우유내 Salmonella를 검출하기 위한 Sandwich ELISA의 특이성을 조사하였다. Sandwich ELISA에 사용한 항체들은 OMP 분획을 닭에 면역주사하여 얻은 IgY와 OMP 분획을 gel filtration하여 얻은 분자량 40,000의 OMP를 토끼에 면역 주사하여 얻은 토끼 IgG를 사용하였다. Immnoblot assay에서 IgY는 분자량 6,000의 OMP에 강하게 반응하였으며 토끼 IgG는 분자량 40,000, 35,000과 6,000의 OMP들에 강하게 반응하였다. IgY와 토끼 IgG는 Salmonella typhimurium의 다른 단백질에도 반응하였다. Competitive ELISA에서 IgY가 Salmonella의 두 개 균주에 대해 특이성을 나타냈으며 Eshcherchia coli와 Yersinia enterocolitica에 의하여서는 반응을 나타내지 않았다. 우유에 세균을 첨가하여 실시한 sandwich ELISA에서 Salmonella typhimurium 2균주가 가장 높은 흡광도를 보였다. Salmonella cholerasuis 균주들은 상대적으로 흡광도가 낮았으며 이루 일부 Salmonella cholerasuis 균주들은 비 Salmonella 균주들과 차이가 없었다.
Omeprazole (OMP) is a proton pump inhibitor used as an oral treatment for acid-related gastrointestinal disorders. In the liver, it is primarily metabolized by cytochrome P-450 (CYP450) isoenzymes such as CYP2C19 and CYP3A4. 5-Hyroxyomeprazole (5-OHOMP) and omeprazole sulfone (OMP-SFN) are the two major metabolites of OMP in human. Cimetidine (CMT) inhibits the breakdown of drugs metabolized by CYP450 and reduces, the clearance of coad-ministered drug resulted from both the CMT binding to CYP450 and the decreased hepatic blood flow due to CMT. Phenobarbital (PB) induces drug metabolism in laboratory animals and human. PB induction mainly involves mammalian CYP forms in gene families 2B and 3A. PB has been widely used as a prototype inducer for biochemical investigations of drug metabolism and the enzymes catalyzing this metabolism, as well as for genetic, pharmacological, and toxicological investigations. In order to investigate the influence of CMT and PB on the metabolite kinetics of OMP, we intravenously administered OMP (30 mg/kg) to rats intraperitoneally pretreated with normal saline (5 mL/kg), CMT (100 mg/kg) or PB (75 mg/kg) once a day for four days, and compared the pharmacokinetic parameters of OMP. The systemic clearance ($CL_{t}$) of OMP was significantly (p<0.05) decreased in CMT-pretreated rats and significantly (p<0.05) increased in PB-pretreated rats. These results indicate that CMT inhibits the OMP metabolism due to both decreased hepatic blood flow and inhibited enzyme activity of CYP2C19 and 3A4 and that PB increases the OMP metabolism due to stimulation of the liver blood flow and/or bile flow, due not to induction of the enzyme activity of CYP3A4.
We investigated the safety, immunogenicity and protectivity of mix-crude outer membrane protein (cOMP) vaccine against salmonellosis in animals. The mix-cOMP vaccine was extracted from Salmonella enterica serovar Typhimurium (ST) and Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE) and Salmonella enterica serovar Braenderup (SB) isolated from pigs. The mix-cOMP vaccine gave significantly higher antibody response than ST-bacterin and ST-cOMP vaccine in guinea pigs. The survival rates of mix-cOMP vaccinated groups showed significantly higher (100%) than those (0-20%) of unvaccinated control group, challenged with 3 species of Salmonella (ST, SE and SB) in mice. Vaccinated groups in pigs showed reduction of clinical signs, increase of average weight gains, decrease of bacterial recovery rates, compared with unvaccinated groups. Especially, the survival rates (100%) of vaccinated groups in chickens showed higher than that (0%) of unvaccinated group. Based on these results, we suggest that the mix-cOMP Salmonella vaccine developed in this study will be effective for the protection against Salmonellosis caused by the various serotypes Salmonella species in animals.
본 논문에서는 압축적으로 센싱된 희소 신호를 복원하기 위한 유전 알고리듬(GA)에 기반한 직교 정합 추구 방법(GAOMP)을 제안한다. 최근에 제안된 SP, CoSaMP, gOMP 등은 매 반복 단계에서 부적절한 atom을 제거하여 희소 신호의 복원 성능을 개선하였다. 그러나 support set이 국소 최저에 빠져 신호 복원에 실패하는 경우가 발생한다. 제안된 GAOMP는 유전 알고리듬의 중요 연산자인 변이를 통해 support set이 국소 최저를 벗어날 수 있도록 도와주어 희소 신호의 복원 성능을 향상시킨다. 모의 실험을 통해 GAOMP가 여러 OMP 기반 알고리듬과 $l_1$ 최적화보다 우수한 신호 복원 성능을 보임을 알 수 있다.
