• 제목/요약/키워드: Normal phase HPLC

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정상 액체 크로마토그래피를 이용한 taxane으로부터 taxol의 분리 (Separation of Taxol from Taxanes by NP-HPLC)

  • 장경곤;노경호;정성택
    • 공업화학
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    • 제8권2호
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    • pp.286-291
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    • 1997
  • 항암제로 탁월한 효능이 있는 taxol을 정상 액체 크로마토그래피를 이용하여 주목나무의 추출물에서 분리하였다. Taxol을 분리하기 위해 시료 주입량은 $5{\mu}l$에서 $100{\mu}l$로 변화시키고, 이동상 유속은 1ml/min로 고정하여 일정 용매법으로 실험을 하였다. 실험에 사용된 이동상은 헥산, 에탄올, 메탄올, 1-프로판올, 이소프로판올이었다. Taxol과 유사한 성질를 갖는 표준시료 cephalomannine, taxol, 10-deacetyltaxol의 혼합물에서 taxol을 분리하였다. Cephalomannine, taxol, 10-deacetyltaxol 혼합물의 분리 실험 결과로 taxol의 분리 최적 조건은 2성분계에서 헥산/에탄올의 부피 조성비가 96/4이며, 3성분계에서는 헥산/1-프로판올/메탄올의 부피 조성비가 96/2/2이었다. 분리시간은 2성분계에서 80분인데 비해 3성분계에서는 50분으로 적은 용매를 사용하여 분리할 수 있었다. 위에서 얻는 실험조건으로 실제 주목나무의 추출물 $1{\mu}g$에서 taxol를 분리할 수 있었다.

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쌀겨 추출물로부터 스핑고당지질의 분리와 구조결정 (Isolation and Characterization of Major Glycosphingolipid from Rice Bran Extract)

  • ;;강병원
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제50권1호
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    • pp.72-76
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    • 2007
  • 대표적인 스핑고지질인 글리코실세라미드의 생리적 기능을 조사하기 위하여 쌀겨 추출물로부터 cerebroside를 분리하였다. 정제하지 않은 글리코실세라미드를 flash system 칼럼으로 분리한 후 ELSD를 검출기로 사용하여 순상 HPLC로 정제하였다. 클로로포름 : 메탄올 : 증류수(99:11:1, v/v/v)을 용출용매로 사용하여 주요 cerebroside를 얻을 수 있었고, MALDI/TOF-MS, FAB-MS, GC, 600MHz $^1$H-NMR로 구조를 분석하였다. 구성당은 글루코오스였고 cerebroside의 구성 지방산은 2-hydroxy-arachidic산이었다. 장쇄 염기는 sphinga-4,8-dienine이었다.

THE STABILITY OF ALL-TRANS-RETINOL IN NOVEL LIQUID CRYSTALLINE OW EMULSION

  • Kang, H.H.;Cho, J.C.;Lee, J.H.;Lee, O.S.
    • 대한화장품학회지
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    • 제24권3호
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    • pp.111-115
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    • 1998
  • We investigated the stability of all-trans-retinol on the liquid crystalline O/W emulsion composed of mainly alkyl polyglycerine, alkyl polyglucose and glycerine, and compared the activity of all-trans-retinol in the various forms of liquid crystal. Under certain conditions, novel liquid crystalline gel was formed around oil droplets, and layers of this liquid crystalline gel were very wide and rigid. (SWLC; Super Wide Liquid Crystal) SWLC was very helpful to stabilize retinol in O/W emulsion. After storage at 45 C for 4 weeks, all-trans-retinol in O/W emulsion composed of SWLC retained above 85% of the activity upon HPLC analysis, whereas those within no liquid crystalline emulsion gave 47% and normal liquid crystalline emulsion composed of fatty alcohols gave 40 60%. Retinol in oil phase is nealy insoluble in pure water, but in cosmetic emulsion systems can be slightly solubilized into water because emulsifiers and polyols in emulsion systems function as solubilizers. In this case, water in outer phase acts as a media for oxygen transporation$.$and thus destabilizes retinol. As a result, retinol in O/W emulsion has a tendency to become unstable. SWLC surrounding oil droplet which contains retinol is wide and rigid, therefore reduces contact between inner phase and outer phase To make SWLC, properties of emulsifiers are very important phase transition temperature should be high, and the structure of surfactants should be bulky, and their ratio should be suitable to make rigid and wide liquid crystalline gel layer in order to reduce contact between retinol in inner phase and water in outer phase.

