The stable anchorage of pyridoxal 5'-phosphate (PLP) in the active site of D-amino acid transaminase (D-AT) is crucial for the enzyme catalysis. The three-dimensional structure of D-AT revealed that Glu32 is one of the active site groups that may playa role in PLP binding. To prove the role of Glu32 in PLP stability, we firstly checked the rate of the potential rate-limiting step. The kinetic analysis showed that the rate of the ${\alpha}$-deprotonation step reduced to 26-folds in E32A mutant enzyme. Spectral analyses of the reaction of D-AT with D-serine revealed that the E32A mutant enzyme failed to stabilize the key enzyme-substrate intermediate, namely a quinonoid intermediate (E-Q). Finally, analysis of circular dichroism (CD) on the wild-type and E32A mutant enzymes showed that the optical activity of PLP in the enzyme active site was lost by the removal of the carboxylic group, proving that Glu32 is indeed involved in the cofactor anchorage. The results suggested that the electrostatic interaction network through the groups from PLP, Glu32, His47, and Arg50, which was observed from the three-dimensional structure of the enzyme, plays a crucial role in the stable anchorage of the cofactor to give necessary torsion to the plane of the cofactor-substrate complex.
With increased human activity in space, the risk of re-entry and collision between space objects is constantly increasing. Hence, the need for space situational awareness (SSA) programs has been acknowledged by many experienced space agencies. Optical and radar sensors, which enable the surveillance and tracking of space objects, are the most important technical components of SSA systems. In particular, combinations of radar systems and optical sensor networks play an outstanding role in SSA programs. At present, Korea operates the optical wide field patrol network (OWL-Net), the only optical system for tracking space objects. However, due to their dependence on weather conditions and observation time, it is not reasonable to use optical systems alone for SSA initiatives, as they have limited operational availability. Therefore, the strategies for developing radar systems should be considered for an efficient SSA system using currently available technology. The purpose of this paper is to analyze the performance of a radar system in detecting and tracking space objects. With the radar system investigated, the minimum sensitivity is defined as detection of a $1-m^2$ radar cross section (RCS) at an altitude of 2,000 km, with operating frequencies in the L, S, C, X or Ku-band. The results of power budget analysis showed that the maximum detection range of 2,000 km, which includes the low earth orbit (LEO) environment, can be achieved with a transmission power of 900 kW, transmit and receive antenna gains of 40 dB and 43 dB, respectively, a pulse width of 2 ms, and a signal processing gain of 13.3 dB, at a frequency of 1.3 GHz. We defined the key parameters of the radar following a performance analysis of the system. This research can thus provide guidelines for the conceptual design of radar systems for national SSA initiatives.
Lee, Hyunkyung;Lee, Seungyeon;Jeong, Dawoon;Kim, Sun Jung
Journal of Ginseng Research
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제42권4호
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pp.455-462
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2018
Background: Ginsenoside Rh2 has been known to enhance the activity of immune cells, as well as to inhibit the growth of tumor cells. Although the repertoire of genes regulated by Rh2 is well-known in many cancer cells, the epigenetic regulation has yet to be determined, especially for comprehensive approaches to detect methylation changes. Methods: The effect of Rh2 on genome-wide DNA methylation changes in breast cancer cells was examined by treating cultured MCF-7 with Rh2. Pyrosequencing analysis was carried out to measure the methylation level of a global methylation marker, LINE1. Genome-wide methylation analysis was carried out to identify epigenetically regulated genes and to elucidate the most prominent signaling pathway affected by Rh2. Apoptosis and proliferation were monitored to examine the cellular effect of Rh2. Results: LINE1 showed induction of hypomethylation at specific CpGs by 1.6-9.1% (p < 0.05). Genome-wide methylation analysis identified the "cell-mediated immune response"-related pathway as the top network. Cell proliferation of MCF-7 was retarded by Rh2 in a dose-dependent manner. Hypermethylated genes such as CASP1, INSL5, and OR52A1 showed downregulation in the Rh2-treated MCF-7, while hypomethylated genes such as CLINT1, ST3GAL4, and C1orf198 showed upregulation. Notably, a higher survival rate was associated with lower expression of INSL5 and OR52A1 in breast cancer patients, while with higher expression of CLINT1. Conclusion: The results indicate that Rh2 induces epigenetic methylation changes in genes involved in immune response and tumorigenesis, thereby contributing to enhanced immunogenicity and inhibiting the growth of cancer cells.
