Orchids are evolutionally known to be the most advanced plants in the order Liliales, and comprise approximately 1,000 genera and 35,000 species world-wide. In Korea, more than 110 species of Orchidaceae have been reported to be cultivated or to be collected in the wild. Orchids aye mostly dependant on orchid mycorrhizae(OM) throughout or in part of their life cycle. The OM endomycorrhizae belonging to basidiomycetes or rarley ascomycetes are needed for orchid seed germination. Various fungi, including plant pathogenic, antagonistic and symbiotic fungi, were isolated from the roots of orchid native to Korea. The OM fungi collected from the roots of Cymbidium goeringii were three species of Rhizoctonia namely, R. repens (anamorph state of Tulsanella repens), R. endophytica (Ceratobasidium cornigerum), and an unidentified species (possibly an anamorph of T. calospora). These symbiotic fungi induced peloton in the cortical cells of orchid roots, and differed biologically and in 18s rDNA sequences from plant pathogenic Rhizoctonia species. Also, the mycorrhyzal fungi enhanced the orchid root absorption of nitrogen sources and minerals from the soil. The activity of mycorrhizal fungal hyphae in the roots caused prevention from pathogenic fungi. In nature, the peloton is observed in the cortical cells of Cymbidium goeriingii roots, indicating mycorrhizal colonization in the native orchid roots. On the other hand, pathogenic fungi such as Fusarium and/or Rhizoctonia species are mostly isolated from commercial orchid plants. These suggest that application of symbiotic mycorrhizal fungi should be needed for orchid cultivation in nurseries and at the time of transplanting.
Ten isolates of the orchid mycorrhizal fungi were isolated from the roots of Korean native orchid plants (Cymbidium goeringii) which inhabitate mainly in southern and western areas of Korea. The growth rates and color of the isolates in potato dextrose agar (PDA) were various. Microscopic observations of the hyphae isolated were identified as Rhizoctonia repens and R. endophytica var endophytica or their related species. R. repens was isolated from the roots of the Korean native orchids, but R. endophytica var endophyica was only isolated from the roots of the commercial orchids introduced from foreign countries. Also, the polymorephic patterns of genomic DNA extracted from selected isolates were compared with those of DNA extracted from the orchid mycorrhizal fungi isolated previously and similar band patterns were observed among those isolates. Five isolates of R. repens were selected and cultured at the oatmeal agar for investigating their symbiosis with orchid plants. The symbiotic specificity between orchid plants and isolated orchid mycorrhizal fungi was observe by growing orchids about six months in the greenhouse. The symbiotic responses of the commercial orchid plants with selected isolates were quite different form different isolates due to the genetic variations.
In this study, orchid mycorrhizal fungi (OMF) were isolated from four terrestrial orchids on Mt. Hambeak, Platnathera chlorantha, Platnathera mandarinorum, Cephalanthera falcate, and Cephalanthera longibracteata. OMF were identified using morphological and sequences analysis of fungal internal transcribed spacer (ITS) regions by specific primer of basidiomycetous orchid mycorrhizas; ITS1-OF and ITS4-OF. Four species of orchid mycorrhizal fungi were identified as Ceratobasidium sp, Epulorhiza anaticula, Tulasnella calospora and Tulasnella sp.
Two fungal isolates obtained from roots of Cymbidium goeriingii in Jeju island were confirmed to be symbiotic with orchid plantlets, and were compared with other orchid mycorrhizal(OM) fungi previously isolated. The two isolates differed in their peloton structures formed in the roots of Cymbidium kanran hybrid 'Chungsu' and in responses of orchid plant. These two isolates differed from the additionally tested OM fungi in some features, and from root damaging species of Rhizoctonia and Fusarium as based on cluster analysis after PCR-RAPD with the primers, Bioneer-28 and OPO-2. With this simple and fast technique, it was possible to distinguish OM fungi from the plant root pathogenic fungi based on calculation of their polymorphic bands. This technique can therefore be helpful to distinguish the OM fungi from the root pathogens. Particularly, the new isolates are considered as new resource of symbiotic fungi for horticultural industries.
In this study, roots of Epipactis thunbergii were collected from Chujado on the north of Jeju-do. Six fungal isolates were isolated from surface-sterilized roots of the orchid and classified with groups based on morphological characteristics. Fungal DNA was extracted from each isolate and amplified ITS region using ITS1-OF/ITS4-OF primer pair. Three species of orchid mycorrhizal fungi were identified as Tulasnella calospora, Tulasnella sp. and Sebacina sp. based on molecular and morphological characteristics.
