Nivalenol(NIV)의 검출을 위한 효소면역측정법(ELISA)을 개발하기 위하여 tetraacetyl nivalenol(Ac4-NIV)에 대한 다클론항체를 생산하고 그 조건을 확립하였다. Ac4-NIV-hemisuccinate를 bovine serum albumin에 공유결합 시킨 Ac4-NIV-HS-BSA를 Freund's adjuvant와 함께 수차례 토끼에 피하면역하였다. 가장 높은 항체가를 나타낸 항혈청으로부터 정제한 항체와 Ac4-NIV-HS-HRP conjugate를 이용하여 직접 경합 ELISA(cdELISA)를 확립하였다. 그 표준 곡선으로부터 Ac4-NIV의 검출 범위는 10~5,000 ng/ml(ppb)임을 알 수 있었다. 특이항체의 Ac4-NIV과 acetyl T-2에 대한 반응성은 각각 100, 70%였으나, NIV, deoxynivalenol, 3-acetyl deoxynivalenol, 15-acetyl deoxynivalenol, triacetyl deoxynivalenol, fusarenon-X, T-2에 대한 반응성은 0.1% 이하로 극히 미약하였다. NIV를 인위적으로 오염시킨 옥수수 시료를 70% acetonitrile 추출하고 acetylation 한 다음 cdELISA를 행하였을 때, 분석의 회수율은 100, 300, 1,000 ng/g(ppb)에서 각각 108, 143, and 70%(평균, 107%)로 나타났다.
The chromosomal aberration of the trichothecene mycotoxins such as T-2 toxin (T-2), HT-2 toxin (HT-2), nivalenol (NIV) and deoxynivalenol (DON) which are one of the most important food borne contaminants produced by Fusarium species fungi, was investigated in the chinese hamster lung cells. These trichothecene mycotoxins showed high cytotoxicity in order of T-2, HT-2, NIV, and DON to the chinese hamster lung cells. Nevertheless high cytotoxicity of these trichothecene mycotoxins, no clastogenicity of T-2 and HT-2 in the range of 0.01-0.0025 ng/ml, of NIV in that of 0.3-0.075ng/ml, and of DON in that of 1.0-0.25 ng/ml was observed in both with and without metabolic activation system.
Kim, Da-Woon;Kim, Gi-Yong;Kim, Hee-Kyoung;Kim, Jueun;Jeon, Sun Jeong;Lee, Chul Won;Lee, Hyang Burm;Yun, Sung-Hwan
The Plant Pathology Journal
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제32권3호
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pp.182-189
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2016
Together with the Fusarium graminearum species complex, F. culmorum is a major member of the causal agents of Fusarium head blight on cereals such as wheat, barley and corn. It causes significant yield and quality losses and results in the contamination of grain with mycotoxins that are harmful to humans and animals. In Korea, F. culmorum is listed as a quarantine fungal species since it has yet to be found in the country. In this paper, we report that two isolates (J1 and J2) of F. culmorum were collected from the air at a rice paddy field in Korea. Species identification was confirmed by phylogenetic analysis using multilocus sequence data derived from five genes encoding translation elongation factor, histone H3, phosphate permease, a reductase, and an ammonia ligase and by morphological comparison with reference strains. Both diagnostic PCR and chemical analysis confirmed that these F. culmorum isolates had the capacity to produce nivalenol, the trichothecene mycotoxin, in rice substrate. In addition, both isolates were pathogenic on wheat heads and corn stalks. This is the first report on the occurrence of F. culmorum in Korea.
곡류의 도정은 곰팡이독소의 분포에 영향을 줄 수 있다. 보리에서의 도정효과를 조사하기 위해 트리코테씬과 제랄레논 독소에 오염된 겉보리 7점과 쌀보리 4점을 일반적으로 사용하는 도정 비율에 따라 도정하였다. 두 종류의 보리는 데옥시니발레놀과 아세틸 유도체(98.1-2,197.8 ㎍/kg), 니발레놀과 아세틸 유도체(468.5-3,965.1 ㎍/kg), 제랄레논(4.1-274.2 ㎍/kg) 등에 동시에 오염되어 있었다. 겉보리를 67%로 도정한 결과 데옥시니발레놀은 90.9%, 니발레놀은 87.7%, 제랄레논은 93.2%가 각각 감소하였다. 70%로 도정한 쌀보리의 경우는 데옥시니발레놀 88.6%, 니발레놀 80.2%, 제랄레논 70.1%이 각각 감소하였다. 두 보리 모두 데옥시니발레놀과 니발레놀의 아세틸 유도체는 100% 감소하였다. 그러나 보리겨는 도정 전 보리에 비해 곰팡이독소가 크게 증가하였다. 겉보리의 겨에서는 데옥시니발레놀, 니발레놀, 제랄레논이 각각 평균 357%, 252%, 169% 증가하였다. 이와 유사하게 쌀보리의 겨에서는 데옥시니발레놀, 니발레놀, 제랄레논이 각각 337%, 239%, 554% 증가하였다. 이러한 결과는 보리 낟알의 외피에 존재하는 곰팡이독소가 도정 과정을 통해 효과적으로 제거될 수 있음을 나타낸다. 그러나 도정을 통해 곰팡이독소가 낟알에서 겨로 집적됨에 따라 보리겨를 인축에 활용하기 위해서는 사전에 독소의 오염 수준을 확인할 필요가 있음을 보여준다.
