To isolate a novel gene for antibacterial peptide, an inducible clone(BmInc8) was selected by differential screening strategy from Bombyx mori cDNA library prepared from lavae injected with Escherichia coli. This clone contained a cDNA insert of 564 nucleotides and encoded 59 amino acids with an apparent molecular mass of 6.3 kDa. The cDNA sequence of BmInc8 had 61.2% identity compared to that of the bactericidin from Manduca sexta and also the deduced amino acids sequences from this insert had 65% identity compared to that of the cecropin D peptide Hyalophora cecropia. The transient expression assay of this insert using prokaryotic expression vector system revealed that the expressed peptide displayed the antibacterial activity. The cDNA sequence was deposited in GenBank under the accession number U30289.
Kim, Tae-Ho;Kim, Chang-Hoon;Nam, In-Gil;Hong, Chun-Pyo
Journal of Korea Society of Industrial Information Systems
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v.12
no.1
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pp.28-38
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2007
In this paper, we implement Microsoft COM software modules for elliptic curve cryptographic applications and analyze its performance. The implemented COM software modules support all elliptic curve key exchange protocols and elliptic curve digital signature algorithm in IEEE 1363 finite fields GF(p) and GF(2m). Since the implemented software modules intend to focus on a component-based software development method, and thus it have a higher productivity and take systematic characteristics to be open outward and to be standardized. Accordingly, it enable a software to be developed easier and faster rather than a method using C library. In addition it support the Microsoft COM interface, we can easily implement secure software applications based on elliptic curve cryptographic algorithms.
Park, Myoung-Ryoul;Ryu, Sang-Soo;Yoo, Nam-Hee;Yu, Chang-Yeon;Yun, Song-Joong
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.13
no.5
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pp.270-275
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2005
Superoxide dismutases (SOD) are metalloenzymes that convert $O_2^-\;to\;H_2O_2$. Rehmannia glutinosa is highly tolerant to paraquat-induced oxidative stress. The primary objective of this study was to characterize regulation of SOD gene expression in R. glutinosa in response to oxidative stresses and hormones. A full-length putative SOD clone (RgCu-ZnSOD1) was isolated from the leaf cDNA library of R. glutinosa using an expressed sequence tag clone as a probe. RgCu-ZnSOD1 cDNA is 777 bp in length and contains an open reading frame for a polypeptide consisted of 152 amino acid residues. The deduced amino acid sequence of the clone shows highest sequence similarity to the cytosolic Cu-ZnSODs. The two to three major bands with several minor ones on the Southern blots indicate that RgCu-ZnSOD1 is a member of a small multi-gene family. RgCuZnSOD1 mRNA was constitutively expressed in the leaf, flower and root. The expression of RgCu-ZnSOD1 mRNA was increased about 20% by wounding and paraquat, but decreased over 50% by ethylene and $GA_3$. This result indicates that the RgCu-ZnSOD1 expression is regulated differentially by different stresses and phytohormones at the transcription level. The RgCu-ZnSOD1 sequence and information on its regulation will be useful in investigating the role of SOD in the paraquat tolerance of R. glutinosa.
Mammalian spermatogenesis occurs in a precise and coordinated manner in the seminiferous tubules. One of the attempts to understand the detailed biological process during mammalian spermatogenesis at the molecular level has been to identify the testis specific genes followed by study of the testicular expression pattern of the genes. From the subtracted cDNA library of rat testis prepared using representational difference analysis (RDA) method, a complimentary DNA clone encoding type III member of a DnaJ family protein, DnaJC18, was cloned (GenBank Accession No. DQ158861). The full-length DnaJC18 cDNA has the longest open reading frame of 357 amino acids. Tissue and developmental Northern blot analysis revealed that the DnaJC18 gene was expressed specifically in testis and began to express from postnatal week 4 testis, respectively. In situ hybridization studies showed that DnaJC18 mRNA was expressed only during the maturation stages of late pachytene, round and elongated spermatids of adult rat testis. Western blot analysis with DnaJC18 antibody revealed that 41.2 kDa DnaJC18 protein was detected only in adult testis. Immunohistochemistry study further confirmed that DnaJC18 protein, was expressed in developing germ cells and the result was in concert with the in situ hybridization result. Confocal microscopy with GFP tagged DnaJC18 protein revealed that it was localized in the cytoplasm of cells. Taken together, these results suggested that testis specific DnaJC18, a member of the type III DnaJ protein family, might play a role during germ cell maturation in adult rat testis.
