This study was carried out for the purpose of developing environmental friendly and effective chemical treatment method for the disease control in the land-based flounder culture which is industrially popular in the coastal area in Korean. The chemicals such as flounder, Paralichthys olivaceus and their effects on the fish based on the 24hr-$LC_{50}$, $LT_{50}$, 24-hour survival rate at each experimental concentration, recovery rate of the survived individual from chemical treatment, and the histological change of the gill after chemical treatment were investigated and analyzed. The 24hr-$LC_{50}$ was 321.65 ppm for formalin, 419.62 ppm for chlorine dioxide, and 395.97 ppm for hydrogen peroxide, respectively. The $LT_{50}$ was 15-hour for formalin, 17-hour for chlorine dioxide and 24-hour for hydrogen peroxide, respectively. Fishes exposed to the experimental concentration of three chemicals were quickly susceptible in the order of formalin, chlorine dioxide and hydrogen peroxide with a trend of shorter half lethal time at higher concentration. Initial survival rate of the flounder soon after chemical treatment was the highest in the hydrogen peroxide treatment compared with the other two chemicals. The histological damage by the hydrogen peroxide treatment was negligible compared with the other two chemicals. Accordingly, hydrogen peroxide treatment showed the lowest toxicity compared with the other two chemicals to the experimental fishes.
Enrofloxacin (ENRO) is one of the most commonly used fluoroquinolones for treating bacterial disease in olive flounder (Paralichthys olivaceus) farming, but its withdrawal time for industrial-scale farming has not been well established. Withdrawal times of ENRO following oral administration were evaluated in olive flounder under field conditions. Fish were held in an inland fish tank and fed a commercial mediated diet containing 5 mg/kg of ENRO for 9 days. Seven fish per sampling point were examined during and after treatment. ENRO and its major metabolite, ciprofloxacin (CIP), were analyzed using high-performance liquid chromatography with a fluorescence detector. The concentration of ENRO and CIP in muscle increased during the medication period, and then decreased rapidly The sum of ENRO and CIP concentration in olive flounder peaked on day 6, with a maximal concentration in muscle of 4.30 mg/kg. ENRO residues were eliminated rapidly; at 10 days post treatment, the level in muscle was 0.10 mg/kg, but it took about 50 days to be reduced to below 0.1 mg/kg. After 60 days, the residual concentration was below 0.1 mg/kg in all samples. The level of ENRO accumulation at the beginning of oral administration was variable, according to the farming conditions, but the overall exhaustion time was almost the same. We concluded that an adequate withdrawal period of enrofloxacin is 60 days in the case of oral administration.
해양에서 이산화탄소 증가에 따른 해양산성화가 넙치치어의 성장에 미치는 영향을 조사하기 위하여 현장 메조코즘 실험을 실시하였다. 동해 남부에 위치한 기장군 장안읍의 사질저질에서 실험군(이산화탄소 주입)과 대조군의 실험장비를 설치하여 43일 동안 총 447개체 (실험군 223개체, 대조군 224개체)를 대상으로 실시하였다. 실험군의 pH는 평균 $7.63{\pm}0.13$, 이산화탄소 ($fCO_2$)농도는 평균 $1660{\pm}540$${\mu}atm$로 2100년도에 예상되는 수준으로(IPCC 2007) 유지하였으며, 대조구는 현재 기장군 장안읍 해역의 해양환경으로 유지하였다. 실험기간동안 사망률은 실험군과 대조군 사이에서 큰 차이를 나타내지 않았고 시간이 지남에 따라 감소하는 경향을 나타내었다. 넙치치어의 체장과 체중은 대조군에서 더 큰 증가양상을 나타내어, 그 결과 대조군에서 더 큰 성장률(specific growth rate)을 보였다. 결론적으로 본 연구는 해양에서 이산화탄소 농도의 증가는 넙치 치어의 초기 성장에 영향을 줄 수 있는 가능성을 제시하였다.
