Sodium butyrate (NaBu) has been used to enhance protein expression levels in mammalian cell culture. To determine the clonal variability of recombinant Chinese hamster ovary (rCHO) cells in response to NaBu addition regarding specific antibody productivity $(q_{Ab})$, three rCHO clones were subjected to different concentrations of NaBu. For all three clones, NaBu addition inhibited cell growth and decreased cell viability in a dose-dependent manner. On the other hand, the enhancing effect of NaBu on $q_{Ab}$ varied significantly among the clones. NaBu addition enhanced the antibody production of only one clone. RT-PCR analysis revealed that the changes in $q_{Ab}$ correlated linearly with those of the mRNA transcription level. Thus, it was concluded that the different enhancing effects of NaBu on protein expression in rCHO cell clones resulted from their different mRNA transcription levels.
The importance of the kidney in the development of hypertension was first demonstrated by Goldblatt and his colleagues more than fifty years ago. Many hormones and other regulatory factors have been proposed to play a major role in the development of hypertension. Among these factors angiotensia II (ANG II) is closely involved in renal hypertension development since it directly regulates $Na^+$ reabsorption in the renal proximal tubule. Thus the aim of the present study was to examine signaling pathways of low dose of ANC II on the $Na^+$ uptake of primary cultured rabbit renal proximal tubule cells (PTCs) in hormonally defined seum-free medium. The results were as follows: 1) $10^{-11}$ M ANG II has a significant stimulatory effect on growth as compared with control. Alkaline phosphatase exhibited significantly increased activity. However, leucine aminopeptidase and ${\gamma}-glutamyl$ transpeptidase activity were not significant as compared with control. In contrast to $10^{-11}$ M ANG II stimulated $Na^+$ uptake $(108.03{\pm}2.16% of that of control)$, $10^{-9}$ M ANG II inhibited ($92.42{\mu}2.23%$ of that of control). The stimulatory effect of ANG II on $Na^+$ uptake was amiloride-sensitive and inhibited by losartan (ANG II receptor subtype 1 antagonist) and not by PD123319 (ANG II receptor subtype 2 antagonist). 2) Pertussis toxin (PTX) alone inhibited $Na^+$ uptake by $85.52{\pm}3.52%$ of that of control. In addition, PTX pretreatment prevented the AMG II-induced stimulation of $Na^+$ uptake. 8-Bromoadenosine 3',5'-cyclic monophosphate (8-Br-cAMP), forskolin, and isobutylmethylxanthine (IBMX) alone inhibited $Na^+$ uptake by $88.79{\pm}2.56,\;80.63{\pm}4.38,\;and\;84.47{\pm}4.74%$ of that of control, respectively, and prevented the ANG II-induced stimulation of $Na^+$ uptake. However, $10^{-11}$ M ANG II did not stimulate cAMP production. 3) The addition of 12-O-te-tradecanoylphorbol-13-acetate (TPA, 0.01 ng/ml) to the PTCs produced significant increase in $Na^+$ uptake ($114.43{\pm}4.05%$ of that of control). When ANG II and TPA were added together to the PTCs, there was no additive effect on $Na^+$ uptake. Staurosporine alone had no effect on $Na^+$ uptake, but led to a complete inhibition of ANG II- or TPA-induced stimulation of Na'uptake. ANG II treatment resulted in a $111.83{\mu}4.51%$ increase in total protein kinase C (PKC) activity. In conclusion, the PTX-sensitive PKC pathway is the main signaling cascade involved in the stimulatory effects of ANG II on $Na^+$ uptake in the PTCs.
Objectives: Phytic acid (IP6), a naturally occurring agent, has been previously reported as a potential alternative to ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA). However, its effect on adhesion to sodium hypochlorite (NaOCl)-treated dentin and its interactions with NaOCl have not been previously reported. Thus, in this study, the effects of IP6 on resin adhesion to NaOCl-treated dentin and the failure mode were investigated and the interactions between the used agents were analyzed. Materials and Methods: Micro-tensile bond strength (µTBS) testing was performed until failure on dentin treated with either distilled water (control), 5% NaOCl, or 5% NaOCl followed with chelators: 17% EDTA for 1 minute or 1% IP6 for 30 seconds or 1 minute. The failed specimens were assessed under a scanning electron microscope. The reaction of NaOCl with EDTA or IP6 was analyzed in terms of temperature, pH, effervescence, and chlorine odor, and the effects of the resulting mixtures on the color of a stained paper were recorded. Results: The µTBS values of the control and NaOCl with chelator groups were not significantly different, but were all significantly higher than that of the group treated with NaOCl only. In the failure analysis, a distinctive feature was the presence of resin tags in samples conditioned with IP6 after treatment with NaOCl. The reaction of 1% IP6 with 5% NaOCl was less aggressive than the reaction of the latter with 17% EDTA. Conclusions: IP6 reversed the adverse effects of NaOCl on resin-dentin adhesion without the chlorine-depleting effect of EDTA.
