Many isolates from different forest soil layers did not show appreciable growth on full strength of the conventional nutrient broth (NB medium) but grow on its 100-fold dilution (DNB medium). These isolates were divided into four types according to organic nutrient concentration in the growth medium from $1^{-1}\;to\;10^{-4}$dilution of normal NB medium. Oligotrophic bacteria were type II and type IV which grew in $10^{-4}$ dilution of NB (1 mg C/l) medium. Sixty strains were isolated for obligate oligotrophic bacteria. Chemotaxonomic and phylogenetic characteristics of eleven isolates of acetylene-reducing (nitrogen-fixing) oligotrophic bacteria from forest soil were investigated. They showed similar characteristics: the cellular fatty acid mainly consisted of straight-chain unsaturated $C_{18:1}$ (60-84% of total fatty acids). Ubiquinone Q-10 and a high guanine plus-cytosine content(61-64 mol%) were found. Eleven isolates of nitrogen-fixing oligotrophic bacteria were found to be closely related by full 16S rDNA sequence simility and many common taxonomic traits. Analysis of full 16S rDNA sequences of eleven isolates indicated that they were more closely related to Bradyrhizobium (similarity values: 98.1-98.8%), Agromonas, Nitrobacter, and Afipia.
Bacteria isolated from ultrapure water made by a high-purity water manufacturing system in a semiconductor manufacturing plant were classified into two groups which either grew in diluted nutrient broth medium (oligotrophic bacteria) or could not grow (copiotrophic bacteria). The nutritional flexibility of oligotrophic and copiotrophic bacteria was investigated. The oligotrophic bacteria were shown to be able to utilize a significantly broader range of organic substrates than the copiotrophic bateria. This finding substantiates the hypothesis that nutritional flexibility is adaptive for oligotrophic bacteria.
In order to investigate the ecological aspect of bacteria on groundwater, water samples were collected from various regions. Total of 318 strains were isolated from diluted nutrient broth (DNB) agar medium, and investigated their growth pattern on nutrient broth (NB) medium. As a result, all the isolated strains were divided into two groups, NB and DNB organisms. Growth of DNB organisms were suppressed in full strength NB medium but not in DNB medium, which were called oligotrophic bacteria in this study. Proportion of DNB organisms occurred in the frequency of 50-98% in potable groundwaters (CW, CJ, DPG, CJG1), however, it was 23,46% in polluted site (TJ, NPG1). One hundred and two strains were identified as oligotrophic bacteria and their phylogenetic characteristics were determined by using 16S rDNA sequencing. Based on the phylogenetic analysis, they were found to fall into three major phylogenetic groups: belonging to the Proteobacteria $\alpha$-(49 strains), $\beta$-(50 strains), $\gamma$ -(3 strains) subdivisions. The phylogenetic analysis suggested that microbial diversity of potable groundwater is more complex than that obtained in the past investigation.
Ahn, Youngbeom;Lee, Un Jung;Lee, Yong-Jin;LiPuma, John J.;Hussong, David;Marasa, Bernard;Cerniglia, Carl E.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.29
no.10
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pp.1495-1505
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2019
The Burkholderia cepacia complex (BCC) is capable of remaining viable in low-nutrient environments and harsh conditions, posing a contamination risk in non-sterile pharmaceutical products as well as a challenge for detection. To develop optimal recovery methods to detect BCC, three oligotrophic media were evaluated and compared with nutrient media for the recovery of BCC from autoclaved distilled water or antiseptic solutions. Serial dilutions ($10^{-1}$ to $10^{-12}CFU/ml$) of 20 BCC strains were inoculated into autoclaved distilled water and stored at $6^{\circ}C$, $23^{\circ}C$ and $42^{\circ}C$ for 42 days. Six suspensions of Burkholderia cenocepacia were used to inoculate aqueous solutions containing $5{\mu}g/ml$ and $50{\mu}g/ml$ chlorhexidine gluconate (CHX) and $10{\mu}g/ml$ benzalkonium chloride (BZK), and stored at $23^{\circ}C$ for a further 199 days. Nutrient media such as Tryptic Soy Agar (TSA) or Tryptic Soy Broth (TSB), oligotrophic media (1/10 strength TSA or TSB, Reasoner's $2^{nd}$ Agar [R2A] or Reasoner's $2^{nd}$ Broth [R2AB], and 1/3 strength R2A or R2AB) were compared by inoculating these media with BCC from autoclaved distilled water and from antiseptic samples. The recovery of BCC in water or antiseptics was higher in culture broth than on solid media. Oligotrophic medium showed a higher recovery efficiency than TSA or TSB for the detection of 20 BCC samples. Results from multiple comparisons allowed us to directly identify significant differences between TSA or TSB and oligotrophic media. An oligotrophic medium pre-enrichment resuscitation step is offered for the United States Pharmacopeia (USP) proposed compendial test method for BCC detection.
From 5 forest soil samples, the isolation frequency of oligotrophic Actinomycetes was investigated with nutrient and minimal media. The frequency of soil Actinomycetes by the minimal media. The frequency of soil Actinomycetes by the minimal media of DHV, WA, BA and NA was similar to the value by HV nutrient medium. In addition, different Actinomycetes were isolated from all the media used in this experiment and then their growth were tested on nutrient (Bennett's agar) and minimal media(WA). In consequent, the number of different Actinomycetes from minimal media was 26.1 strains, whereas the number of from nutrient medium (HV) was 26.6 strains. Furthermore, the percentage of facultative and obligate strains among the oligotrophic Actinomycetes was 90% and 10%, respectively.
