• 한국응용곤충학회지
• /
• 제28권3호
• /
• pp.105-112
• /
• 1989

누에(Bombyx mori)와 흰불나방(Hyphantria cunea)으로 부터 분리된 핵다각체병바이러스(nuclear polyhedrosis virus: NPV)를 동정하기 위하여 전자현미경 관찰한 결과, BmNPV 다각체의 크기는 $3 \mu\textrm{m}$ 정도의 18면체로 외형이 균일하였으나, HcNPV는 1.5-$2 \mu\textrm{m}$ 정도이며 부정형이었다. Alkaline protease를 부활화시킨 후 SDS-PAGE한 다각체 단백질의 分子물은 BmNPV가 30 KD, HcNPV는 31 KD인 major band와 이들의 중합체(polymer)로 생각되는 57 KD, 112 KD의 minor band들이 관찰되었다. 또한 virion 단백질을 SDS-PAGE한 후 은염색한 결과, BmNPV는 분자량 9.6~112 KD인 47개의 band, HcNPV 경우는 분자량 9.4~l11 KD인 48개는 band가 관찰되었다. BmNPV와 HcNPV DNA의 제한효소 처이에 의한 전기영동 패턴을 관찰했으며, 각각의 genome 크기는 BmNPV가 약 116.4 Kb, HcNPV의 약 114.6 Kb였다.

• 한국잠사학회:학술대회논문집
• /
• 한국잠사학회 1997년도 Progress and Future Development of Sericultural Science and Technology 40th Anniversary Commemoration Symposium
• /
• pp.73-101
• /
• 1997

Baculoviruses are characterized by large double-stranded circular DNA genomes and rod-shaped enveloped virions. Bombyx mori nucleopolyhedrovirus(BmNPV) is a major pathogen, which causes severe damage in sericulture. Currently, BmNPV is recogtnized as an improtant tool in molecular biology, especially for expression of useful genes in B.mori cells and silkworm larvae. Our laboratories have focused on the studies of the molecular mechanisms of BmNPV replication and the application of BmNPV to agriculture and medicine. The entire nucleotide sequence of the BmNPV genome has recently determined. The BmNPV genome possessed 135 putative genes and 7 homologous repeated sequence (hrs) regions. Relatively little space, a few to a few hundred base-pairs, was observed between the open reading frames and hrs. Termination codons often overlapped. These results showed a compactly packde BmNPV genome. Based on comparative sequence analyses, we speculated that the ancestor of BmNPV was a baculovirus similar to Autographa californica NPV(AcNPV). The function of the BmNPV genes were characterized by gene deletion analysis; p35 was found to be involved in blocking apoptosis and cysteine proteinase was found to be involved in horizontal virus transmission by degrading viral-infected larval host. By AcNPV and BmNPV coinfection experiments, we identified a BmNPV gene involved in expanding host specificity of AcNPV. The identified gene was likely encoded a DNA helicase based on the amino acid sequence analysis; a few amino acid substitutions in the putative DNA helicase gene resulted in the expansion of host range of AcNPV. These findings indicate that BmNPV evolved within a short period from an AcNPV-like ancestral virus due to rapid evolution including specific amino acid substitutions and gene deletions/insertions.

• 한국유기농업학회지
• /
• 제31권4호
• /
• pp.395-412
• /
• 2023

광식성 난방제 해충인 미국흰불나방(Hyphantria cunea)의 친환경 방제를 위한 바이러스 살충제의 소재 활용을 위해서 국내에서 분리된 미국흰불나방 핵다각체병바이러스(H. cunea nucleopolyhedrovirus W1: HycuNPV-W1)의 다각체 형태 및 전장 유전체 서열을 결정하고 분석하였다. HycuNPV-W1의 다각체는 1.5-2.2 um 크기의 사면체에 가까운 부정형으로 확인되었다. 전장 유전체의 염기서열을 결정한 결과, 기존에 보고된 HycuNPV와 비교할 때 1,606 bp 더 짧은 131,353 bp로 확인되었다. 그러나 G+C 함량은 45%였으며 상동반복영역은 6개로 기존에 보고된 HycuNPV와 차이는 확인할 수 없었다. ORF 분석에서는 HycuNPV-W1은 기존의 HycuNPV와 비교할 때 3개의 ORF가 더 적은 145개를 가졌으나, HycuNPV-W1에만 존재하는 2개의 ORF가 확인되었다. 이들 ORF의 기능은 현재까지 밝혀지지 않았으나 바이러스의 생물학적 특성에 큰 영향을 주지 않을 것으로 추정되었다. 유전체의 vista 분석 결과에서는 HycuNPV-W1과 기존 HycuNPV의 전체 염기서열 유사도가 매우 높은 것으로 확인되었다. 국내에서 처음으로 분석한 HycuNPV-W1의 전장 유전체는 기존의 HycuNPV와 매우 유사한 것으로 나타났으나, 독자적인 특성을 가진 서로 다른 분리주로 국내 고유자원임을 확인할 수 있었다.