To investigate the interaction of omeprazole (OMP) and meglumine (MEG), a complex was prepared by freeze-drying method in ammoniacal aqueous medium at room temperature and subjected to IR, DSC, and 1H NMR analysis. In addition, the stability of the complex was tested by accelerated stability analysis, and the dissolution rate of both powder and enteric coated was determined pellet by paddle method. The results are as follows; i) IR, DSC, and $^{1}H$ NMR studies indicate the formation of inclusion complex between OMP and MEG probably by electrostatic forces as $[OMP]\;[MEGH]^+$ form in a stoichiometric ratio (1:1) of OMP : MEG. ii) The dissolution rate of enteric coated OMP-MEG complex pellet in simulated enteric fluid was 90.6% in 10 minutes, which may satisfy the requirement for the regulation of dissolution. iii) OMP-MEG complex were decomposed according to pseudo 1st order kinetics: while the decomposition of OMP showed a rate constant $(k_{25^{\circ}C})$ of $5.13{\times}10^{-4}{\cdot}\;day^{-1}$, a half-life$(t_{1/2})$ of 1,350 days, a shelf-life$(T_{90%})$ 205 days and an activation energy of 23.53 kcal/mole. OMP-MEG complex inhibited a rate $(k_{25})$ of $2.92{\times}10^{-4}{\cdot}\;day^{-1}$, a half-life$(t_{1/2})$ of 2,373 days, a shelf-life $(T_{90%})$ of 306 days and an activation energy of 20.18 kcal/mole. iv) OMP was stabilized markedly by the formation of OMP-MEG complex between OMP and MEG, and the humidity increased the stability of OMP-MEG complex by decreasing the decomposition rate$(k_{50^{\circ}C})$ from $1.27{\times}10^{-2}{\cdot}\;day^{-1}$ at 31% R.H. to $2.54{\times}10^{-2}{\cdot}\;day^{-1}$ at 90% R.H.
To stabilize omeprazole(OMP), ethylenediamine(ED) complex of omeprazole(OMPED) was prepared by reaction between OMP and ED in methanol, and the complex formation was confirmed by the instrumental analysis, i.e., IR, DSC, EA, NMR, MS and XRD. The rates of decomposition of OMP and OMPED in aqueous solution and the shelf lives at standard temperature were measured by accelerated stability analysis. The results are summarized as follows; The mole ratio of OMP and ED in OMPED complex is 1:1, the energy of formation within OMPED might be combined between polar imidazole group of OMP with induced a dipole amine group in the readily polarizable ED molecule. At standard temperature the degradation rate constant of OMP in aqueous solution is $2.540{\times}10^{-2}\;hr^{-1}$ and the shelf life is 4.15 hrs, and in the case of OMPED the degradation rate constant is $7.986{\times}10^{-4}\;hr^{-1}$ and the shelf life is 131.96 hrs. So, the OMPED has about 31 times longer shelf life than OMP. The activation energy of OMP and OMPED are 5.23 and 18.55 kcal $mole^{-1}$ respectively. The stability of OMP is dependent chiefly on pH in the solutions and it decomposes readily in acidic medium by hydrogen ion catalized reaction but becomes stable beyond pH 9.0. In case of the ED-complex, OMPED is stable in neutral as well as in dilute acidic solutions even in pH 6, OMPED is very stable to light(UV), that is, the rate constant and shelf life of OMP are $k=1.0188{\times}10^{-2}\;day^{-1}$, $T_{90%}=4.5 \;days$, on the other hand, the those of OMPED are $k=7.138{\times}10^{-4}\;day^{-1}$, $T_{90%}=64.1\;days$, respectively. From the above results, it is thought that new dosage forms could be developed by using the OMPED as a potential OMP complex.
Lee, Sang Jun;Park, In Suk;Han, Yun Hee;Kim, Young Ok;Reeves, Peter R.