Orchid mycorrhizal fungi(OMF) were examined in roots of the two threatened orchid species, Cypripedium japonicum and C. macranthum. The morphological characteristics of mycorrhizal colonization in the roots of two orchid species were observed. OMF colonized in the roots of two species were identified using molecular analysis. DNA from the root was extracted and amplified internal transcribed spacer(ITS) region using basidiomycete ITS primers, ITS1-OF and ITS4-OF. Four species belonging to Tulasnellaceae in roots of C. japonicum and two species of Tulasnellaceae and one basidiomycetous species was found in roots of C. macranthum.
Orchid mycorrhizal fungi (OMF) were examined in roots of the six terrestrial species of orchids collected in Ulleung Islands. Seven OMF isolates from the roots of orchids were identified based on morphological and molecular characters. Internal transcribed spacer region of OMF DNA was amplified using basidiomycete-specific ITS primers, ITS1-OF and ITS4-OF. OMF beloning to Tulasnellaceae and Ceratobasidaceae was identified through molecular analysis.
The orchid symbiotic fungi were isolated from the roots of Korean native orchid (Cymbidium goeringii) collected and Chinese orchid (C. sinense) obtained from greenhouses. They were identified as a species of Rhizoctonia, based on the sequences of 18r rDNA, the microscopic observations of mycelia, and the symbiotic relationships with commercial orchids. The isolate collected from Chinese orchids was revealed to be a species of Ceratobasidium endophytica, and to be different from the other isolates at the thickness of the mycelia stained in the root cells of Korean native orchids. The other isolates collected from the Korean native orchids were considered to be a species of Tulsanella repens (anamorphic: Epulorhiza repens) or its related one. The physiologic or microscopic variations were oftenly observed among them, but the tendency of grouping these in the 18s rDNA sequences were observed to be consistent with those of the localities collected. The further taxonomical segregating for Korean symbiotic fungi was not made because the information concerned were limited in this moment, but was recognized as based on the sequences of 18s DNA.
Orchids live with mycorrhizal fungi in mutualism. This symbiotic relationship plays an essential role in the overall life cycle of orchids from germination, growth, settlement, and reproduction. Among the 1000 species of the orchid, the Korean lady's slipper, Cypripedium japonicum, is known as an endangered species. Currently, only five natural habitats of the Korean lady's slipper remain in South Korea, and the population of Korean lady's slipper in their natural habitat is not increasing. To prevent extinction, this study was designed to understand the fungal community interacting in the rhizosphere of the Korean lady's slipper living in the native and artificial habitats. In-depth analyses were performed to discover the vital mycorrhizal fungi contributing to habitat expansion and cultivation of the endangered orchid species. Our results suggested that Lycoperdon nigrescens contributed most to the increase in natural habitats and Russula violeipes as a characteristic of successful cultivation. And the fungi that helped L. nigrescens and R. violeipes to fit into the rhizosphere community in Korean lady's slipper native place were Paraboeremia selaginellae and Metarhizium anisopliae, respectively. The findings will contribute to restoring and maintaining the endangered orchid population in natural habitats.
This study was to identify the orchid mycorrhizal fungi and to test whether the orchid plants antificially inoculated with this fungus showed better growth them uninoculated plants. Symbioses in the root cells of the native plants of Cymbidium goeringii collected were observed and the digestive forms of peletons were also observed in various native roots. Two types of hyphae, thick $(7{\sim}10\;{\mu}m)$ and thin $(2{\sim}4\;{\mu}m)$ in thickness, were conclusively found to be from various native orchid roots. The symbiotic fungus was isolated by several agars and identified as a Rhizoctonia repens or a R. endophytica var. endophytica. Symbioses on the plantlets of C. karnan and Cymbidium hybrid 'Onomoron' were evaluated as the isolates inoculated on oatmeal agars. The growth of plantlets were measured with the formations of mycorrhizae in the roots. R. repens was shown to be the better isolate than the other in growth stimulation of plantlets on oatmeal agars when grown for two months. The two types of hyphae in the root cells under nature were speculated from the different fungal isolates of Rhizoctonia. Further isolates would be needed for application works for the orchid industries.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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