In order to clone the peptide synthetase gene form Lysobacter lactamgenus IFO 14,288, the gene fragments were amplified using primers for the adenylation domain and the thionylation domain of the peptide synthetase genes in other organisms by polymerase chain reaction (PCR). The resulting 0.5-kb fragment was cloned in a pGEM-T vector, and the nucleotide sequences were determined. Six different PCR products were obtained; three were identified to be a part of L-$\alpha$-aminoadipyl-L-cysteinyl-D-valine (ACV) synthetase and three to be other peptide synthetases. Using each of the two different classes of PCR products as mixed probes, a cosmid library of L. lactamgenus chromosomal DNA constructed in a pHC79 vector was screened by an in situ hybridization procedure, and one positive clone was selected which was bound by peptide synthetase gene fragments as well as ACV synthetase gene fragments. The partial sequence analysis formt he obtained pPTS-5 cosmid showed th presence of more than two open reading frames. These were for two putative membrane transporters, which were homologous with several integral membrane proteins including the ABC transporter ATP-binding protein of E. coli (YbjZ) and the metal ion uptake protein of Bacillus subtilis (YvrN). A 45% homology was also found between the two transporter proteins at the carboxy terminus. Through a hydropathy analysis and transmembrane analysis. 4-5 transmembrane domains were found in these two proteins. When the genes were expressed in Escherichia coli, the gene products inhibited the hose cell growth, probably due to the disturbance of the membrane transport system.
Kim, Kyoung-Sook;Kim, Cheorl-Ho;Shin, Deug-Yong;Lee, Young-Choon
BMB Reports
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v.30
no.2
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pp.95-100
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1997
Two kinds of cDNA encoding mouse $Gal{\beta}$1,3(4)GlcNAc ${\alpha}$2,3-sialyltransferase (mST3Gal III) and $Gal{\beta}$1,4(3)GlcNAc ${\alpha}$2,3-sialyltransferase (mST3Gal IV) were isolated from mouse brain cDNA library by means of a PCR-based approach. The cDNA sequences included an open reading frame coding for proteins of 374 and 333 amino acids, respectively, and the primary structure of these enzymes suggested a putative domain structure consisting of four regions, like that in other glycosyltransferases. The deduced amino acid sequences of mST3GaI III and IV showed a 98% and 89% identity with rat ST3GaI III and human ST3Gal IV, respectively. Northern analysis indicated that the expression of mST3Gal III mRNA was abundant in heart, liver and adult brain, while that of mST3GaI IV mRNA was detected in all tissues tested except for testis, but the level was the highest in liver. Soluble forms of mST3GaI III and IV transiently expressed in COS cells exhibited enzyme activity toward acceptor substrates containing the terminal either $Gal{\beta}$1,3GlcNAc or $Gal{\beta}$1,4GlcNAc sequences. The substrate preferences of both enzymes were stronger for tetrasaccharides than for disaccharides.
Due to the advance of e-commerce systems, the number of people using online shopping and products has significantly increased. Therefore, the need for an accurate recommendation system is becoming increasingly more important. Recurrent neural network is a deep-learning algorithm that utilizes sequential information in training. In this paper, an evaluation is performed on the application of recurrent neural networks to recommendation systems. We evaluated three recurrent algorithms (RNN, LSTM and GRU) and three optimal algorithms(Adagrad, RMSProp and Adam) which are commonly used. In the experiments, we used the TensorFlow open source library produced by Google and e-commerce session data from RecSys Challenge 2015. The results using the optimal hyperparameters found in this study are compared with those of RecSys Challenge 2015 participants.
