Lee, Soo Youn;Sekhon, Simranjeet Singh;Ban, Yeon-Hee;Ahn, Ji-Young;Ko, Jung Ho;Lee, Lyon;Kim, Sang Yong;Kim, Young-Chang;Kim, Yang-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.11
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pp.1943-1950
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2016
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are commonly present xenobiotics in natural and contaminated soils. We studied three (phenanthrene, naphthalene, and biphenyl) xenobiotics, catabolism, and associated proteins in Sphingobium chungbukense DJ77 by two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) analysis. Comparative analysis of the growth-dependent 2-DE results revealed that the intensity of 10 protein spots changed identically upon exposure to the three xenobiotics. Among the upregulated proteins, five protein spots, which were putative dehydrogenase, dioxygenase, and hydrolase and involved in the catabolic pathway of xenobiotic degradation, were induced. Identification of these major multifunctional proteins allowed us to map the multiple catabolic pathway for phenanthrene, naphthalene, and biphenyl degradation. A part of the initial diverse catabolism was converged into the catechol degradation branch. Detection of intermediates from 2,3-dihydroxy-biphenyl degradation to pyruvate and acetyl-CoA production by LC/MS analysis showed that ring-cleavage products of PAHs entered the tricarboxylic acid cycle, and were mineralized in S. chungbukense DJ77. These results suggest that S. chungbukense DJ77 completely degrades a broad range of PAHs via a multiple catabolic pathway.
Montalban, I.A.;De Diego, N.;Igartua, E. Aguirre;Setien, A.;Moncalean, P.
Plant Biotechnology Reports
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v.5
no.2
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pp.177-186
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2011
This study describes for the first time in Pinus genus a plant regeneration system via a combined pathway of somatic embryogenesis and organogenesis from immature seeds of radiata pine. Somatic embryos were obtained from embryogenic line 2162 of Pinus radiata D. Don on EDM basal medium containing $60{\mu}M$ ABA and 6% sucrose. The explants used for organogenesis experiments were either freshly collected somatic embryos or somatic embryos germinated for 1 week. Germination medium was half-strength LP medium, supplemented with 0.2% activated charcoal. Different induction periods and BA concentrations were assayed for shoot induction. After induction treatments, explants were elongated on the same medium used for germination stage. Rooting medium was quarter-strength LP medium supplemented with three different auxin treatments: $1.5mg\;L^{-1}$ 1-naphthalene acetic acid (NAA), $1.5mg\;L^{-1}$ indole-3-butyric acid (IBA) and $1mg\;L^{-1}$ IBA with $0.5mg\;L^{-1}$ NAA (MIX). The effect of the photon flux ($120mmol\;m^{-2}\;s^{-1}$ and darkness) in the first week of the explants in the rooting media was also tested. This methodology could offer an alternative to overcome some problems associated with somatic embryogenesis such as the seasonality of embryogenic tissue (ET) initiation or a low embryo production from the ET, a particularly important issue in the case of genetically transformed ETs.
An efficient plant regeneration system has been developed for figleaf gourd (Cucurbita ficifolia Bouch$\'{e}$), which is exclusively used as a rootstock for cucumber. The protocol is based on results obtained from a series of culture experiments involving different parts of the cotyledons and various media. The culture of cotyledon explants was critical for the enhancement of shoot regeneration frequency. The lower parts of the cotyledon excised at the plumule base were found to display a markedly enhanced production of adventitious shoots compared to other cotyledon regions. Culture in silver nitrate-supplemented Murashige and Skoog (MS) medium was not beneficial for shoot regeneration and suppressed root regeneration. Efficient shoot regeneration was obtained on MS medium containing 1.0 $mg\;l^{-1}$ zeatin and 0.1 $mg\;l^{-1}$ indole-3-acetic acid. Regenerated shoots successfully elongated and rooted in medium containing 0.1 $mg\;l^{-1}$ 1-naphthalene-acetic acid after 10-15 days of subculturing. The plantlets were satisfactorily acclimatized in a greenhouse and grew into normal plants without any morphological alterations.
