A superoxide anion radical scavenger isolated from Capsella bursa-pastoris was characterized by infrared (IR) spectroscopy, sugar analysis, ultraviolet (UV) spectroscopy, $^{1}H$ and $^{13}C$ nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopies, and fast atom bombardment (FAB) mass analysis. The compound was assumed to be a flavonoid-O-glycoside from IR spectrum and UV absorption maxima. When the sugar composition of the compound was examined by thin layer chromatography (TLC) and gas chromatography (GC) of the acid hydrolysate, only glucose was detected. According to the results of UV spectrotroscopy by using shift reagents, the compound was supposed to be luteolin (5,7,3',4'-tetrahydroxy flavone) or chrysoeriol (5,7,4'-trihydroxy-3'-methoxy flavone) with glucose. Based on $^{1}H$- and $^{13}C-NMR$ spectroscopies, the compound was deduced as 7,4'-dihydroxy-5,3'-dimethoxy-${\alpha}$-6-c-glucosyl-${\beta}$-2"-o-glucosyl flavone. In FAB mass analysis the compound was finally characterized as 7,4'-dihydroxy-5,3'-dimethoxy-${\alpha}$-6-c-glucosyl-${\beta}$-2"-o-glucosyl flavone ($C_{29}H_{34}O_{16}$, M.W.=638).
The purpose of this study was to identify the protective effect of Codonopis pilosula extract on cell death induced by $H_2O_2$ in SK-N-MC neuroblastoma cells. We measured the antioxidant effect by DPPH radical scavenging analysis, BSA analyssis and examined the cell viability by crystal violet and cytochrome C, Bax, Bcl-2, p53, p21 by using Western blot analysis. Codonopis pilosula extract scavenged DPPH radical in a dose-dependent manner and shown direct free radical scavenging effect, suggested that Codonopis pilosula extract have antioxidant effect in vitro. Treatment of cells with hydrogen peroxide, a reactive oxygen species, was to induce cell death and pretreatment with Codonopis pilosula extract attenuated the occurrence of $H_2O_2-induced$ cell death. To elucidate the protective mechanisms of action of Codonopis pilosula extract, Western blot analyses for Bcl-2 and Bax expression and cytochrome c release were carried out. Pretreatment with Codonopis pilosula extract induced the expression of Bcl-2 and suppressed the release of cytochrome c and Bax into the cytosol, thereby arresting $H_2O_2-induced$ apoptotic cell death. Especially p21 and p53 were decreased prior to $H_2O_2$ treatment. These results suggest that Codonopis pilosula extract is associated with the cell cycle and anti-apoptotic cell death.
The antioxidant activities of methanol extracts of sixteen samples were tested using 1.1-diphenyl-2-picryl hydrazyl(DPPH) reactivity and TBARS substances assay in vitro. The methanol extracts of the rice brans from three wild rice -O. minuta, O. rufipogon, and O. barthii-were found to be the most effective in DPPH radical scavenging activity. The next effective ones were the rice brans of Heugjinjubyeo and leaves of Tapgolbori. When tested on lipid peroxidation using a lipid peroxidation generation system mediated by $H_2O$$_2$/Fe$^{2+}$ in rat liver homogenates, the brans and hull of wild rice (O. minuta, O. rufipogon, and O. barthii) and rice bran of Heugjinjubyeo exhibited protective activities against lipid peroxidation in the order of effectiveness.s.
An, Ren-Bo;Tian, Yu-Hua;Oh, Hyun-Cheol;Kim, Youn-Chul
Natural Product Sciences
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제11권3호
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pp.119-122
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2005
In the course of searching for hepatoprotective agents from natural products, four compounds were isolated from the MeOH extract of Sanguisorbae Radix, as guided by their DPPH free radical scavenging activity. The structures were determined as 4,5-dimethoxy-3-hydroxybenzoic acid methyl ester (1), (+)-gallocatechin (2), methyl $6-O-galloyl-{\beta}-D-glucopyranoside$ (3), and pomolic acid $3-O-[{\alpha}-L-arabinopyranoside]-28-O-[{\beta}-D-glucopyranosyl]$ ester (ziyu-glycoside I) (4). Compounds 2 and 3 showed significant DPPH free radical scavenging effects, exhibiting $IC_{50}$ values of 11.4 and $13.0\;{\mu}M$, respectively. L-Ascorbic acid was used as a positive control and exhibited the $IC_{50}$ value of $50.3\;{\mu}M$. In evaluation of the hepatoprotective activity of the isolated compounds on drug-induced cytotoxicity, compound 2 showed the significant hepatoprotective effect with the $EC_{50}$ value of $91.84\;{\pm}\;11.0\;{\mu}M$ on tacrine-induced cytotoxicity in Hep G2 cells, while silybin, a positive control, exhibited $EC_{50}$ value of $122.4\;{\pm}\;12.5\;{\mu}M$.
This study was carried out to investigate the structure of antioxidative constituents and the free radical scavenging effect of the main ingredients from Galla Rhois(Rhus javanica Linne). Antioxidative activities of n-hexane, EtOAc and BuOH extracts of Galla Rhois were similar or even higher than that of natural (tocopherol) or synthetic antioxidant (BHA). It is suggested that major fractions for the antioxidative activity of Galla Rhois were the n-hexane, EtOAc and BuOH extract compartments. In the subsequently experiment, one active compound from n-hexane extract, three active compounds from EtOAc extract and one active compound from BuOH extract were isolated. Their chemical structures were identified as syringic acid, protocatechuic acid, gallic acid methylester, gallic acid and $1,2,3,4,6- penta-O-galloyl-{\beta}-D-glucose$ on the basis of the speculation of spectral data and chemical reaction. Among the compounds, protocatechuic acid, gallic acid methylester and $1,2,3,4,6- penta-O-galloyl-{\beta}-D-glucose$ showed most potent radical scavenging effect using DPPH method.
