The biosynthesis of cephalexin was carried out in the aqueous two-phase systems using penicillin acylase as a catalyst, and 7-aminodeacetoxicephalosporanic acid (7-ADCA) and phenylglycine methyl ester (PGME) as substrates. 20% PEG400-l7.5% ${(NH_4)}_2SO_4$ containing 0.5 M NaCl and 1.5 M methanol aqueous two-phase systems (ATPS) were selected as reaction medium, and 53% product yield was obtained using immobilized penicillin acylase as a catalyst. 20% PEG400-l5% $MgSO_4$ ATPS was also used for the synthesis of cephalexin, and 60-62% product yield was obtained by using free penicillin acylase as a catalyst. When batch reactions were repeated in the ATPS, the cephalexin yields decreased during the reactions due to deactivation, loss, and product inhibition of penicillin acylase. The effect of different ratio of phenylglycine methyl ester to 7-ADCA on the product yield was investigated, and high cephalexin yield was obtained at a high molar ratio.
Serratiopeptidase (SRP), a 50 kDa metalloprotease produced from Serratia marcescens species, is a drug with potent anti-inflammatory property. In this study, a powerful statistical design, evolutionary operation (EVOP), was applied to optimize the media composition for SRP production in shake-flask culture of Serratia marcescens NRRL B-23112. Initially, factors such as inoculum size, initial pH, carbon source, and organic nitrogen source were optimized using one factor at a time. The most significant medium components affecting the production of SRP were identified as maltose, soybean meal, and $K_2HPO_4$. The SRP so produced was not found to be dependent on whey protein, but rather was notably induced by most of the organic nitrogen sources used in the study and free from other concomitant protease contaminant, as revealed by protease inhibition study. In addition, experiments were performed using different sets of EVOP design with each factor varied at three levels. The experimental data were analyzed with a standard set of statistical formula. The EVOP-optimized medium, with maltose 4.5%, soybean meal 6.5%, $K_2HPO_4$ 0.8%, and NaCl 0.5% (w/v), gave a SRP production of 7,333 EU/ml, which was 17-fold higher than the unoptimized media. The application of EVOP resulted in significant enhancement of SRP production.
Lactic acid and its derivatives are widely used in the food, pharmaceutical, and cosmetic industries. It is also a major raw material for the production of poly-lactic acid (PLA), a biodegradable and environmentally friendly polymer and a possible alternative to synthetic plastics derived from petroleum. For PLA production by new strains of lactic acid bacteria (LAB), we screened LAB isolates from shellfish. A total of 51 LAB were isolated from 7 types of shellfishes. Lactic acid production of individual isolates was examined using high-performance liquid chromatography using a Chiralpak MA column and an ultraviolet detector. Lactobacillus plantarum T-3 was selected as the most stress-resistant strain, with minimal inhibition concentrations of 1.2 M NaCl, 15% ethanol, and 0.0020% hydrogen peroxide. In a 1 L fermentation experiment, $\small{D}$-lactic acid production of 19.91 g/L fermentation broth was achieved after 9 h cultivation, whereas the maximum production of total lactic acid was 41.37 g/L at 24 h.
Kim, Jong-Moon;Oh, Byul-Nim;Kim, Jin-Heung;Kim, Seog-K.
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제33권4호
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pp.1290-1296
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2012
Fenton reaction and iron autoxidation have been debated for the major process in ROS mediated DNA cleavage. We compared both processes on iron oxidation, DNA cleavage, and cyclic voltammetric experiment at different pHs. Both oxidation reactions were preferred at basic pH condition, unlike DNA cleavage. This indicates that iron oxidation and the following steps probably occur separately. The ROS generated from autoxidation seems to be superoxide radical since sod exerted the best inhibition on DNA cleavage when $H_2O_2$ was absent. In comparison of cyclic voltammograms of $Fe^{2+}$ in NaCl solution and phosphate buffer, DNA addition to phosphate buffer induced significant change in the redox cycle of iron, indicating that iron may bind DNA as a complex with phosphate. Different pulse voltammogram in the presence of ctDNA suggest that iron ions are recyclable at acidic pH, whereas they may form an electrically stable complex with DNA at high pH condition.