Molecules and Cells
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제26권2호
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pp.140-145
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2008
Expression of olive flounder hepcidin I (HepI) fused with truncated OmpA signal peptides ($OmpASP_{tr}$) as directional signals does not produce soluble fusion proteins. However, by inserting amino acid segments (xxx) varying in pI and hydrophobicity/hydrophilicity into a leader sequence containing a truncated OmpASP ($OmpASP_{tr}$) and a factor Xa cleavage site (Xa) [$OmpASP_{tr}{\mid}(xxx){\mid}Xa$], we were able in some cases to express soluble recombinant HepI. Soluble expression of the recombinant protein strongly correlated with (xxx) insertions of high pI and hydrophilicity. Therefore, we modified the $OmpASP_{tr}{\mid}(xxx){\mid}Xa$ sequence by inserting Arg and Lys into (xxx) to increase the hydrophilicity of the signal peptide region. These modifications enhanced the expression of soluble recombinant HepI. Hydropathic profile analysis of the $OmpASP_{tr}{\mid}(xxx){\mid}Xa$ HepI fusion proteins revealed that the transmembrane-like domains derived from the $OmpASP_{tr}{\mid}(xxx){\mid}Xa$ sequence were larger than the internal positively charged domain native to HepI. It should therefore be possible to overcome the obstacle of internal positively charged domains to obtain soluble expression of recombinant proteins by monitoring the hydrophilicity and hydropathic profile of the signal peptide region using a computer program.
Simborio, Hannah Leah Tadeja;Reyes, Alisha Wehdnesday Bernardo;Hop, Huynh Tan;Arayan, Lauren Togonon;Min, Wongi;Lee, Hu Jang;Lee, Jin Ju;Chang, Hong Hee;Kim, Suk
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권3호
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pp.603-609
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2016
Brucellosis affects a wide range of host species, including humans and many livestock animals. Chronic infections of the disease make antibiotic treatment costly, and the current vaccine used in livestock has not been approved for human use. This study investigated the possible use of the Brucella abortus outer membrane protein A (OmpA) as a candidate subunit vaccine in an infected mouse model. The ompA gene was cloned and overexpressed, and the recombinant OmpA (rOmpA) protein fused to maltose binding protein (MBP) was purified in Escherichia coli. Immunogenicity was verified through western blotting, and mice were immunized and challenged to evaluate its protective effect. Mice treated with rOmpA exhibited induced humoral and host cell-mediated responses, with a significant increase in immunoglobulin G (IgG1 and IgG2a) and cytokine levels, especially TNF-α and IL-12, compared with the control groups treated with either MBP or PBS. In conclusion, rOmpA should be highly considered as a future subunit vaccine for brucellosis, and further studies regarding rOmpA and its protective ability are suggested.
본 논문에서는 다중사용자 (Multiuser, MU)환경의 상향링크 공간변조 (Spatial Modulation, SM)시스템(MU-SM)에서 병렬직교매칭퍼슛 (Parallel OMP, POMP)검출 기법을 적용하여 신호 복원 성능을 개선하는 기법을 제안하고 그 성능분석을 한다. MU-SM시스템의 전송신호는 사용자당 $N_t$개의 안테나중 1개의 안테나만을 사용하여 변조심벌을 전송하는 특성이 있으므로 수신단에서 신호복원 시 이러한 특성을 고려한다. MU-OMP기법은 첫번째 반복과정을 수행 후 두 번째 이후의 인덱스를 찾을 때는 이전의 인덱스에 해당하는 안테나를 가진 사용자의 모든 안테나 인덱스를 제외하고 다음 인덱스를 찾는다. 이것은 한명의 사용자 안테나들 중 2개 이상의 인덱스가 선택되는 것을 방지하여 오류 확률을 줄일 수 있다. 시뮬레이션을 통해 제안한 MU-OMP와 MU-POMP 검출 기법이 기존의 압축센싱기반의 신호복원기술보다 성능이 월등함을 확인하였다.
Fowl typhoid caused by Salmonella gallinarum has increased dramatically since 1992 and has caused a great economic losses in chicken industry by characterizing with high mortality. In these studies, we investigated the immunogenicity and protectivity in chickens which were immunized with outer membrane protein(OMP) extracted from isolates of S gallinarum against challenge with live microorganism. Outer membrane proteins were composed of various sizes of molecular weight including 14K, 22K, 31K, 36K, 40K and 55K and the most of them responded strongly against rabbit antisera in immunoblot analysis. The chickens vaccinated with OMP or vaccinated with whole-cell combined with OMP($200{\mu}g$/chickens) complex showed higher delayed type hypersensitivity(DTH) response than that of whole-cell vaccinated group. The protective rates of OMP or whole-cell combined with OMP complex group against challenge of S gallinarum were higher (above 75%) than those (45~50%) of whole-cell vaccinated group. All vaccines were safe and the body weight-gains of all vaccinated groups were not significantly different (p<0.05) from those of nonvaccinated control group. In vitro tests, OMP stimulated both the proliferation of lymphocytes and T-lymphocytes, and OMP-induced lymphocyte proliferation was higher in the cells of the immunized chickens with OMP than in those from the control chickens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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