• 한국응용곤충학회지
• /
• 제61권3호
• /
• pp.449-460
• /
• 2022

광식성 난방제 해충인 파밤나방(Spodoptera exigua)의 친환경적 방제원으로써 이용을 위해 국내에서 분리된 파밤나방 핵다각체병바이러스(S. exigua nucleopolyhedrovirus K1: SeNPV-K1)의 형태 및 전체 유전체 서열을 분석하였다. SeNPV-K1의 다각체(polyhedra)는 0.6-1.8 um 크기의 부정형으로, 기 보고된 SeNPV와 외형적 차이는 보이지 않았다. 전체 유전체의 염기서열을 분석한 결과, 기 보고된 SeNPV와 비교할 때 145 bp 더 많은 135,756 bp로 확인되었으며, G+C 함량은 44% 였고 상동반복영역은 6개로 두 바이러스간에 차이는 없었다. ORF 분석결과, SeNPV-K1은 기 보고된 것과 비교할 때 2개 더 적은 137개를 가지며, SeNPV-K1에만 존재하는 ORF는 4개가 확인되었다. 이들 4개의 ORF는 비필수 유전자로 바이러스의 특성에는 큰 영향을 주지 않을 것으로 여겨졌다. 유전체의 vista 분석 결과, SeNPV-K1과 기 보고된 SeNPV의 전체 염기서열 유사도가 매우 높은 것으로 확인되었다. 국내에서 처음으로 분석한 SeNPV-K1의 전체 유전체는 기 보고된 SeNPV와 유사한 것으로 나타났으나 서로 다른 분리주로 국내 고유자원임을 확인하였다.

• 한국잠사곤충학회지
• /
• 제38권1호
• /
• pp.36-41
• /
• 1996

AcNPV 와 BmNPV의 배양세포주에서의 동시감염에 의해 선발된 재조합 바이러스 RecS-A6는 그 다각체 외부 형태가 모바이러스와 다를뿐만 아니라 배양 세포주에 따라서도 그 형태에 차이가 있었다. 이러한 다각체의 특징적인 형태가 나타나는 요인을 다각체 단백질 유전자를 중심으로 조사한 결과 RecS-A6는 AcNPV 와 BmNPV의 다각체 단백질 유전자를 모두 갖고 있는 것이 확인되었으며, 또한 RecS-A6의 다각체를 단백질 전기영동하여 분석한 결과 RecS-A6의 다각체를 단백질 전기영동하여 분석한 결과 AcNPV와 BmNPV의 다각체 단백질이 모두 다각체 형성에 이용되었음을 확인할 수 있었다.

• 한국응용곤충학회지
• /
• 제30권2호
• /
• pp.144-149
• /
• 1991

국내에서 분리된 파밤나방 핵다각체병바이러스(Spodoptera exigua nuclear polyhedrosis virus: SeNPV)의 생화학적인 특성을 규명하기 위하여 몇가지 실험을 행하였다. SeNPV는 하나의 envelopeso내에 다수의 nucleocapsid가 존재하는 MNPV(multiple embeded NPV)형태였다. 다각체단백질은 분자량 30kb의 단일 band로 나타났으며, Spodoptera litura NPV와 Bombyx mori NPV의 다각체단백질 항체에 반응하여 뚜렷한 침강선을 형성하였다. 비리온 단백질을 은염색한 결과, 많은 수의 minor band들이 포함된 49개의 band로 나타났으며, 바이러스 DNA를 분리하여 여러종의 제한효소에 의한 대략적인 genome size는 약 110kb 였다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
• /
• 제3권1호
• /
• pp.13-18
• /
• 2001