Interspecific fusants were made from the cells of two strains of Lactobacillus genus, a streptomycin resistant Lactobacillus sp. JC-7 and a kanamycin resistant L. acidophilus 88. The morphological and physiological properties of the fusants were examined by determining bacteriocin productivity, acid-producing activity, ability of carbohydrates utilization and three important enzyme activities. The fusants produced a bacteriocin against indicator strains and fusant No. 1, 4 exhibited a larger inhibition zone compared to that of L. acidophilus 88. $\beta$-Galactosidase, phospho-$\beta$-galactosidase, lipase activities and resistance to NaCl of Lactobacillus sp. JC-7 were better than those of L. acidophilus 88. Fusant No. 3 and 7 exhibited excellent lipase activities. Protease activity and acid productivity of L. acidophilus 88 were better than those of Lactobacillus sp. JC-7. Proteasse activities of all fusants were higher than those of parental strains, and expecially fusant No. 5 and 7 exhibited excellent proteolysis ability.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제1권1호
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pp.73-78
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2000
We investigated some biochemical properties of acetylcholinesterase (AChE) in the Bombyx mori larval head. 1% Triton X-100 (v/v) was suitable for extracting AChE from the silkworm larval head but 1 M NaCl was not suitable. PAGE analysis showed a single band of AChE that was detected by histochemical staining using acetylthiocholine as a substrate. AChE was also partially purified with Sepharose 6B and DEAE-cellulose column. Finally, the specific activity of partially purified enzyme solution was 7.6. The study on inhibitor specificity indicated that the enzyme under study was a true cholinesterase (ChE) or AChE. AChE activity was maximum at the substrate concentration of $5{\times}10^{-4}$ M and the excess substrate inhibited the AChE activity. The optimal pH and temperature were pH 7.0-9.0 and 30-35$^{\circ}C$.
Park, Su Bin;Kim, Ha Na;Kim, Jeong Dong;Jeong, Jin Boo
한국자원식물학회:학술대회논문집
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한국자원식물학회 2019년도 춘계학술대회
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pp.93-93
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2019
In this study, we evaluated the anti-cancer activity and potential molecular mechanism of 70% ethanol extracts of branches from Taxillus yadoriki parasitic to Neolitsea sericea (TN-NS-B) against human lung cancer cells, A549. TY-NS-B dose-dependently suppressed the growth of A549 cells. TY-NS-B decreased ${\beta}$-catenin protein level, but not mRNA level in A549 cells. The downregulation of ${\beta}$-catenin protein level by TY-NS-B was attenuated in the presence of MG132. Although TY-NS-B phosphorylated ${\beta}$-catenin protein, the inhibition of $GSK3{\beta}$ by LiCl did not blocked the reduction of ${\beta}$-catenin by TY-NS-B. In addition, TY-NS-B decreased ${\beta}$-catenin protein in A549 cells transfected with Flag-tagged wild type ${\beta}$-catenin or Flag-tagged S33/S37/T41 mutant ${\beta}$-catenin construct. Our results suggested that TN-NS-B may downregulate ${\beta}$-catenin protein level independent on GSK3${\beta}$-induced ${\beta}$-catenin phosphorylation. Based on these findings, TY-NS-B may be a potential candidate for the development of chemopreventive or therapeutic agents for human lung cancer.
Kim, Ha Na;Park, Su Bin;Kim, Jeong Dong;Jeong, Jin Boo
한국자원식물학회:학술대회논문집
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한국자원식물학회 2019년도 춘계학술대회
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pp.92-92
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2019
In this study, we evaluated the effect of branch (STB) and leave (STL) extracts from Sageretia thea on ${\beta}$-catenin level in human colorecal cancer cells, SW480 and lung cancer cells, A549. STB and STL dose-dependently suppressed the growth of SW480 and A549 cells. STB and STL decreased ${\beta}$-catenin level in both protein and mRNA level. MG132 decreased the downregulation of ${\beta}$-catenin protein level induced by STB and STL. However, the inhibition of $GSK3{\beta}$ by LiCl or ROS scavenging by NAC did not block the reduction of ${\beta}$-catenin protein by STB and STL. Our results suggested that STB and STL may downregulate ${\beta}$-catenin protein level independent on $GSK3{\beta}$ and ROS. Based on these findings, STB and STL may be a potential candidate for the development of chemopreventive or therapeutic agents for human colorectal cancer and lung cancer.