국내 유통사료 239점에 대하여 푸사리움 속 곰팡이독소 4종(NIV, DON, T-2, ZEN)에 대하여 오염도조사를 실시하였다. 일반적으로 곰팡이독소 정제에 많이 사용되는 면역친화 컬럼을 사용하지 않고 일반 SPE컬럼을 이용하였으며, HPLC/MS/MS로 동시 분석하였다. 각각의 성분 별로 77.42~111.20%의 회수율과 $0.3{\sim}2.0\;{\mu}g/l$의 양호한 정성한계(LOD)를 보였다. 분석 결과 사료 중에 조사대상 곰팡이독소가 광범위하게 오염되어 있었으며, 특히 DON과 ZEN은 모든 배합에서 확인되었다. 소 사료의 경우 DON과 ZEN은 평균 $812.1\;{\mu}g/kg$과 $147.2\;{\mu}g/kg$의 오염도를 보여 닭 사료나 돼지 사료보다 약 4배정도 높은 오염도를 보였으며, 그 원료로 사용된 단미 사료를 조사해본 결과 수입 단백피가 주요 오염원인 것으로 확인됐다.
The trichothecenes are a chemically related sesquiterpenoid fungal metabolites of Fusarium, Trichoderma, Stachybotrys and others, and at moment more than 70 kinds of derivatives are identified. Historically, they are identified as antifungal and phytotoxic compounds, but after the finding of T-2 toxin from Fusarium tricinctum, several trichothecenes are now considered to be natural toxicants in foodstuffs and feeds.
본 연구는 곰팡이독소에 안전한 보리 저장법을 수립하기 위해 다양한 저장환경 중 겉보리에 발생하는 곰팡이와 곰팡이독소를 측정하였다. 두 지역에서 수집한 겉보리를 상온 창고 2곳, 저온창고, $15^{\circ}C/65%$ 항온항습실 및 종자저장고에 6개월간 저장하면서 장소별 온도, 상대습도 및 곡물수분함량을 측정하였으며 0, 1, 3 및 6개월 후 겉보리에 오염된 곰팡이와 곰팡이독소를 조사하였다. 저장 중 보리에 오염된 주요 곰팡이 속은 Fusarium, Epicoccum, Alternaria 및 Drechslera 이었다. 상온창고는 저장 후기로 갈수록 Fusarium 과 Alternaria 속 곰팡이가 큰 폭으로 감소한 반면 Drechslera는 증가하였다. 저온창고, 항온항습실 및 종자저장고에서는 Fusarium 오염립의 감소폭이 적었고 저장 6개월 후에도 2.5 log CFU/g 이상이 검출되었다. 니발레놀 오염은 한 시료에서 저장 0-3개월 간 비슷한 수준을 유지하다가 6개월 후 증가하였으며, 저장소 간 차이는 나타나지 않았다. 따라서 겉보리 저장 중 니발레놀 오염 예방을 위해 저장 기간을 6개월 미만으로 줄이는 것이 효율적일 것으로 보인다.
The natural occurrence of mycotoxins in food and foodstuffs and the fate of mycotoxins during food processing were investigated. Aflatoxins and /or Fusarium mycotoxins(nivalenol, deoxynivalenol and zearalenone) were detected in commercial samples of various foods and foodstuffs collected at Tokyo markets. It was found that the mycotoxins were decomposed at high temperature, but some remained after heating at usual temperatures for an ordinary period for domestic cooking(boiling, deep-frying of grilling). Industrial food manufacturing processes were relatively effective for removing mycotoxins.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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