Free radicals of lysozyme produced by $Ti-H_2O_2$ system were studied in aqueous solution at room temperature using ESR with a continuous flow-mixing. The spectra, each consisting of a doublet with 5.5 G splitting and a broad resonance covering 80 G splitting are closely similar in shape to that for solid irradiated in vacuum at $77^{\circ}K$ and observed at room temperature immediately on warming. The result is assumed to indicate that the secondary protein radical components formed within 0.01 second, dead time of the mixing chamber, and initiated by hydrogen atom abstraction at ${\alpha}$-carbon atom of peptide chain in liquid solution at room temperature are identical to those resulting from the initial formation of a mixture of positive holes and negative ions by ionization processes as well as radical fragments by the rupture of chemical bonds in the solid during similar time at the same temperature. A broad resonance is observed with considerable amplitude on the high field side of the doublet, which is quite dissimilar to the spectra of irradiated solid lysozyme. This resonance was tentatively attributed to the polypeptide free radical in which unpaired electrons are localized on side chain.
The antioxidative effect of Ecklonia cava, a brown marine alga, was investigated on radical scavenging, including 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), and hydroxyl and alkyl radicals, using an electron spin resonance (ESR) technique, and on the inhibition of $H_2O_2$-induced DNA damage using comet assay. E. cava was enzymatically hydrolyzed with five food industrial proteases (Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, Neutrase and Protamex) to prepare water-soluble extracts. All the proteolytic hydrolysates exhibited strong dose-dependent radical scavenging activities (above 80%) at a concentration of $2.5\;{\mu}g/mL$. Kojizyme extract (obtained by proteolytic hydrolysation of E. cava with Kojizyme) showed the highest hydroxyl radical scavenging activity of around 98%. In addition, the $H_2O_2$-induced DNA damage was determined using a comet assay, which was quantified by measuring the tail length. Reduction of DNA damage increased with increasing concentrations of Kojizyme extract from E. cava. These results indicated that E. cava has a potential as a valuable natural antioxidative source.
Assai 열매추출물의 자유 라디칼 소거능을 측정하기 위하여 DPPH를 이용한 자유 라디칼 소거능 실험을 수행하여 항산화 효과를 측정한 결과, assai열매추출물의 농도가 높을수록 DPPH활성이 뛰어남을 알 수 있었고, ROS를 이용하여 항산화 효과를 확인하였다. 배양된 대식세포에 assai열매추출물을 농도별로 첨가한 결과, 농도가 높을수록 과산화수소에 의해 유도된 산화적 자극이 감소하였다. 또한 세포 생존에 미치는 영향을 알고자 assai열매추출물을 농도별로 첨가하여 24시간후 세포의 형태변화를 MTT assay로 실시한 결과, 산화적 자극에 의해 발생한 세포 손상이 assai 열매추출물의 농도가 높아질수록 감소하는 것이 확인되었다. 따라서 assai열매추출물은 천연 항산화제로서의 가능성을 보였다.
신선초에서 항산화 활성 물질을 분리하기 위해 신선초를 80% 에탄올 추출하고 추출물에 대한 계통 분획을 실시하여 n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol 및 water의 총 5가 분획으로 나누어 항산화 활성을 측정한 결과 ethyl acetate 분획의 활성이 가장 높아 ethyl acetate 분획물로부터 항산화 활성 물질을 분리 정제하였다. Silica gel column chromatography를 통하여 chloroform : methanol : water의 용매 조건을 점차적으로 변경하면서 소분획으로 나누고 항산화 활성이 가장 높은 소분획에 대해서 acetylation 반응을 실시하고 이를 n-hexane : ethyl acetate : methanol의 용매 조건으로 단일 물질로 분리 한후 deacetylation 반응을 거쳐 최종 두 개의 단일 화합물을 획득했다. 두 개의 단일 화합물에 대한 구조 해석을 기기분석을 통해서 진행 한 결과 이 두 화합물을 각각 isoquercitrin과 hyperoside로 최종 동정하였다. Isoquercitrin과 hyperoside에 대한 항산화 활성을 DPPH radical 소거법, ABTS radical 소거법, OH radical 소거법 및 $H_{2}O_{2}$ 소거법으로 측정한 결과 4가지 assay법에 대해서 저농도에서 고른 항산화 활성을 나타냈고, 또한 DNA 손상에 대한 보호 효과를 측정한 결과 isoquercitrin과 hyperoside 모두 손상된 DNA에 대한 보호 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 isoquercitrin과 hyperoside는 DPPH radical 소거능과 ABTS radical 소거능과 같은 기본적인 항산화 활성과 더불어 DNA 손상에 직접적인 영향을 미치는 OH radical과 $H_{2}O_{2}$에 대해서 높은 항산화 활성을 나타내면서 동시에 DNA 손상에 대한 보호 효과를 나타냄으로써 다양한 경로의 항산화 메커니즘에 작용한다는 사실을 유추해 볼 수 있으며 산업적으로 유용한 소재로서의 연구가 가능할 것으로 판단된다.
We confirm that when A-type zeolite supporting silver lone is placed in ion-exchanged distilled water, silver ions is eluted and eluted silver ions generates hydroxyl-radical (.OH) and hydro-radical (.H) continuously, the amount of those is proportion to the silver-ion concentration. Hydroxyl-radical is not generated by super-oxide anion-radical (.O2) but by directly dissolved water. To know such a above discussed mechanism, we prepare A-type zeolite supporting silver ions, and measure the amount of the eluted silver tons by atomic absorption spectroscopy and the generated radical by ESR The radical generated by A-type zeolite supporting silver ions is discussed in the application of elecrical and electronic materials.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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