$Ag^+$ 이온을 주성분으로 하는 $Ag^+N$과 $Ag^0$ 나노입자를 주성분으로 하는 $Ag^0NP$의 미생물학적 독성을 Microtox 생물검정법을 이용하여 수용액과 토양에서 용량-반응관계를 이용하여 비교, 평가하였다. 수용액 실험에서 Vibrio fisheri의 50% 발광 저해율을 보여주는 $EC_{50}$ 값은 $Ag^+N$이 $Ag^0NP$ 보다 현저히 낮게 나타나, 이온상태의 $Ag^+N$이 독성이 훨씬 높음을 알 수 있었다. 노출시간이 15분에서 30분으로 증가하면 독성 또한 증가했다. 반대로 토양 추출액 실험에서는 $Ag^+N$의 $ED_{50}$ 값이 $Ag^0NP$의 값 보다 높아, $Ag^+N$의 독성이 더 낮게 나타났다. 이것은 $Ag^+N$의 $Ag^+$가 토양 입자 또는 부식산에 강하게 흡착 되거나, Microtox 희석제 NaCl과 반응하여 난용해성 AgCl 침전물을 형성하여, 토양 추출액 중의 활성 Ag 농도가 감소한 것에 기인하는 것으로 판단되었다. Microtox 분석에 의한 Ag 나노용액의 생물학적 독성은 Ag의 존재형태 ($Ag^+$, $Ag^0$), 반응매질 (수용액, 토양), 노출시간에 따라 서로 상이한 결과를 보여 주었다.
백서에서 실험적 치아 이동시 bisphosphonate가 파골세포의 형성에 미치는 영향과 골 흡수 억제기전을 규명하고 독성유무를 알아보고자 하였다. 체중 260-350g의 웅성 백서 87마리를 정상군(장치비장착 + $0.9\%$ NaCl), 대조군(장치장착 + $0.9\%$ NaCl) 및 장치장착후 bisphosphonate 투여군(0.8 mg, 4 mg, 20 mg, 및 100 mg/kg) 으로 분류하였다. 상악 좌측 제1대구치를 근심으로 치아이동이 일어나도록 50-70g의 교정력을 가하고, 교정장치 장착후 1일, 3일 및 7일째에 혈청 acid phosphatase와 lactate dehydrogenase (LDH)의 활성도를 측정하고, 또한 제1 대구치를 포함한 상악골 일부에서 파골세포수 및 골흡수 정도를 조직학적으로 관찰하여 다음과 같은 성적을 얻었다. 1. Acid phosphatase 활성도는 장치후 1일째와 3일째에 대조군과 bisphosphonate 투여군에서 모두 정상군에 비해 2-3배 높았으나, 7일째에는 정상군과 유의한 차이를 보이지 않았다. 2. LDH활성도는 bisphosphonate 4 mg과 20 mg/kg 투여군에서 전 실험기간에 걸쳐 증가된 양상을 보였으나 0.8 mg과 100 mg/kg 투여군에서는 유의한 차이를 나타내지 않았다. 3. 골흡수는 장치후 1일째에 대조군과 bisphosphonate투여군에서 모두 관찰되지 않았으나, 3일 이후에 나타나 7일째까지 지속되었다. Bisphosphonate 4, 20 및 100 mg/kg군에서의 골흡수정도는 3일째에는 대조군에 비해 미약하였으나 7일째에는 대조군과 유사하게 나타났다. 4. 파골세포는 1일째에 대조군이나 bisphosphonate투여군 모두에서 거의 관찰할 수 없었다. 3일째에 대조군에서는 파골세포가 다량 출현하였으나 bisphosphonate 투여군에서는 약물의 용량이 증가함에 따라 감소하여 나타났다. 이상의 결과로 실험적 치아이동시 파골세포의 형성억제가 bisphosphonate에 의한 골흡수 억제기전이 아님을 알 수 있었고, bisphosphonate는 투여량이 증가에 따른 뚜렷한 세포독성은 관찰되지 않았으며, 골흡수 억제효과를 지속시키기 위해서는 약물이 반복적으로 투여되어야 할 필요가 있음이 시사되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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