Kim, Hyo-Joon;Lee, Yang-Min;Hwang, Joon-Sung;Won, Ho-Shik;Kim, Bok-Hwan
BMB Reports
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v.32
no.5
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pp.461-467
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1999
Recombinant Mycobacterium smegmatis expressing ovalbumin was used to immunize C57BL/6(H-$2^b$) mice, and the humoral immunity against recombinant ovalbumin was analyzed. Antibodies were purified by denatured ovalbumin-conjugated affinity chromatography. The epitopes of the antibodies were screened with a random peptide library displayed on the tip of fUSE5 filamentous phage pIII minor coat proteins. Two peptides, IRLADR and SPGAEV, were selected predominantly by the recognition of purified antibodies using biopanning methods. The composition of the peptide sequence with the primary structure of OVA revealed that the peptide sequence analogizes to INEAGR, part of the $^{323}ISQAVHAAHAEINEAGR^{339}$ sequence previously reported as the antigenic determinant for murine Band also Th cell epitopes (I-$A^d$ binding). Also, the structures of these mimotopes obtained from restrained molecular dynamic computations resulted in the formation of a $\beta$-turn proven to be a secondary structure of the parent peptide within the ovalbumin molecule, enabling us to confirm the structural similarity. This study demonstrates that immunization with recombinant M. smegmatis can generate neutralizing antibodies identical with those induced by the administration of natural antigenic proteins and supports the potential use of mycobacteria as vaccine delivery vehicles.
Kim, Yong-Hwan;Kim, Chul-Hong;Han, Song-Hee;Kang, Beom-Ryong;Cho, Song-Mi;Lee, Myung-Chul;Kim, Young-Cheol
The Plant Pathology Journal
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v.22
no.4
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pp.323-328
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2006
Serratia marcescens W1, isolated from cucumber-cultivated soil in Suwon, Korea, evidenced profound antifungal activity and produced the extracellular hydrolytic enzymes, chitinase and protease. In order to isolate the antifungal genes from S. marcescens W1, a cosmid genomic library was constructed and expressed in Escherichia coli. Transformants exhibiting chitinase and protease expression were selected, as well as those transformants evidencing antifungal effects against the rice blast fungus, Magnaporthe grisea, and the cucumber leaf spot fungus, Cercospora citrullina. Cosmid clones expressing chitinase or protease exerted no inhibitory effects against the growth of fungal pathogens. However, two cosmid clones evidencing profound antifungal activities were selected for further characterization. An 8.2 kb HindIII fragment from these clones conditioned the expression of antagonistic activity, and harbored seven predicted complete open reading frames(ORFs) and two incomplete ORFs. The deduced amino acid sequences indicated that six ORFs were highly homologous with genes from S. marcescens generating pyrroloquinoline quinone(PQQ). Only subclones harboring the full set of pqq genes were shown to solubilize insoluble phosphate and inhibit fungal pathogen growth. The results of this study indicate that the functional expression of the pqq genes of S. marcescens W1 in E. coli may be involved in antifungal activity, via as-yet unknown mechanisms.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.4
no.1
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pp.43-49
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2002
We have cloned cDNAs encoding toxin from the spider, Araneus ventricosus, and constructed a recombinant baculovirus expressing the insecticidal toxin. The cDNAs encoding toxin were cloned from the cDNA library of A. ventricosus. Sequence analysis of the cDNAs encoding the toxin of A. ventricosus revealed that the 240 bp cDNA for AvTox-1 and 192 bp cDNA for AvTox-2 have an open reading frame of 80 and 64 amino acid residues, respectively. The deduced protein sequence of the toxin genes of AvTox-1 and AvTox-2 was aligned to that of the snack Anemonia sulcata and scorpion Centruroides limpidus limpidus, respectively. Northern blot analysis indicated that AvTox-2 toxin gene showed a fat body-spe-cific expression pattern at the transcriptional level. Furthermore, we have explored the possibility of improving baculovirus by incorporating the A. vontricosus toxin gene into Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus genome under the control of polyhedrin promoter, The AvTox-2 toxin gene was expressed as approximately 5.8 kDa band in the recombinant baculovirus-injected silkworm larvae. Bioassays with the recombinant virus expressing AvTox-2 on 5th instar silkworm larvae demonstrated a decrease in the time to kill $(LT_{50} days)$ compared to wild-type BmNPV-Kl $(LT_{50} 6.72 days)$ in the injection of 10 viruses. These results indicate that A. ventricosus toxin is a novel member of the spider toxin family, suggesting that the toxin gene can be used in recombinant baculoviruses to reduce insect feeding damage and increase the speed of insect kill.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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