This study was carried out to develop a newly designed ovum pick-up(OPU) instrument for ultrasound-guided transvaginal follicular aspiration in cows. This new instrument consists of out- & inner-layer stainless pipes and a grip with a trigger(hand) switch. Some gauge types of disposable needles and tubes can be attached to this inner pipe. With this instrument, while grasping an ovary with one hand, the other hand can handle in apiration and vacuum on/off with the least assitant's help. With this instrument the mean recovery rate of bovine follicular oocytes was 45.2%. In recovered oocytes, usable oocytes(Grade I & II) were 30.4% and this rate meant 1.4 oocytes per ovary. For 30 days after initial aspiration with this instrument, some adverse effects such as adhesion, hemorrhage, hematoma and other mass formation in/with ovaries were also examined by rectal examination, ultrasonographic and endoscopic images. Adhesion was found in one ovary 1 week after aspiration, and hemorrhagic lesion was found 1-2 days and petechia were found 3-5 days after aspiration and there was no remarkable adverse effects. It was found that this instrument could be applicable and safe for ovum pick-up in cows.
To improve the efficiency of in vitro production of embryos with follicular oocytes in pig, the recovery rates, in vitro fertilization and development. The results obtained were as fellows: The number of oocytes recovered 37 ovary was 1,365 by aspiration, 1,884 by slicing and 3,830 aspiration post slicing, per ovary was averaged 103.5 aspiration post slicing than 30.7 by aspiration and 50.8 by slicing (P<0.05). The percentage of grade I and II oocytes recovered was 0.05∼0.2% and 1.7∼2.3% respectively(p<0.05). The fertilization rates of ejaculate and epididymis sperm was 83.0 and 83.1%. And cleavaged rate was 60.8 and 69.0% respectively(P<0.05). However, there were no significant differences between sperm sources. The clevage rates of fertilized oocyte was significantly(P<0.05) higher as B.O(92.8%) than TALP (90.1%) or mTBM (80.1%). And in vitro developed to blastocyst rates of mTBM media used for fertilization was significantly (P<0.05) higher as 12.4%, compared with the results using the media of TALP(1.6%) or B.O (0.0%). The embryos developed 2-cell stage after in vitro fertilization were co-cultured with or without POEC and BOEC in NCSU-23 and TCM-199 media. In vitro developed to blastocyst rates was NCSU-23 with POEC(2.3%) or BOEC(1.2%), but in vitro cultured in TCM-199 medium with POEC or BOEC was not developed to blastocyst. The percentage of embryos that developed to morula stage in 0, 50, 100, 200 and 250uM was 16.6, 22.0, 13.5, 19.0 and 22.0%, respectively.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Oocyte lipid droplets play a crucial role in meiosis and embryo development. Biotin is associated with fatty acid synthesis and is the coenzyme for acetyl-CoA carboxylase (ACC). The effects of a biotin deficiency on the oocyte lipid metabolism remain unknown. This study examined the effects of a biotin deficiency and its replenishment on murine 1) oocyte lipid droplet levels, 2) ovary lipid metabolism, and 3) oocyte meiosis. MATERIALS/METHODS: Mice were divided into 3 groups: control, biotin deficient (BD), and recovery groups. The control and BD groups were fed a control diet or BD diet (0.004 or 0 g biotin/kg), respectively. The recovery group mice were fed a BD diet until day 21, and were then fed the control diet from days 22 to 64. This study then quantified the oocyte lipid droplet levels, assessed the oocyte mitochondrial function, and examined the ability of oocytes to undergo meiosis. Ovarian phosphorylated ACC (p-ACC), lipogenesis, β-oxidation, and ATP production-related genes were evaluated. RESULTS: The BD group showed a decrease in lipid droplets and mitochondrial membrane potential and increased p-ACC levels. In the recovery group, the hepatic biotin concentration, ovarian p-ACC levels, and mitochondrial membrane potential were restored to the control group levels. On the other hand, the quantity of lipid droplets in the recovery group was not restored to the control levels. Furthermore, the percentage of oocytes with meiotic abnormalities was higher in the recovery group than in the control group. CONCLUSIONS: A biotin deficiency reduced the oocyte lipid droplet levels by downregulating lipogenesis. The decreased lipid droplets and increased oocyte meiosis failure were not fully restored, even though the biotin nutrition status and gene expression of lipid metabolism was resumed. These results suggest that a biotin deficiency remains robust and can be long-lasting. Biotin might play a crucial role in maintaining the oocyte quality.