Proceedings of the Korea Concrete Institute Conference
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1995.04a
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pp.142-147
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1995
In this study, styrene-maleic anhydride copolymer (SMA) was synthesized from styrene and maleic anhydride and further reacted with sulfuric acid to obtain water-soluble SMA and the flow and strength tests of cement mortar mixed with copolymers were carried out to evaluate the capability of copolymers as high range water reducer for the concrete. It was found from flow experiment that the fluidity of cement mortar mixed with sulfonated SMA (SSMA) was larger than that miced with aminophenol-substituted SSMA (SmSMA). The decreasing rate of the flow of cement mortar mixed with SSMA and SmSMA was decreasing rate of the flow of cement mortar mixed with SSMA and SmSMA was significantly lower than that mixed with naphthalene condensate (NSC). The compressive strength of the hardened cement mortars containing 0.5% copolymers after 28 days curing was examined. The compressive strength of hardened cement mortar containing SSMA and SmSMA was increased up to 32% and 13%, respectively, when compared to the plain. As the results, the copolymers (SSMA and SmSMA) used in this study are greatly expected as a good high range water reducers for the concrete.
In vitro mass multiplication of Vanilla planifolia was investigated using node as explant. Multiple shoots were developed in MS medium supplemented with $2.0mgl^{-1}$ 6-benzylaminopurine and $1.0mgl^{-1}$$\alpha$-naphthalene acetic acid. Multiple shoots were maintained for 6-T weeks with regular subculturing at the end of $3^{rd}$ week onto fresh medium. The maximum number of shoots at the rate of 12.8 per node segment was achieved over a period of four weeks. The elongated shoots were separated from the shoot clusters and were transferred onto half strength MS medium supplemented with indole-3-acetic acid ($1.0mgl^{-1}$) over a period of 28 days for induction of roots. The development of roots was observed on $7^{th}$ day of incubation. The in vitro raised plantlets were transferred to poly-cups, covered with polyethylene sheets and maintained under shade net for 25 days for hardening. Finally these plants were transferred to field and recorded that 85 % of tissue cultured plants were survived. From the present study, a simple and efficient micropropagation protocol was developed for Vanilla planifolia using single node segments as explants.
The callus formation from inferior leaf of Aloe saponaria was induced in M & S medium supplemented with 10-30 ${\mu}M$ NAA (${\alpha}$-naphthalene acetic acid) and 3-7 ${\mu}M$ kinetin under incubation in the dark at $25^{\circ}C$ for 6 weeks. The hot water extract ($100^{\circ}C$, 24 hrs) from cultured callus was obtained and the components analysis for the extract were examined to determine the callus can synthesized the bioactive component such as Aloe polysaccharide. The freeze dried extract contained the sugar of 53.2%, protein of 7.3%, ash of 18.5% and water of 21% (w/w). Two fractions (Fr-I and Fr-II) were obtained by Sepharose CL-4B gel permeation chromatography and Fr-I, major fraction was further purified with dialysis. From sugar analysis by TLC and GC, the purified Fr-I fraction consisted of glucose (77.6%), galactose (17.7%), mannose (4.7%, w/w) and uronic acid (trace). The molecular weight of purified Fr-I fraction determined by GPC was about 110 kDa.