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HPLC/DAD/ESI-MS를 이용한 혈장시료 중 갑상선 호르몬 분석 (Determination of thyroid hormones in plasma samples by high performance liquid chromatograph/diode array detector/electrospray ionization mass spectrometer)

  • 곽선영;문명희;표희수
    • 분석과학
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    • 제20권5호
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    • pp.424-433
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    • 2007
  • 혈장시료 중의 갑상선 호르몬을 고체상 추출법을 이용하여 추출한 후 HPLC/DAD/ESI-MS (high-performance liquid chromatograph/diode array detector/electrospray ionization-mass spectrometer)를 사용하여 분석하였다. 7종의 thyroid hormones의 HPLC 분리조건은 Hypersil ODS 컬럼(4.6 mm I.D., 250 mm length, particle size $5{\mu}m$)을 사용하고 ammonium formate buffer와 아세토나이트릴을 이동상으로 하여 기울기 용리한 결과 완전 분리가 가능하였으며, UV spectra 및 질량스펙트럼을 확인할 수 있었다. 고체상추출법에 의한 전처리 최적 조건을 조사한 결과 시료를 pH 3으로 한 후 C18 고체상을 사용하여 4 mL의 메탄올로 용리할 경우 회수율이 74.5-115.7%로 나타났다. HPLC/ESI-MS를 이용하여 20-500 ng/mL범위에서 검량선을 작성한 결과 $r^2$값은 0.9939-0.9978으로 나타났으며 검출한계는 20-50 ng/mL (38.1-162.8 pmol/mL)로 계산되었다. 정상인의 혈장에서 thyroxine의 정량이 가능하였으며 그 결과 50.98-112.97 ng/mL로 검출되었다.

청미래덩굴 뿌리 열수 추출물로부터 칼슘 결합 물질의 분리 (Isolation of a Calcium-Binding Fraction from a Hot-Water Extract of Smilax rhizoma)

  • 이지혜;전소정;송경빈
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제17권6호
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    • pp.903-907
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    • 2010
  • 청미래덩굴 뿌리(Smilacis rhizoma)로부터 칼슘과 결합하는 물질을 분리하고자 열수로 추출한 추출물을 ion exchange, normal-phase HPLC 및 gel filtration chromatogarphy를 이용하여 칼슘 결합 물질을 순차적으로 분리하였다. 그 결과 ion exchange chromatography에서 7개의 major peaks를 얻었으며, 이 중 F6 fraction이 0.083 mM로 칼슘과 가장 높은 결합력을 가졌다. 또한 F6를 $NH_2$ column으로 분획한 결과 F61에서 0.130 mM의 가장 높은 칼슘함량을 나타내었으며, 최종적으로 $Superdex^{TM}$를 이용하여 F611 fraction으로 분리하였다. 따라서 청미래덩굴 뿌리 추출물 중 F611 fraction을 이용하여 biomineral을 제조함으로써 칼슘 보충제나 기능성 성분의 원료로써 식품산업에 활용될 수 있다고 판단된다.

HPLC에 의한 동물성 수산식품 중의 Vitamin $D_3$와 그 관련물질 정량에 관한 연구 (Quantification of Vitamin $D_3$ and Its Derivatives in Marine Animal Foods by HPLC)

  • 김성진;김지수;조용계
    • 한국응용과학기술학회지
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    • 제10권2호
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    • pp.11-18
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    • 1993
  • Contents of vitamin $D_3$ and 25-OH-vitamin $D_3$ in marine animal products(20 species) were determined by HPLC. The isomers of vitamin D, $D_2$ and $D_3$, were not clearly separated on a reversed phase, ${\mu}$ Bonda Pak, with 20% methanol-acetonitrile, and on a normal phase, Zorbax SIL. with 0.4% isopropanol-hexane, but 25-OH-vitamin $D_2$ and-$D_3$ were separated on either ${\mu}$ Bonda Pak with 10% methanol-acetonitrile, or on Zorbax SIL with 2.2% isopropanol-hexane, respectively. Although levels of vitamin $D_3$ and 25-OH-vitamin $D_3$ varied remarkably according to species, their average value(fish : $l,l87{sim}36,007$ I.U/sample 100g, mussel : $58{\sim}1,706$ I.U/sample 100g, pickle: $1,208{\sim}79,358$ I.U/sample 100g) was greatly higher than that of meat($80{\sim}100$ I.U/sample 100g) and dairy products($400{\sim}800$ I.U/sample 100g). Fatty tissues of fish and pickled fish intestines contained high level of vitamin $D_3$ and 25-OH-vitamin $D_3$, while the clam and mussel known to have various kinds of sterol including ${\Delta}^7$-sterol showed very low levels of vitamin $D_3$ and its derivative.

