• 생명과학회지
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• 제8권6호
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• pp.673-680
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• 1998

Nocardioides sp. J-326TK의 adenosine deaminase gene을 분리하기 위하여 genomic DNA를 제한효소로 무작위적으로 절단하여 pBluscript KS에 ligation시켰다. 또한 hu-man과 mouse, E. cali 등의 adenosine deaminase gene의 보존적인 부위를 primer로 합성을 하여 PCR reaction을 행하였다. Genomic DNA를 cloning시킨 pKSN60은 5kb정도의 DNA를 포함하고 있으며 sourthern hybridization 등의 여러 확인 실험을 통하여 adenosine deaminase gene을 포함하고 있다는 알았다. PCR product를 cloning시켜 형성된 recombinant plasmid를 PCR reaction의 primer로서 pTBN20를 sequencing을 행하였다. 그 결과를 다른 ade-nosine deaminase gene의 서열과 비교를 하였는데 미생물인 E. coli와는 nucleotide sequence는 99.5%, amino acid sequence는 98.9%의 homology를 나타내고 human과는 각각 59.5%, 46.8%의 homolosy를 나타내었다.

• 미생물학회지
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• 제28권1호
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• pp.83-89
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• 1990

토양으로부터 세포의 adcnosinedeaminase를 생산하는 두종의 방선균 J-845S주와 J-326TK 주름 분리하여 각각 Streptomycs sp. J-845S와 Nocardioides sp. J326TK로 동정하였다. Streptomyces sp. J-845S는 그람염색 양성, 비항산성균으로 기균사의 흰색계열의 간상형의 비운동성의 포자를 형성하였으며, 포자의 표면은 평할하였고 나선상의 포자연쇄를 형성하였다. 균사체의 분자는 양호하였다. 세포벽 구성성분을 분석한 결과 LL-diaminopimelic acid를 함유하는 cell wall type I 이었으며, phospholipid type II였다. Nocardioides sp. J-326TK는 그람염색반응 양성, 항산성염색반응 음성이었으며, 균사체는 불규칙한 간상 또는 구사으이 절편으로 분절되었다. 기균사의 분자는 그다지 인정되지 않았으며, 포자형태의 긴 elements의 표면은 평할하였다. 세포벽 구성성분을 검토한 결과 cell wall type I과 phospholipid type I으로나타났다.

• Journal of Life Science
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• 제9권1호
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• pp.64-68
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• 1999

The properties of purified intracellular adenosine deaminase (adenosine aminohydrolase, EC 3.5.4.4) of Nocardioides sp. J-326TK isolated from soil have been studied. The enzyme deaminated adenosine and 2`-deoxyadenosine and the respective {TEX}$K_{M}${/TEX} values were 4.0×{TEX}$10^{-4}${/TEX} M and 5.0× {TEX}$10^{-4}${/TEX} M, but the enzyme was not active on 8-bromoadenosine, 6-methylaminopurine riboside, ATP, ADP, 2`-AMP, 3`-AMP, 5`-AMP, dAMP, cAMP, NAD, FAD, NADP and adenine. The enzyme activity was strongly inhibited by the addition of {TEX}$Hg^{2+}${/TEX} and {TEX}$Ag^{+}${/TEX}, {TEX}$Cu^{2+}${/TEX}, {TEX}$Co^{2+}${/TEX} and {TEX}$Mn^{2+}${/TEX} also inhibited the activity but much less extent. The effect of alkyl reagents, metal chelating reagents and certain other compounds on the enzyme activity were also examined. No reagent activated the enzyme. On the contrary, the enzyme reaction was slightly inhibited by o-phenanthroline and 6-benzyladenosine.