To establish in vitro nodal culture conditions of Echinosophora koreensis Nakai, one of rare and endangered species famous for beautiful flowers in the Korean Peninsula, the influence of plant growth regulators (PGRs) on shooting and rooting from in vitro shoots was investigated. In shoot multiplication, addition of 6-benzylaminopurine (BA) to the half-strength Driver and Kuniyuki's media in the range of 2.22 to 8.88 ${\mu}M $induced 2.5 to 2.7 shoots per axillary bud; and addition of 2.27 ${\mu}M $ thidiazuron (TDZ) produced 3.2 shoots, during 4 weeks of culture, while zeatin and isopentenyl adenine (2ip) were not effective on shoot multiplication as observed from several combination treatments of BA with other PGRs. Shoots established were smaller than 2 cm in length, in most of the treatments. while in BA 8.88 ${\mu}M $ treatment more than 30% of shoots were longer than 2 cm and shorter than 4 cm. In rooting, naphthalene acetic acid (NAA) from 5.37 to 21.48 ${\mu}M $ showed the rooting rate from 40.0 to 62.5%. Indole butyric acid (IBA) addition had little effect on rooting (<10%), although some roots in IBA-containing media were longer than those in NAA. Micropropagation from axillary buds of nodular explants was applicable and promising to multiplication and conservation of Echinosophora koreensis Nakai.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2020.12a
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pp.60-60
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2020
To establish in vitro axillary bud culture conditions of Echinosophora koreensis Nakai, one of Korean endemic endangered species famous for beautiful flowers, we tested the influence of plant growth regulators (PGRs) in shooting and rooting stage from in vitro plants. In shoot multiplication, addition of 6-benzylaminopurine (BA) to the media induced 2.5 to 3 shoots per bud during 4 weeks of culture. And media including 0.5 mg L-1 thidiazuron (TDZ) produced 3 to 4 shoots per bud. However, zeatin and isopentenyl adenine (2-ip) were not successful to increase shoot number, and the combination treatments of BA with other PGRs were also not effective. Shoots were smaller than 2 cm in length, in most of the treatments. In rooting, naphthalene acetic acid (NAA) treatments in the range of 0.5 to 4.0 mg L-1 appeared to increase rooting rate by 10% to 60% approximately when compared with the control but roots developed with callus clusters. Indole butyric acid (IBA) addition had little effect on rooting (below 10%), while some roots were longer than in NAA treatments and some shoots were longer on high IBA concentrations (4.0 to 8.0 mg L-1). It is suggested that micropropagation is a highly applicable and promising to multiplication and conservation of rare and endangered endemic species.
Binding mechanisms of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) with a purified Aldrich humic acid (PAHA) and its ultrafiltration (UF) size fractions were investigated. Organic carbon normalized binding coefficient ($K_oc$) values were estimated by both a conventional Stern-Volmer fluorescence quenching technique and a modified fluorescence quenching method. Pyrene $K_oc$ values depended on PAHA concentration as well as freely dissolved pyrene concentration. Such nonlinear sorption-type behaviors suggested the existence of specific interactions. Smaller molecular size PAH (naphthalene) exhibited higher $K_oc$ value with medium-size PAHA UF fractions whereas larger size PAH (pyrene) had higher extent of binding with larger PAHA UF fractions. The inconsistent observation for naphthalene versus pyrene was well explained by size exclusion effect, one of the previously suggested specific mechanisms for PAH binding. In general, the extent of pyrene binding increased with lower pH likely due to the neutralization of acidic functional groups in HS and the subsequent increase in hydrophobic HS region. However, pyrene $K_oc$ results with a large UF fraction (>100K Da) corroborated the existence of the size exclusion effect as demonstrated by an increase in $K_oc$ values at a certain higher pH range. The size exclusion effect appears to be effective only for the specific conditions (HS size or pH) that render HS hole st겨ctures to fit a target PAH.
Leaf explants of the cucumber (Cucumis sativus L.) were cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with various concentrations of $\alpha$-naphthalene acetic acid (NAA) and 6-benzylaminopurine (BAP). Direct shoot orgnogenesis as well as callus formation with somatic embryos and multiple shoots was observed from leaf explants of cvs. Shinhukjinju and Chungjang. The highest frequency of shoot formation 80% was observed on MS medium supplemented with NAA/BAP (5.0 ${\mu}{\textrm}{m}$/2.5 ${\mu}{\textrm}{m}$), with explants forming 3-7 shoots. Shoots formation occured within 3 to 4 weeks. Only one subculture of calli was required for plant regeneration on normal growth regulator-free medium. Plantlets transferred to soil developed into plants of normal appearance, which flowered and set fruits.
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