This research focuses on entrepreneurial orientation(EO) of technology spin-offs as they are expected to reduce the gap between their technology and the market. Entrepreneurial orientation is an organizational activity or process that redistributes or combines resources in an innovative way and takes risk to create new values. It helps improve the level of organizational innovation to deal with uncertainty. An empirical study was performed to analyze the EO of spin-offs established by members of university faculties and research institutes in Korea. Antecedent variables to EO are hypothesized to include public policy for university faculty members and researchers at research institutes, the relationship with incubating organizations, and the level of social networking with other firms. The EO and technological performance relationships are also hypothesized. Data from a total of 121 spin-off organizations were collected and a series of multiple regressions were performed. The performance variable included both technological performance, such as the number of newly marketed products and new technology and subjective performance, such as the level of satisfaction with sales amount and profitability. Several important conclusions were drawn from this study. First, while government policy is not related to EO, the policy of a university or a research institute has a significant effect on the level of innovativeness. Second, a high percentage of human resources applied at the incubating organization results in a negative effect on risk taking. The level of cooperation with the incubating organization too is not related to Entrepreneurial Orientation. Third, the intensity of cooperative networking with other firms has a significant effect on risk-taking. Network relationship with government related organizations is not related to Entrepreneurial Orientation. This study analyzes the importance and role of policy of the university and research institute and networking with other firms to improve EO. It also suggests that a high composition of human resources at the incubating organization has a negative relationship with EO.
Background: Dendritic cells (DC) are professional antigen-presenting cells in the immune system and can induce T cell response against virus infections, microbial pathogens, and tumors. Therefore, immunization using DC loaded with tumor-associated antigens (TAAs) is a powerful method of inducing anti-tumor immunity. For induction of effective anti-tumor immunity, antigens should be efficiently introduced into DC and presented on MHC class I molecules at high levels to activate antigen-specific $CD8^+$ T cells. We have been exploring methods for loading exogenous antigens into APC with high efficiency of Ag presentation. In this study, we tested the effect of the cationic liposome (Lipofectin) for transferring and loading exogenous model antigen (OVA protein) into BM-DC. Methods: Bone marrow-derived DC (EM-DC) were incubated with OVA-Lipofectin complexes and then co-cultured with B3Z cells. B3Z activation, which is expressed as the amount of ${\beta}$-galactosidase induced by TCR stimulation, was determined by an enzymatic assay using ${\beta}$-gal assay system. C57BL/6 mice were immunized with OVA-pulsed DC to monitor the in vivo vaccination effect. After vaccination, mice were inoculated with EG7-OVA tumor cells. Results: BM-DC pulsed with OVA-Lipofectin complexes showed more efficient presentation of OVA-peptide on MHC class I molecules than soluble OVA-pulsed DC. OVA-Lipofectin complexes-pulsed DC pretreated with an inhibitor of MHC class I-mediated antigen presentation, brefeldin A, showed reduced ability in presenting OVA peptide on their surface MHC class I molecules. Finally, immunization of OVA-Lipofectin complexes-pulsed DC protected mice against subsequent tumor challenge. Conclusion: Our data provide evidence that antigen-loading into DC using Lipofectin can promote MHC class I- restricted antigen presentation. Therefore, antigen-loading into DC using Lipofectin can be one of several useful tools for achieving efficient induction of antigen-specific immunity in DC-based immunotherapy.
It is well established that TGF-${\beta}1$ and retinoic acid (RA) cause IgA isotype switching in mice. We recently found that lactoferrin (LF) also has an activity of IgA isotype switching in spleen B cells. The present study explored the effect of LF on the Ig production by mouse peritoneal B cells. LF, like TGF-${\beta}1$, substantially increased IgA production in peritoneal B1 cells but little in peritoneal B2 cells. In contrast, LF increased IgG2b production in peritoneal B2 cells much more strongly than in peritoneal B1 cells. LF in combination with RA further enhanced the IgA production and, interestingly, this enhancement was restricted to IgA isotype and B1 cells. Similarly, the combination of the two molecules also led to expression of gut homing molecules ${\alpha}4{\beta}7$ and CCR9 on peritoneal B1 cells, but not on peritoneal B2 cells. Thus, these results indicate that LF and RA can contribute to gut IgA response through stimulating IgA isotype switching and expression of gut-homing molecules in peritoneal B1 cells.