The role of polyhedrin in the polyhedra production in baculovirus Autograha californica Nucelopolyhedro-sisvirus (AcNPV) was studied by over-expression of AcNPV polyhedrin or heterologous polyhedrin from Bombyx mori (Bm) NPV or Spodoptera exigua (Se) NPV. The transfer vectors containing additional polyhedrin from AcNPV, BmNPV, or SeNPV were constructed and cotransfected with bacmid bApGOZA into Sf9 cells. The resulting recombinants, designated as vApAcPol, vApBmPol, and vApSePol were tonstructed, and the polyhedra production of the recombinant was characterized. All of the recombinants produced polyhedra in the nucleus, and the polyhedrin was over-expressed. Among three recombinants, vApAcPol and vApBmPol were discriminated by their larger polyhedra size than that of wild type AcNPV, and vApSePol also produced larger polyhedra than wild type SeNPV polyhedra.

• 한국잠사곤충학회지
• /
• 제38권1호
• /
• pp.42-47
• /
• 1996

AcNPV와 BmNPV를 배양세포주에서 동시감염시켜 선발한 숙주범위가 넓어진 재조합 바이러스인 RecB-727과 RecS-A6의 분자생물학적인 특성들을 조사하였다. 재조합 바이러스의 LT50 값을 조사한 결과, RecS-A6는 모바이러스인 BmNPV 보다 비교적 낮은 병원성을 보았으나 RecB-727은 거의 비슷한 수준의 높은 병원성을 나타내었다. 재조합 바이러스 DNA를 분리하여 모바이러스 DNA와 함께 제한효소 패턴을 비교한 결과 DNA 수준에서 재조합이 일어났음을 확인할 수 있었으며, 일부 유전자의 재조합을 예측할 수 있었다. 또한 p10 유전자에 대한 Southern blot 분석 결과 RecB-727의 p10 유전자는 AcNPV에서 유래되었으며, RecS-A6는 BmNPV의 p10 유전자를 갖고 있는 것으로 추정된다. 재조합 바이러스의 숙주범위 확장에 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 DNA helicase 유전자 내의 HindIII-SacI 0.6kb 부위에 대하여 약 250 bp의 염기서열을 조사한 결과, 이 부위의 염기서열은 BmNPV helicase의 염기서열과 동일하였다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
• /
• 제3권1호
• /
• pp.37-41
• /
• 2001

The ecdysteroid UDP-glucosyltransferase (egt) gene isolated from Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus (BmNPV) K1 strain was compared to its homologue from Autographa californica NPV (AcNPV) and Bm NPV T3. The egt gene of BmNPV-K1 encoded 506 amino acid open reading frame, and was 99.6% identical at the amino acid level and 99.2% identical at the nucleotide level to BmNPV T3. The BmNPV-K1 egt gene showed highly identity to AcNPV and BmNPV T3 strain. The BmNPV-K1 egt gene was different from amino acid sequence at 2 positions, 19 and 72, in BmNPV T3. The genomic location of egt gene in the BmNPV-K1 was confirmed by Southern blot analysis and its expression patterns at the transcriptional level in the infected cells were confirmed by Northern hybridization analysis. Transcripts of the egt of Bm NPV-K1 peaked around 12 hrs postinfection (p.i.) and reduced at 24 hrs p.i.

• 한국응용곤충학회지
• /
• 제28권1호
• /
• pp.10-15
• /
• 1989

밤나방류에 대한 천적미생물을 중심으로 하는 신방제법의 개발을 목적으로 멸강나방에 강한 병원성을 갖는 바이러스의 선별시험을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 멸강나방(Pseudaletia(=Leucania) separata, Walker)유충에 강한 병원성을 가진 핵다각체바이러스를 선별코자 21종(개통)의 NPV를 orchard grass의 양면에 발라서 멸강나방 2령 유충에 첨식한 결과 멸강나방 핵다각체병바이러스 4계통과 벼밤나방 핵다각체병바이러스가 병원성이 높았다. 멸강나방 핵다각체병바이러스 3계통(LsNPV-F, LsNPV-G 및 LsNPV-Y)를 공시해서, 다각체를 인공사료에 혼합하여 해서 멸강나방 1~6령의 유충에 대한 병원성 시험을 행한 결과 1~2령 유충에 대한 병원성이 높고, 4령 이후에는 낮아 약령기방제의 중요성을 시사했다.