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Simple, Rapid and Sensitive Portable Molecular Diagnosis of SFTS Virus Using Reverse Transcriptional Loop-Mediated Isothermal Amplification (RT-LAMP)

  • Baek, Yun Hee;Cheon, Hyo-Soon;Park, Su-Jin;Lloren, Khristine Kaith S.;Ahn, Su Jeong;Jeong, Ju Hwan;Choi, Won-Suk;Yu, Min-Ah;Kwon, Hyeok-il;Kwon, Jin-Jung;Kim, Eun-Ha;Kim, Young-il;Antigua, Khristine Joy C.;Kim, Seok-Yong;Jeong, Hye Won;Choi, Young Ki;Song, Min-Suk
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제28권11호
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    • pp.1928-1936
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    • 2018
  • Recently, human infections caused by severe fever with thrombocytopenia syndrome virus (SFTSV), which can lead to fatality, have dramatically increased in East Asia. With the unavailability of vaccines or antiviral drugs to prevent and/or treat SFTSV infection, early rapid diagnosis is critical for prevention and control of the disease. Here, we report the development of a simple, rapid and sensitive portable detection method for SFTSV infection applying reverse transcription-loop mediated isothermal amplification (RT-LAMP) combined with one-pot colorimetric visualization and electro-free reaction platform. This method utilizes a pocket warmer to facilitate diagnosis in a resource-limited setting. Specific primers were designed to target the highly-conserved region of L gene of SFTSV. The detection limit of the RT-LAMP assay was approximately $10^0$ viral genome copies from three different SFTSV strains. This assay exhibited comparable sensitivity to qRT-PCR and 10-fold more sensitivity than conventional RT-PCR, with a rapid detection time of 30 to 60 minutes. The RT-LAMP assay using SFTSV clinical specimens has demonstrated a similar detection rate to qRT-PCR and a higher detection rate compared to conventional RT-PCR. Moreover, there was no observed cross-reactive amplification of other human infectious viruses including Japanese Encephalitis Virus (JEV), Dengue, Enterovirus, Zika, Influenza and Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus (MERS-CoV). This highly sensitive, electro- and equipment-free rapid colorimetric visualization method is feasible for resource-limited SFTSV field diagnosis.

User Interaction이 많은 시스템 환경에서의 프로세스 모델리을 지원하기 위한 지식베이스 시스템 (A knowledge-based system to support process modeling in a system environment with high user interaction)