식물성 생약재의 항균력과 활성산소(superoxide anion, $O_2^-$)의 생산에 미치는 in vitro 효과를 조사하여 금후 in vivo 실험에 적용할 때, 어류 체내 자연 저항성 증진을 꾀할 수 있는 식물성 생약재를 발굴하기 위한 기초자료를 얻고자 하였다. 식물성 생약재는 고삼, 귀전우, 구절초, 박하, 방풍, 연교, 약쑥, 지유, 삼백초, 삼지구엽초, 상백피, 소회향, 편축, 팔각 등 14종류로 이들을 열수추출하여 실험에 사용하였다. 항균력 시험에는 어병세균 Listonella anguillarum(Vibrio anguillarum), Vibrio sp., Vibrio alginolyticus, Edwardsiella tarda, Streptococcus sp., Lactcoccus garvieae를 대상으로 disk법을 사용하였으며, 활성산소의 생산능은 넙치 신장 대식세포를 이용한 nitroblue tetrazolium(NBT) 반응으로써 조사하였다. 그 결과,약쑥이 다른 생약재에 비하여 시험에 사용된 어병 세균에 대한 항균활성이 월등히 뛰어났으며, 또한 넙치 대식세포의 활성산소 생산능을 크게 자극하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
진주담치와 넙치를 치사농도 이하의 납과 카드뮴을 첨가한 배양수조에 2주간 노출시킨 후 해당 중금속의 생물농축을 조사하였다. 노출 후 생물체내 중금속 농도는 배양액의 중금속 농도에 비례하여 증가하였으며, 진주담치에서 그 경향이 뚜렷하였다. 체내에 농축되어진 중금속 농도는 모두 고농도의 배양액에 노출시킨 시료에서 최대치를 기록하였으며, 납 5.0 mg/L 배양액에서 넙치 및 담치의 납 최대농도는 각각 $170({\pm}10)\;{\mu}g/g$, $5,260({\pm}70)\;{\mu}g/g$, 카드뮴 1.0 mg/L 배양액에서 넙치 및 담치의 카드뮴 최대농도는 각각 $72({\pm}4)\;{\mu}g/g$, $1,040({\pm}40)\;{\mu}g/g$으로 두 금속의 생물축적이 배양액 농도와 직접 관련이 있음을 나타냈다. 납과 카드뮴의 생물농축비(배양액 노출농도에 대한 분석시료의 농도비)는 두 중금속 모두 배양액의 농도에 반비례하여 낮은 노출농도에서 최대치를 보였고, 특히 진주담치에서 납의 생물농축비는 배양액 농도 0.01 mg/L에서 무려 12,100(${\pm}1,400$)을 보여주었다. 이러한 사실은 두 실험생물이 중금속 농도가 낮은 용액에 노출되었을 때 더 빨리 중금속을 섭취한다는 사실을 뒷받침한다. 한편, 진주담치의 중금속 축적을 기관별로 비교, 분석한 결과 납은 내장낭보다 아가미에서 다소 높은 반면 카드뮴은 내장낭에서 더 높은 농축특성을 보였다.
Estradiol-$17{\beta}(E_2)$와 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2, 4- D)가 난황 전구물질의 합성에 미치는 영향을 넙치 Paralichthys olivaceus 간세포의 초대 배양을 통하여 조사하였다. 배양간세포의 생존율은 배양온도 $27^{\circ}C$에 서 가장 높게 나타났으며, $15^{\circ}C$에서는 생존율이 급격히 감소하여 약 50%의 생존율을 나타내었다. $E_2$에 의한 VTG 의 합성은 $10^{-6}M$에서 최대치를 나타내었다. 2, 4-D $10^{-7}\sim10^{-5}M$의 첨가에 의해 VTG의 합성은 이루어지지 않았다. 그러나, 저농도인 $10^{-8}M$에서는 VTG의 합성이 증가하였다. $E_2$ 및 2, 4-D에 의해 합성된 VTG는 $10^{-6}M$ tamoxifen의 첨가에 의해 유의하게 억제되었다 (P<0.01). 본 연구 결과에서 $E_2$와 2, 4-D의 동시 첨가는 VTG의 합성을 억제하지 않았다. 이러한 결과는 2, 4-D의 작용이 $E_2$와 유사한 작용을 가지지만, VTG의 합성에 있어서 $E_2$ 수용체에의 작용 양식은 서로 다른 것으로 추정된다.
Ciprofloxacin is the most commonly used fluoroquinolones for treating bacterial disease in olive flounder (Paralichthys olivaceus) farming, but its withdrawal time for industrial-scale farming has not been established. The depletion of ciprofloxacin was investigated in the olive flounder under field conditions. Fish were kept in an inland fish farm and fed a commercial diet containing 5 mg/kg of ciprofloxacin for 13 days. Seven fishes per sampling time were examined during and after the treatment. Ciprofloxacin and its major metabolite, enrofloxacin, were analyzed using HPLC with a fluorescence detector. The concentrations of ciprofloxacin and enrofloxacin in muscle increased during the medication period, and then decreased rapidly. The ciprofloxacin and enrofloxacin concentration in the olive flounder peaked on days 11 and 13, respectively, with maximum concentrations in muscle of 0.58 and 0.73 mg/kg. Residual ciprofloxacin and enrofloxacin were eliminated rapidly; 6 days after treatment, the respective levels in muscle were 0.04 and 0.10 mg/kg and neither was detected 15 days post treatment. The level of ciprofloxacin accumulation at the beginning of oral administration was variable according to the farming conditions, but the overall exhaustion time was similar. In conclusion, an adequate withdrawal period for enrofloxacin is 15 days in the case of oral ciprofloxacin administration.