Kim, Seong-Su;Choi, Byung Hyun;Jo, Hyun-Tae;Jin, Jong-In;Ha, A-Na;Min, Chan-Sik;Cho, Gyu-Wan;Kong, Il-Keun
Journal of Embryo Transfer
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v.29
no.3
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pp.265-271
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2014
Implementation of smart embryo technologies in cattle e.g. ovum pick-up followed by in vitro embryo production (OPU-IVP). Seasonal variation is important factor for follicular growth, oocytes quality, quantity and developmental competence. Therefore the aim of present study was carried out to investigated whether the seasons (hot and cool) effect on follicular development, oocyte recovery and subsequent embryo development. Follicular oocytes were aspirated from Korean native cows (Hanwoo) by the ovum pick-up (OPU) method, which was performed 24 times during two different seasons, the hot (July to September) and cool (October to December), from OPU donors. The recovered oocytes were classified according to morphological categories and used for in vitro embryo production (IVEP). The mean number of total follicles was significantly higher (p<0.05) during the hot season ($18.32{\pm}2.26$) compared to cool season ($15.41{\pm}3.34$). Furthermore, seasons did not significantly effect on the number of oocytes recovered (hot season: 41.16% vs. cool season: 46.14%). However, the average number of Grade A oocytes was significantly greater during hot ($1.75{\pm}1.86$) season compared to the cool season ($1.00{\pm}1.46$), but there was no significant difference of other grades oocytes. The cleavage rate (hot: 66.67% vs. cool: 63.3%) and embryo development (hot: 58.95% vs. cool: 56.97%) did not differ significantly between the seasons. In conclusion, the results of present study suggest that the season (hot and cool) does not have effects on the oocyte recovery and embryo developmental competence of in vitro cultured embryos.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2005.07a
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pp.52-52
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2005
Oogenesis, the gonadosomatic index (GSI), reproductive cycle and first sexual maturation of the female Neptunea (Barbitonia) arthritica cumingii have been investigated by light and electron microscope observations. In the early vitellogenic oocyte, the Golgi complex and mitochondria were involved in the formation of glycogen, lipid droplets and yolk granules. In late vitellogenic oocytes, the rough endoplasmic reticulum and multivesicular bodies were involved in the formation of proteid yolk granules in the cytoplasm. In particular, compared with the results of other gastropods, it is a different result that appearances of cortical granules at the cortical layer and microvilli on the vitelline envelope, which is associated with heterosynthetic vitellogenesis, were not observed in vitellogenic oocytes during oogenesis. A mature yolk granule was composed of three components: main body (central core), superficial layer, and the limiting menbrane, Monthly changes in the gonadosomatic index in females were studied in 2002 and 2003 were closely associated with ovarian developmental phases. Spawning occurred between May and August in 2002 and 2003 and the main spawning occurred between June and July when the seawater temperature rose to approximately 18${\sim}$23${\circ}$C. The female reproductive cycle can be classified into five successive stages: early activestage (Septmber to October), late active stage ( November to February), ripe stage (February to June), partially spawned stage (May to Aygust), and recovery stage (June to August).
Animal in dustry in Korea urgently needs the domestic introduction and the industrial a, pp.ication of embryo transfer technique. Namely, this technique can be utilized effectively, as means of the improvement of livestocks, as means of the increase of meat production, as means of substitute for the livestock import, and dissemination of new breed. However, as this technique avaliable in our country is remaining initial stage, we can not make use of the technique industrially unless we make much improvement as follows; induction of superovulation, non-surgical recovery of embryos, synchronization between the estrus such cycles of donor and recipient, non-surgical transfer of embryos, etc. Simultaneously, the basic studies such as harvesting oocytes from ovary, in vitro culture of oocytes, in vitro capacitation of spermatozoa, cloning by culture of blastomeres and transfer of nuclei, sexing embryo, etc. should not be neglected in order to make the technique of embryo transfer more simple and convenient. For the success of these studies, universities, national and public institutes, large scale cattle farms, and small scale cattle farms should cooperate each other. For instance, universities undertake basic researches, and the national and public institutes a, pp.y the results of the researches to animal industry along with cooperation by large scale cattle farms. By the help of the cooperative organizations, the technique relevant to our environment and farm condition may be able to be finalized, and to be a, pp.ied to samll scale cattle farm. Consequently, being served to stimulate animal productivity, this technique can be contributed to the development of livestock industry in Korea.