Kim Soo-Jin;Kim Min-Young;Koo Bon-Sung;Yoon San-Hong;Yeo Yun-Soo;Park In-Cheol;Kim Yoon-Ji;Lee Jong-Wha;Whang Kyung-Sook
Korean Journal of Microbiology
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v.41
no.4
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pp.293-299
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2005
Many isolates from soil of Korean ginseng rhizosphere did not show remarkable growth on full strength of the conventional nutrient broth (NB medium) but grew on its 100-fold dilution (DNB medium). Six hundred-forty strains were isolated as oligotrophic bacteria. In the course of screening for new bioactive compounds from oligotrophic bacteria from soil, 8 strains which had appeared to form of clear zone on a medium containing colloidal chitin as a sole carbon source were selected for further studies. Strain CR42 hydrolyzed a fluorogenic analogue of chitin, 4-methylumbelliferyl-D-glucosaminide (MUF-NAG) . Mo st of the culture supernatant of these isolates hydrolyzed 4-methylumbelliferyl-D-N,N'-diacetylchitobioside (MUF-diNAG). The isolates were heterogeneous and categorized to gamma- and beta-proteobacteria, Bacillaceae, Actinobactepia, and Bacteroides by 16S rRNA analysis. Two strains, WR164 and CR18, had a 16S rRNA sequence of $95-96\%$ identical to uncultured bacteria. It was observed that CR2 and CR75 could inhibit the growth of Colletotrichum gloeosporioides with hyphal extention-inhibition assay on PDA plate supplemented with $1\%$ colloidal chitin.
A phylogenetic analysis of bacterial populations inhabiting soil derived from serpentine was conducted. The samples were collected from adjacent metamorphic rocks and serpentinite soil at Kwangcheon. The pH of the serpentine areas ranged from 8.5 to 9.2. The number of bacteria on the DAL medium which was diluted with $10^{-2}$ of AL medium was 10~100 fold higher than that from the full strength of AL medium, and which indicates that oligotrophs are distributed in the serpentinite soil. Of a total of 76 isolates, 42 isolates were oligotrophic bacteria, which grew only on the DAL medium. Based on a phylogenetic analysis using 16S rDNA sequences, these isolates are found to fall within five major phylogenetic groups: proteobacteria $\alpha$-subdivision (3 strains), $\alpha$-subdivision (7 strains), $\gamma$-subdivision (2 trains); high G+C gram-positive bacteria (19 strains); low G+C grampositive bacteria (14 strains). Bacteria of the genus Streptomyces (high G+C division) and Bacillus (low G+C division) have been considered to form a numerically important fraction of serpentinite soil. Oligotrophic strains categorized as Afipia ($\alpha$-subdivision), Ralstonia, Variovorax ($\beta$-subdivision), Pseudomonas ($\gamma$ -subdivision), Arthrobacter (high G+C division), and Streptomyces (low G+C division).
The direct viable count (DVC) and plate count (PC) methods was used to measure the number of bacteria in potable groundwater samples collected from bottled water from the market, mineral water, and edible groundwater near the urban areas and the stock farming congested areas. As a result, the number of living bacteria by DVC was comprised 30~80% of the total direct count (TDC), whereas the number of living bacteria by PC was around l~30% of DVC. Such results show that viable but non-culturable (VBNC) bacteria exist in the potable groundwater with high percentages. On the other hand, upon measuring the value from the conventional nutrient broth (NB), $10^-2$ fold diluted nutrient broth (DNB), and R2A broth, the values from the DNB and R2A showed 2~50 times higher than the conventional NB medium. These results indicate that oligotrophic bacterial groups which can multiply in the low nutrient broth abundantly exist in the oligotrophic environment like potable groundwater.
Oligotrophic bacteria studied in the present report were isolated on a 100-fold dilution of the nutrient broth(NB) medium and were able to grow on a 10,000-fold dilution of the NB medium. Oligotrophbic bacteria were shown to exist abundantly in all layers of a rendzina forest soil through the year. Two-hundred three oligotrophic bacteria were isolated from forest soil at different layers(L.F.H and A layers), and their morphological and physiological characteristics were examined. They were divided into 4 groups on their cell shape: (1) regular rods(Group I. 73 isolates), (2) curved/spiral rods (Group II, 29 isolates), (3) irregular rods (Group III, 56 isolateds), (4) append aged organisms (Group IV, 45 isolates), A high propoltion(95%)of the isolated oligotrophs were Gram-negative. all the isolated were aerobic, nonspore-formers. Forty isolates utilized fenolic acid such as ferulic acid or p-coumaric acid. sixty-for isolateds utilized C-1 compounds such as methanol or formic acid.
In an effort to isolate novel bacteria for the bioremediation of over-fertilized soils, we identified 135 denitrifying cells out of 3,471 oligotrophic bacteria pools (3.9%) using a denitrification medium supplemented with potassium nitrate as the sole nitrogen source. Soil samples were taken from ecologically well-conserved areas, including a mountain swamp around the demilitarized zone (Yongneup), two ecoparks (Upo and the Mujechi bog), and ten representative islands around the Korean peninsula (Jejudo, Daecheongdo, Socheongdo, Baekryeongdo, Ulrungdo, Dokdo, Geomundo, Hongdo, Huksando and Yeonpyeongdo). All of the 135 bacteria produced nitrogen gas from the denitrification medium, and were proved to be nitrate reductase positive by API-BioLog tests. Phylogenetic analysis using 16S rDNA sequences revealed that the 135 bacteria consisted of 44 different genera. Along with the most prominent, Proteobacteria (87.4%), we identified denitrifying bacteria from Firmicutes (9.4%), Actinobacteria (2.4%), and Bacteroidetes (0.8%). Physiological analyses of the 44 representative denitrifying bacteria, under various pH levels, growth temperatures and salt stresses, revealed 12 favorable denitrifying strains for soil bioremediation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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