보리 단백질 가수분해물로부터 칼슘 결합 물질의 분리 (Isolation of Calcium-Binding Peptides from Barley Protein Hydrolysates)

  • 이지혜;최동원;송경빈
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.438-442
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    • 2012
  • 칼슘보충제로 칼슘 결합 펩타이드를 만들기 위해, 보리 단백질에 Flavourzyme을 사용하여 18시간 동안 가수분해 하였고, 가수분해 된 보리 단백질은 3 kDa 이하로 한외여과 하였다. 한외여과 된펩타이드는 ion exchange chromatography와 normal-phase HPLC를 사용하여 칼슘 결합 펩타이드를 분리하였고, 분리된 각 분획의 칼슘결합력을 측정하였다. 그 결과 가장 높은 칼슘 결합력을 보인 분획을 칼슘 chelation을 위한 소재로 얻었고, 따라서 본 연구 결과 얻어진 보리 단백질 가수분해물은 칼슘보충제로의 사용이 가능하다고 판단된다.

Preparation of Bonded Cellulose Tris(3,5-dimethylphenylcarbamate) Chiral Stationary Phases by Using Three Bifunctional Reagents

  • Zhang, Yi Jun;Huang, Mingxian;Zhang, Yuping;Ryoo, Jae Jeong
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제34권9호
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    • pp.2623-2628
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    • 2013
  • Three di-acyl chlolide reagents, adipoyl chloride, terephthaloyl chloride and isophthaloyl chloride, were used as spacer reagents to prepare bonded type of three cellulose (3,5-dimethylphenyl)carbamate (CDMPC) chiral stationary phases (CSPs). The CDMPC CSPs were prepared using these three acid chlorides as spacer agents at the 6-position of the primary hydroxyl group on the glucose unit of cellulose regioselectively. The chiral recognition ability of the prepared CSPs for five racemates was evaluated by normal-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) with the following mobile phases: hexane/isopropanol (IPA), hexane/IPA/tetrahydrofuran (THF) and hexane/IPA/chloroform. The result showed that these prepared CSPs can be used in THF and chloroform solutions and the chiral recognition abilities of the CSPs were improved depending on the eluents and chiral samples.

Development of High Performance Liquid Chromatography for Paclitaxel Purification from Plant Cell Cultures

  • Kim, Jin-Hyun;Choi, Hyung-Kyoon;Hong, Seung-Suh;Lee, Hyun-Soo
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제11권2호
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    • pp.204-210
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    • 2001
  • Paclitaxel can be produced in high yield and with a high degree of purify from plant cell cultures of Taxus chinensis. The complete purification method was systematically established and described. This method was an efficient procedure for the purification of paclitaxel from crude paclitaxel, consisting or reverse-phase chromatography, followed by a normal-phase chromatography. The two-stage HPLC purification scheme serves as an effective and economical approach for resolving paclitaxel from complex mixtures of taxoids, with high purify (>99%) and low impurities (<0.1%). The process is readily scalable to a pilot plant and eventually to a production environment where multikilogram quantities of material are expected to be produced. The process has been optimized to minimize solvent usage, complexity, and operating costs.

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Setp-Gradient Mode를 이용한 인지질의 분리 (Separation of Phospholipids in Step-Gradient Mode)

  • 이주원;노경호
    • 공업화학
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    • 제8권4호
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    • pp.694-699
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    • 1997
  • 대두에 포함된 유용 인지질 PE, PI, PC를 분리하기 위해서 정상 HPLC를 이용하였다. 이동상으로 hexane, isopropanol, methanol을 사용하였고 일정용매조성법으로는 세 물질을 분리할 수 없었기 때문에 구배용매조성법을 적용하였다. 최적 분리조건을 구하기 위해서 단 이론과 step-gradient mode에서의 용량인자를 계산하는 식으로부터 농도분포곡선을 계산하였다. 계산 결과에 의하면 PE는 일정용매조성법 (hexane/isopropanol/methanol=90/5/5vo1.%)에서 분리하고 PI와 PC를 분리하기 위해서는 10분의 구배시간과 두번째 이동상을 hexane/isopropanol/methanol=50/20/30(vol.%)으로 계단함수의 구배용매조성법을 사용하는 것이다. 계산된 최적 분리조건을 실험 data와 비교한 결과 잘 일치하였고 이 제시된 방법은 구배용매조성법에서 최적 분리조건을 구하는데 이용될 수 있었다.

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