Aconiti tuber butanol fraction shows positive inotropic effect on the isolated atrium of rabbit heart. To investigate the mechanism, the effect on microsomal ATPase activity of rabbit heart is observed. The microsomal fraction which contains the $Na^+$- and $K^+$-activated ATPase in the presence of $Mg^{++}$ is isolated from the left ventricle of rabbit heart. The microsomal ATPase activity is maximally stimulated at $Na^+$ and $K^+$ concentration of 100 mM and 10 mM respectively. Microsomal $Na^+-K^+$-activated ATPase is inhibited by ouabain and Aconiti tuber butanol fraction. Ouabain and Aconiti tuber butanol fraction depress $Na^+$-stimulation on microsomal ATPase activity, and the inhibitory effects are not completely reversed at $Na^+$ concentration of 300 mM. Also, $K^+$-stimulation on microsomal ATPase activity is inhibited by ouabin and Aconiti tuber butanol fraction and the inhibitions are not compeletely reversed at $K^+$ concentration of 30 mM. It is, therefore, suggested that the inhibitory effect of Aconiti tuber butanol fraction on the microsomal ATPase activity may contribute to leading to the positive inotropic effect.
We have studied the effect of fasting on $Na^+$, $K^{+}-ATPase$ activities in the rat intestinal mucosa. Rats were fasted for $18{\sim}48hr$. Intestinal microsomal fraction was prepared by the method of Robinson and ATPase activities were determined by the modified method of Fiske and Subbarow. $Na^+$, $K^{+}-ATPase$ activity was not changed after fasting for 18 and 24 hr but significantly decreased after fasting for 48 hr. Fasting over 18 to 48 hr period had no effect on the $Mg^{++}-ATPase$. Thus, it may be concluded that 48 hr fasting has inhibitory effect on rat intestinal absorptive capabilities. In order to study the effect of Ginseng on the $Na^+$, $K^{+}-ATPase$ activities of the small intestine in chronic $K^{+}-depleted$ rats, rats were fed $K^{+}-depleted$ diets for 3 weeks and Ginseng ethanol extracts were administered orally for 3 weeks concomitantly. ATPase activity was measured by the same method as fasting group. $Na^+$, $K^{+}-ATPase$ activity in the $K^{+}-depleted$ diet group was increased and Ginseng ethanol extracts inhibited the increase of enzyme activity induced by $K^{+}-depleted$ diet. Thus, it may be suggested that increase in the intestinal $Na^+$, $K^{+}-ATPase$ activity of chronic $K^{+}-depleted$ group may be due to the compensatory mechanism and administration of Ginseng with $K^{+}-depleted$ diet may be associated with inhibition of increase in the enzyme activity of the $K^{+}-depleted$ group due to the prevention of the $K^+$ loss in the $K^{+}-depletion$.
본 연구는 급속상악확대술 시행 후 보정기간중에 지대치의 압박측 치근흡수에 불화나트륨의 경구 투여가 영향을 미치는지를 알아보기 위하여 시행되었다. 이차성징을 아직 나타내지 않은 10마리 소아기 암캐에 견치를 주지대치로 사용하는 주조형 상악 확대장치를 제작, 장착하였다 상악확대장치는 20일간에 걸쳐 5mm 확장시켰으며, 교합면 방사선사진을 이용하여 정중구개봉합의 이개를 확인하였다. 실험동물은 실험군 5 마리와 대조군 5 마리로 나뉘었으며, 보정기간 중 실험군에는 2.2 mg/kg/day의 불화나트륨 (불소로서 1.0mg/kg/day)을 캅셀제의 형태로 1 일 2 회로 나누어 단독 경구 투여하였다. 실험동물들을 보정 후 0 일, 15 일, 30 일, 45 일, 및 60 일째에 각 군당 한 마리씩 배정하여 충분한 마취로 희생시킨 후 상악골을 절취하였다. 이후 실험동물의 좌측 상악 견치의 압박측 치근표면과 압박측 견치 협면을 덮고 있던 골 조직의 치아측 표면을 주사전자현미경을 이용하여 관찰하였다. 본 실험에서 압박측 치근표면을 관찰한 결과 45일 보정군과 60일 보정군의 대조군에서 흡수소와가 발현되는 빈도가 높았다. 지대치 압박측 치근을 덮는 골면에 나타나는 흡수소와의 발현은 30일의 보정기간 이후부터 실험군에서 적게 나타남을 알 수 있었다. 차후 급속상악확대술을 시행하는 경우 효과적인 NaF의 투여시기와 용량에 대한 검증이 필요하리라 생각된다.
The effect of Sam Hwa San on the Na-K-ATPase activity was evaluated in microsomal fraction prepared from rabbit cerebral cortex to determine whether Sam Hwa San affects Na-K-ATPase activity of nervous system. Sam Hwa San markedly inhibited the Na-K-ATPase activity in a dose-dependent manner with an estimated $I_{50}$ of 0.12%. Optimal pH for the Na-K-ATPase activity was at 7.5 in the presence or absence of Sam Hwa San. The degree of inhibition by the drug more increased at acidic and alkalic pHs than neutral pH. Kinetic studies of substrate and cationic activation of the enzyme indicate classic noncompetitive inhibition fashion for ATP, Na and K, showing significant reduction in Vmax without a change in Km. Dithiothreitol, a sulfhydryl reducing reagent, partially protects the inhibition of Na-K-ATPase activity by Sam Hwa San. Combination of Sam Hwa San and ouabain showed higher inhibition than cumulative inhibition. These results suggest that Sam Hwa San inhibits Na-K-ATPase activity in central nervous system by reacting with, at least a part, sulfhydryl group and ouabain binding site of the enzyme protein, but with different binding site from those of ATP, Na and K.
