a 약량수준으로 처리하였는데 거의 약해가 없었다. 앵미에 대한 효과는 제초제의 종류 및 약량에 따라 차이가 있었는데, oxadiazon의 경우는 처리량이 60g ai/10a이상에서 비교적 우수한 방제율을 나타냈다. Molinate와 thiobencarb는 약량이 증가되면서 앵미의 방제효과는 증가되었으며, 두 약제 모두 300g ai/10a이상의 약량에서 비교적 양호한 방제율을 나타냈다. 피에 대한 효과는 공시 제초제 모두 90~100% 범위의 우수한 효과를 보였다. 실험을 실시한 모든 포장에서 공시한 3가지의 파종전 제초제를 처리하여 약해로 인한 수량감소를 보인 포장은 한군데도 없었다. 폿트실험에서 파종 1일 후 배수한 경우가 착근할 때까지 계속 담수상태를 유지한 경우보다 약해도 적고 입모수도 많았으며 초기생육도 양호하였다.
조생종(난원벼), 중생종(화성벼) 및 중만생종(동진벼)을 공시하고 이들의 육묘기간을 35일(중묘), 20일(치묘) 및 8일(어린모)로 달리한 묘를 6월 9일에 이앙하여 벼 생태형 및 육묘일수의 차이가 제초제의 약해에 어떤 반응을 나타내는가를 비교 검토하여 벼 재배시 잡초방제의 기초 자료로 활용하고자 이앙 후 5일에 bensulfuron+butachlor와 bensulfuron+mefenacet 입제를 처리하여 시험한 결과는 다음과 같다. 제초제 처리에 의해서 생육 초기에 동진벼, 화성벼, 남원벼 모두 지상부 및 지하부의 생장이 유의적으로 저해 되었는데 특히 지상부보다 지하부인 근부생장이 크게 억제되었으며, 두 약제간의 차이는 유의성이 없었다. 육묘기간에 따른 벼 생육량은 중만생종인 동진벼와 중생종인 화성벼는 20일묘, 8일묘가 35일묘의 이앙구보다 생육량이 컸으며 조생종인 남원벼는 8일묘의 이앙구가 낮았다. 이는 bensulfuron+butachlor와 bensulfuron+mefenacet의 처리에서도 같은 경향이었다. 특히 이들 제초제 처리에 의해서 초기 약해로 인하여 최고분얼수는 적었으나 후기 출수(出穗)는 차이가 없어 유효경비율(有效莖比率)이 높았다. 조생종인 남원벼는 이들 제초제의 처리로 초기의 생육 지연이 출수에 있어서 중묘는 2일, 치묘는 1-2일, 그리고 어린모는 2-3일 정도 지연되는 경향이었다.
비선택성 제초제인 bialaphos는 고등식물에 있어서 glutamine 합성을 억제 하여 식물체를 고사시킨다. Acetyltransferase에 의해 encoding된 bialaphos저항성 유전자는 세균 Streptomyces hygroscopicus SF1239로부터 cloning된것을 사용하였다. Bialaphose 저항성 유전자를 Agrobacterium 감염법을 이용하여 국내에서 재배되는 벼(동진)에 도입한 결과 약30%정도의 형질전환 식물체를 얻을 수 있었다. $\textrm{T}_{1}$ 세대의 17개체는 hygromycin과 bialaphos에 대한 저항성 유전형질이 3:1로 분리되었다. 또한 Southern 분석을 실시한 결과 wild type의 식물체에서는 Bar 유전자의 검출을 볼 수 없었으나 형질전환 식물체의 경우 Bar 유전자의 검출이 가능하였다. $\textrm{T}_{3}$세대의 형질전찬 식물체와 wild type의 식물체를 포장상태에서 비선택성 제초제인 바스타를 살포하고 3주 후에 관찰한 결과 형질전환 식물체는 외형적으로 아무런 피해를 받지 않고 정상적으로 생장하였으나, wild type의 식물체와 잡초는 모두 고사하였다. 이상의 결과를 종합해보면 hygromycin과 bialaphos 저항성 유전자는 Agrobacterium감염법을 이용하여 단자엽 식물인 벼에 도입할 수 있다는 것을 보여준 것이며, 또한 bialaphos 저항성 유전자가 식물에 도입됨으로써 비선택성 제초제에 대한 저항성 식물을 개발 할 수 있다는 것을 보여 주었다.
본 연구에서 분자육종을 위한 신속 DNA추출법을 개발하고자, 2% CTAB 추출법을 시스템적으로 개량한 Modified CTAB법에 대한 결과를 요약하면 아래와 같다. 1. DNA 추출용 샘플마쇄는 Voltex mixer, 3개 텅스텐 구슬 및 96 deep well block을 이용하였으며, 5분 이내에 96개 샘플을 분쇄할 수 있었다. 2. Modified CTAB DNA 추출법은 1.5 ml E-tube 대신에 1.2 ml 8연식 tube를 사용하였으며 DNA 추출, PCR작업 및 전기영동까지 일련의 작업이 8채널 멀티피펫을 이용할 수 있는 시스템적으로 개선하였다. 3. Modified CTAB법은 어린잎 뿐 만 아니라 이앙 후 30일째 채취한 잎에서도 DNA 추출이 가능하기 때문에 기존의 육종포장에 재식된 재료를 활용할 수 있는 장점이 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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