Residues of ampicillin and amoxicillin in the muscles of olive flounder Paralichthys olivaceus were investigated after oral doses of 20 mg/kg body weight/day of ampicillin and 40 mg/kg body weight/day of amoxicillin in a first examination and 40 mg/kg body weight/day of ampicillin and 80 mg/kg body weight/day of amoxicillin in a second examination for 5-6 days. The ranges of seawater temperatures in the $1^{st}$ and $2^{nd}$ examinations were $13.4-15.6^{\circ}C$ and $16.8-21.4^{\circ}C$, respectively. Ampicillin and amoxicillin concentrations were analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC). The average recovery rates of ampicillin and amoxicillin in fish samples ranged from 84.8-95.2% and 100.8-103.8%, respectively. Residual concentrations in the olive flounder peaked on the $5^{th}$ day, with average concentrations of 0.075 mg/kg and 0.311 mg/kg in the $1^{st}$ examination, and 0.098 mg/kg and 0.630 mg/kg in the $2^{nd}$ examination for ampicillin and amoxicillin, respectively, with maximum concentrations in muscle. In the $1^{st}$ examination, ampicillin concentrations in olive flounder after withdrawals of 1 and 3 days were 0.041 mg/kg and 0.023 mg/kg, respectively, and amoxicillin concentrations after withdrawals of 1 day and 10 days were 0.172 mg/kg and 0.023 mg/kg, respectively. In the $2^{nd}$ examination, the ampicillin concentrations in olive flounder after withdrawals of 1 and 3 days were 0.041 mg/kg and 0.023 mg/kg, respectively, and amoxicillin concentration after withdrawals of 1 day and 10 days were 0.172 mg/kg and 0.023 mg/kg, respectively. We suggest that the recommended withdrawal periods should be 3 days for ampicillin and 10 days for amoxicillin in the olive flounder.
넙치, Paralichthys olivaceus 수정란의 부화율을 이용하여 중금속(Pb, Cr, As)의 독성 영향을 조사하였다. Pb, Cr, 및 As (0, 10, 100, 500, 1,000, 2,500, 5,000 ppb)에 수정란을 48 h 노출시킨 후, 정상 부화율을 백분율로 나타내었다. 중금속을 포함하지 않는 대조구에서는 정상 부화율이 80% 이상을 나타냈으나, 중금속 농도가 증가할수록 정상 부화율은 급격히 감소하였다. 정상 부화율은 Pb, Cr, 및 As에 대해 농도 의존적으로 감소하였으며, 각각 100, 100, 500 ppb 이상의 농도에서 유의한 차이를 나타내었다. P. olivaceus의 정상 부화율에 대한 Pb, Cr 및 As의 반수 영향농도($EC_{50}$)를 이용한 독성은 Cr>As>Pb 순으로 나타났다. Pb와 As의 NOEC와 LOEC 각각 100 ppb와 500 ppb로 유사한 값을 나타냈으며, Cr에 대한 NOEC는 10 ppb, LOEC는 100 ppb를 나타내었다. 이들 결과로부터 자연생태계 내에서 Pb과 As의 농도는 100 ppb, Cr 농도는 10 ppb를 초과할 경우 P. olivaceus 수정란의 정상 부화율은 독성 영향이 나타날 것으로 판단된다. 본 연구 결과를 바탕으로, P. olivaceus의 정상 부화율을 이용한 생물학적 평가방법은 중금속과 같은 유해물질에 대한 해양생태계의 영향을 판단하기 위한 시험방법으로 유용하게 이용될 수 있을 것으로 판단된다.
넙치(Paralichthys olivaceus) 수정란의 부화율에 대한 중금속(Cd, Cu, Zn)의 급성독성을 조사하였다. Cd, Cu 및 Zn (0, 10, 100, 500, 1000, 2500, 5000 ppb)에 수정란을 48 h 노출시킨 후, 정상 부화율을 백분율로 나타내었다. Cd, Cu 및 Zn을 포함하지 않는 대조구에서는 정상 부화율이 80% 이상을 나타냈으나, 중금속 농도가 증가할수록 정상 부화율은 급격히 감소하였다. 정상 부화율은 Cd, Cu 및 Zn에 대해 농도 의존적으로 감소하였으며, 각각 1000, 100, 100 ppb 이상의 농도에서 유의적이 차이를 나타내었다. P. olivaceus의 정상 부화율에 대한 Cd, Cu 및 Zn의 반수영향농도($EC_{50}$)를 이용한 독성은 Zn>Cu>Cd 순으로 강한 것으로 나타났으며, 이들 중금속에 대한 $EC_{50}$는 각각 584, 1015, 1282 ppb를 나타내었다. Cd에 대한 NOEC는 500 ppb를 나타냈고 LOEC는 500 ppb를 나타내었다. Cu와 Zn의 NOEC와 LOEC 각각 100 ppb와 500 ppb로 유사한 값을 나타내었다. NOEC와 LOEC 결과로부터 자연생태계 내에서 Cu와 Zn 농도는 100 ppb, Cd 농도는 500 ppb를 초과할 경우 P. olivaceus 수정란의 정상 부화율은 감소할 것으로 판단된다. 본 연구결과를 바탕으로, P. olivaceus의 정상 부화율을 이용한 생물학적 시험은 중금속과 같은 유해물질에 대한 해양생태계의 영향을 판단하기 위한 시험방법으로 유용하게 이용될 수 있을 것으로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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