Chang, Eun Mi;Song, Hang Seok;Lee, Dong Ryul;Lee, Woo Sik;Yoon, Tae Ki
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.41
no.2
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pp.41-46
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2014
IVM refers to the maturation of immature oocytes in culture after their recovery from small antral follicles at the stage prior to selection and dominance. IVM requires little or no FSH in vivo and has been proposed as an alternative to conventional IVF, since it reduces the primary adverse effects caused by controlled ovarian stimulation, including the ovarian hyperstimulation syndrome. Moreover, IVM is a promising option for cases for which no standard protocol is suitable, such as FSH resistance, contraindications for ovarian stimulatory drugs, and the need for urgent fertility preservation. Recently, IVM has been used in women with regular cycles and normal ovaries. However, the pregnancy rate following IVM is suboptimal compared with that of conventional IVF, indicating that further studies to optimize the protocol and the culture conditions are warranted.
LEE Jung Sick;KIM Sung Yeon;MA Kyung Hwa;HUH Sung Hoi
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.33
no.6
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pp.554-558
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2000
Reproductive biology of the female red tongue sole, Cynoglossus joyneri was investigated by means of histological methods. Gonadosomatic index (GSI) was the highest in June. Developmental pattern of oocytes was group-synchronous. Egg stalk and yolk nucleus were observed in the early growing oocytes. Reproductive cycle could be classified into the growing ($February{\~}May$), maturation ($May{\~}June$), ripe and spent ($June{\~}August$), and recovery and resting ($August{\~}February$). The absolute fecundity per individual ($TL 28.1{\~}30.8 cm$) was 2,197 and relative fecundity per g body weight was 18.0.
Park, Gab-Man;Kim, Yeon-Ho;Kim, Eun-Jong;Choi, Ki-Ho
The Korean Journal of Malacology
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v.22
no.1
s.35
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pp.1-11
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2006
The gonadosomatic index (GSI), oogenesis and reproductive cycle in female Neptunea (Barbitonia) afhritica cumingii were investigated by light and electron microscope observations. In the early vitellogenic oocyte, the Golgi complex and mitochondria were involved in the formation of glycogen, lipid droplets and yolk granules. Late in the vitellogenic oocytes, the rough endoplasmic reticulum and multivesicular bodies were involved in the formation of proteid yolk granules in cytoplasm. In particular, compared with the results of other gastropods, it showed a different result that appearances of cortical granules at the cortical layer and microvilli on the vitelline envelope, which is associated with heterosynthetic vitellogenesis, were not observed in vitellogenic oocytes during oogenesis. A mature yolk granule was composed of three components: main body (central core), superficial layer, and the limiting membrane. Monthly changes in the gonadosomatic index in females studied in 2004 and 2005 were closely associated with ovarian developmental phases. Spawning occurred between May and August in 2004 and 2005 and the main spawning occurred between June and July when the seawater temperature rose to approximately $18-23^{\circ}C$. The female reproductive cycle can be classified into five successive stages: early active stage (September to October), late active stage (November to February), ripe stage (February to June), partially spawned stage (May to August), and recovery stage (June to August).
Ninety-one patients with irreparable tubal disease underwent in Vitro Fertilization-Embryo Transfer (IVF-ET) in Seoul National University Hospital. Ovulation was stimulated in 104 cycles by human menopausal gonadotropin (HMG) or follicular stimulating hormone (FSH)/human chorionic gonadotropin (HCG). The patients were classified as high (>900 pg/ml), intermediate (400-900 pg/ml), or low (<400pg/ml) responder according to preovulatory $E_2$ response and four $E_2$ patterns were found. The overall pregnancy rate per cycle in this consecutive series was 11.5% (n=12). The number of preovulatory oocytes per cycle was higher significantly in intermediate and high responder group than in low responder group (P<0.01), While the number of immature oocytes per cycle significantly higher in low responder group than high and intermediate responder group (P<0.01). The pregnancy rate in each responder group was not signigicant. According to the $E_2$ pattern of response, there was no significant difference in number of the immature and preovulatory oocytes recovery per cycle. There was a apparently direct relationship between the preovulatory $E_2$ pattern and pre gnancy rate was noted.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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