This study developed probabilistic models to describe Listeria monocytogenes growth responses in meat products with low concentrations of NaNO2 and NaCl. A five-strain mixture of L. monocytogenes was inoculated in NBYE (nutrient broth plus 0.6% yeast extract) supplemented with NaNO2 (0-141 ppm) and NaCl (0-1.75%). The inoculated samples were then stored under aerobic and anaerobic conditions at 4, 7, 10, 12, and 15℃ for up to 60 d. Growth response data [growth (1) or no growth (0)] for each combination were determined by turbidity. The growth response data were analyzed using logistic regression to predict the growth probability of L. monocytogenes as a function of NaNO2 and NaCl. The model performance was validated with the observed growth responses. The effect of an obvious NaNO2 and NaCl combination was not observed under aerobic storage condition, but the antimicrobial effect of NaNO2 on the inhibition of L. monocytogenes growth generally increased as NaCl concentration increased under anaerobic condition, especially at 7-10℃. A single application of NaNO2 or NaCl significantly (p<0.05) inhibited L. monocytogenes growth at 4-15℃, but the combination of NaNO2 or NaCl more effectively (p<0.05) inhibited L. monocytogenes growth than single application of either compound under anaerobic condition. Validation results showed 92% agreement between predicted and observed growth response data. These results indicate that the developed model is useful in predicting L. monocytogenes growth response at low concentrations of NaNO2 and NaCl, and the antilisterial effect of NaNO2 increased by NaCl under anaerobic condition.
본 연구는 항생제인 naliidixic acid (NA)에 내성이 있는 Salmonella tyhimurium에 대한 녹차폴리페놀(TPP)와 NA의 시너지적 살균효과와 세포반응을 조사하기 위하여 수행되었다. 초기세포밀도$10^7$ cell/ml의 S. typhimurium에 대한 살균효과는 $>3,500{\mu}g/ml$ TPP와 $<256{\mu}g/ml$ NA에서 조사하였다. NA 감수성인 S. tyhimurium은 $3,500{\mu}g/ml$ TPP 또는 $256{\mu}g/ml$ NA의 농도에서 6시간 이내에 완전히 제거되었으나, 동일한 조건하에서 NA 내성 S. typhimurium은 일부만이 살균되었다. 그러나 NA 감수성 인 S. typhimurium에 대한 $3,000{\mu}g/ml$ TPP과 $32{\mu}g/ml$ NA의 병용, 그리고 NA 내성인 S. typhimurium에 대한 $3,500{\mu}g/ml$ TPP과 $64{\mu}g/ml$ NA의 병용으로 5시간 이내에 완전한 살균효과를 나타내었다. 스트레스 단백질이 이들 S. typhimurium에 대한 스트레스 원으로서 TPP와 NA에 대한 반응으로 유도되었다. SDS-PAGE와 Western blot에 의하여 그 단백질들은 70-kDa의 DnaK와 60-kDa의 GroEL로 동정되었다. 스트레스에 의해 유도된 단백질은 TPP나 NA의 노출량에 비례하여 증가하였다. 주사전자 현미경 분석에 의하여 TPP나 NA에 의해 처리된 세포는 세포표면에 구멍 이 나고 불규칙적인 막대모양으로 관찰되었다.
To control the hydrolysis rate of PET fabric with NaOH, HCl and $CH_3$COOH(HAc), as regulating reagent, were added to the 0.5 M NaOH solution. The concentrations of acids in 0.5 M NaOH were varied. PET fabrics were treated with aqueous solutions of acids in 0.5 M NaOH under different conditions. The weight loss of PET fabric, the rate of hydrolysis, the apparent activation energy (E$_{\alpha}$), the handle value, the etched surface of treated PET fabric, and the effect of salts such as NaCl, $CH_3$COONa(NaAc), and NH$_4$Cl on the weight loss were discussed. Acids in the aqueous 0.5 M NaOH solution decreased the weight loss of PET fabric bacause of neutralization of OH- and the weight loss of PET fabrics treated with corresponding concentration of aqueous NaOH solution to the concentrations of the aqueous solutions of acids in 0.5 M NaOH was lower than that of PET fabrics treated with aqueous solutions of acids in 0.5 M NaOH. The addition of NaCl to aqueous NaOH solution accelerated the reaction of OH- with PET greatly, the addition of NaAc increased the weight loss slightly, but the addition of NH$_4$Cl decreased the weight loss. It was thought that the very remarkable result that NaCl in aqueous NaOH solution promoted the hydrolysis of PET with NaOH would contribute to the conservation of energy and NaOH in the weight loss finishing process of PET fabric. The etched surface and the handle value of treated PET fabric were independent of the difference in the kinds of acids and salts added.nd salts added.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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