Kim, Ki-Hye;Yang, Chul-Su;Shin, A-Rum;Jeon, So-Ra;Park, Jeong-Kyu;Kim, Hwa-Jung;Jo, Eun-Kyeong
IMMUNE NETWORK
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제11권2호
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pp.123-133
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2011
Background: Mycobacterium tuberculosis (Mtb) heparin binding hemagglutinin (HBHA) is an Ag known to evoke effective host immune responses during tuberculosis infection. However, the molecular basis of the host immune response to HBHA has not been fully characterized. In this study, we examined the molecular mechanisms by which HBHA can induce the expression of proinflammatory cytokines in macrophages. Methods: HBHA-induced mRNA and protein levels of proinflammatory cytokines were determined in bone marrow-derived macrophages (BMDMs) using RT-PCR and ELISA analysis. The roles of intracellular signaling pathways for NF-${\kappa}B$, PI3-K/Akt, and MAPKs were investigated in macrophage proinflammatory responses after stimulation with HBHA. Results: HBHA robustly activated the expression of mRNA and protein of both TNF-${\alpha}$ and IL-6, and induced phosphorylation of NF-${\kappa}B$, Akt, and MAPKs in BMDMs. Both TNF-${\alpha}$ and IL-6 production by HBHA was regulated by the NF-${\kappa}B$, PI3-K, and MAPK pathways. Furthermore, PI3-K activity was required for the HBHA-induced activation of ERK1/2 and p38 MAPK, but not JNK, pathways. Conclusion: These data suggest that mycobacterial HBHA significantly induces proinflammatory responses through crosstalk between the PI3-K and MAPK pathways in macrophages.
본연구에서는 단순신경망의 구조와 특성을 이해하기 위해 신경회로망의 알고리듬을 이론적으로 분석하고 이를 토대로 프로그램을 설계 실행하여 신경망의 학습과정을 실험하였다. 본연구에서 채택한 학습알고리듬은 3계층구조의 역전파알고리듬이며 신경망의 모형은 단순의료전문가시스템모형을 입력치로 채택하였다. 계층수, 노드수, 학습사이클 수, 학습율, 모멘텀항등의 모수를 입력한 실험의 결과는 입력치에 대한 출력이 기대목표와 거의 일치하였다.
A single step fabrication process of carbon nanotube/Prussian Blue (CNT/PB) paste electrodes based on screen printing technology has been studied as an amperometric sensor for the determination of hydrogen peroxide and free chlorine. Compared to the classical carbon paste (CP) electrode, the CNT paste electrode greatly enhanced the response in the presence of hydrogen peroxide due to the electrocatalytic activity of the CNT. Based on the CNT/binder paste, PB was also incorporated into a network of CNT paste and characterized. The best electroanalytical properties of PB-mixed sensors to hydrogen peroxide were obtained with PB ratio of 10 wt % composition, which showed fast response time ($t_{90}{\leq}5$ s; 0.2 - 0.3 mM), low detection limit of 1.0 ${\mu}M$, good linear response in the range from $5.0{\times}10^{-5}$ - $1.0{\times}10^{-3}$ mol $L^{-1}$ ($r^2$ = 0.9998), and high sensitivity of -8.21 ${\mu}AmM^{-1}$. In order to confirm the enhanced electrochemical properties of CNT/PB electrode, the sensor was further applied for the determination of chlorine in water, which exhibited a linear response behavior in the range of 50 - 2000 ppb for chlorine with a slope of 1.10 ${\mu}Appm^{-1}$ ($r^2$ = 9971).
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the achievements of the project, and also to find out its strengths and weaknesses. Method: This evaluative study employed system theory and analytic techniques by using criteria which were relevance, appropriateness, adequacy, progress, effectiveness and satisfaction for input, process, output, and outcome of program. Study subjects were participants in the home health care program implemented in G public health center in Inchon metropolitan city in 2003. Results: Input factors including recruitment personnel, and support organization development were not adequately met for the program. However. the goal and objectives of the project were really appropriate for the community needs as well as government's policy. For the Process evaluation, home health care record form and computer data base had not progressed as scheduled, but overall program activities were finished on time. However, cooperation between organizations in the health center during service activity were not supportive. Managerial ability of program charged personnel about coordination and integration of team members was not affirmative. Output and outcome evaluation showed that people improved self care ability were 221 (17.5%). and 71 (5.62%) of subjects were moved into category of possible self-care. Client's satisfaction for this project showed a high degree. Conclusions: Based on the above results support organization and staff personnel for this program should be developed. Also, a community network of resources should be established and case management services should be focused continuously in community based home health care.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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