  • 김수연;서의호;황현석
    • 한국지능정보시스템학회:학술대회논문집
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    • 한국지능정보시스템학회 2000년도 춘계정기학술대회 e-Business를 위한 지능형 정보기술 / 한국지능정보시스템학회
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    • pp.417-426
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    • 2000
  • 정보 시스템 개발은 크게 계획, 분석, 설계, 구축의 네 단계로 이루어진다. 이중 사용자 요구사항을 파악하는 분석 단계는 시스템개발 수명주기에 있어 가장 큰 비중을 갖는다. 또한 수명주기의 초기 단계에서 발견되지 못한 결점은 개발이 진행될수록 수정하는데 많은 비용과 노력을 필요로 하게 되어 분석 결과물의 품질은 전체 시스템 품질에 큰 영향을 미치게 된다. 분석 단계의 주요 작업은 데이터 모델링과 프로세스 모델링이다. 이중 데이터 모델리을 위한 지식베이스 시스템 개발에 대한 노력은 기존 연구에서 수행되어 왔으나 프로세스 모델링을 위한 지식베이스 시스템에 대한 연구는 부족하다. 특히 최근 User Interaction이 많은 시스템이 점점 증가하고 있는 추세에 적합한 프로세스 모델링 방법과 지식베이스에 대한 연구가 필요하다.이 연구에서는 사용자 상호작용이 많은 시스템 환경에서의 프로세스 모델링을 위한 절차를 제안하고, 제안된 절차를 효과적으로 지원하고 결과물의 품질을 보증하기 위한 지식베이스 시스템을 구축한다. 모델은 다음의 주요 작업들로 구성된다: 이벤트 분석, 프로세스 분석, 이벤트/프로세스 상호작용 분석. 이벤트 분석은 영향을 주는 이벤트와 그로 인해 수행되어야 하는 업무 절차(Response)를 파악한다. 프로세스 분석은 이벤트 분석과는 독립적으로 수행되며 상위 수준의 업무부터 최하위 수준의 프로세스까지 도출한다. 이벤트/프로세스 상호작용 분석은 이벤트와 프로세스의 분석 결과를 상호 검증하기 위하여 실시된다. 제안된 프로세스 모델링 방법을 지원하기 위한 지식베이스 시스템을 웹 환경에서 구현하였다. 구현된 지능형 robot과 spider 등으로 구성된, 신뢰성 있고 지능적인 MP3 검색 엔진 지원 시스템의 설계와 구현 결과 그리고 성능 등을 종합적으로 요약한다.실어증 환자들은 화시적 대명사를 조응적 대명사보다 더 잘 처리하는 동일한 결과를 보였다. 이러한 실험 결과들은 실어증 환자들이 뇌손상으로 인해 문법적 언어처리에는 어려움을 보이지만 비언어적인, 세상 지식과 관련된 화시적 대명사의 처리는 가능할 것이라는 가설을 뒷받침 해준다. 또한 이러한 실험 결과를 통해 대명사의 기능적인 측면에서 화시와 조응의 처리가 구분되어 있음을 보여준다.l mechanism is concentrate on only the reaction zone. As strain rate and CO2 quantity increase, NO production is remarkably augmented.our 10%를 대용한 것이 무첨가한 것보다 많이 단단해졌음을 알 수 있었다. 혼합중의 반죽의 조사형 전자현미경 관찰로 amarans flour로 대체한 gluten이 단단해졌음을 알수 있었다. 유화제 stearly 칼슘, 혹은 hemicellulase를 amarans 10% 대체한 밀가루에 첨가하면 확연히 비용적을 증대시킬 수 있다는 사실을 알 수 있었다. quinoa는 명아주과 Chenopodium에 속하고 페루, 볼리비아 등의 고산지에서 재배 되어지는 것을 시료로 사용하였다. quinoa 분말은 중량의 5-20%을 quinoa를 대체하고 더욱이 분말중량에 대하여 0-200ppm의 lipase를 lipid(밀가루의 2-3배)에 대

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실시간 MP3 파일 검색 엔진을 위한 지원 시스템의 설계와 구현

  • 김우진;최문기
    • 한국지능정보시스템학회:학술대회논문집
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    • 한국지능정보시스템학회 2000년도 춘계정기학술대회 e-Business를 위한 지능형 정보기술 / 한국지능정보시스템학회
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    • pp.307-316
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    • 2000
  • MP3(MPEG 1 layer 3) 파일 형식(file format)은 최근 높은 압축율과 뛰어난 음질 복원 능력으로 주목을 받고 있다. 실제로 MP3의 압축율은 CD의 약 50분의 1 정도이고 음질은 CD 음질을 동일한 수준으로 유지할 수 있다.한편, 이러한 MP3의 장점 때문에 web을 통해 MP3 파일을 찾으려는 수요는 폭발적으로 증가하고 있지만 기존의 검색 엔진들이 가지고 있는 프로세스는 급속하게 update되고 있는 MP3 컨텐츠에 효과적으로 대응하지 못하고 있는 실정이다. 특히, 기존의 검색 엔진들은 미디어 파일을 위한 검색이 아닌 문자 기반의 검색 기능을 위해 개발되어 MP3 검색에는 부적절하거나, 파일 중심이 아닌 사이트 중심의 링크 변동에 대하여 수동적인 업데이트만을 수행하여 빠른 변화에 능동적으로 대응하기 어려운 경우가 많다.현재 미디어 파일을 위한 검색 엔진들은 여럿 서비스 중이지만, 텍스트 중심의 탐색 방법을 사용하고, 정기적인 DB update 방법에 관해서도 문자 기반의 검색 엔진과 동일한 방법을 사용하고 있다. 또한, 국내에서는 web 서비스를 위한 미디어 파일 탐색 알고리즘과 지능형 탐색 방법에 등에 관한 연구 역시 거의 전무한 상태이다.본 논문은 MP3 파일 전문 검색을 위한 지능형 프로세스를 설계와 구현 결과에 관한 것으로, 기존의 미디어 검색 엔진들이 가지는 문제점을 지적하고 보다 효율적이고 능동적인 미디어 파일 탐색을 위한 방법을 제시한다. 특히, MP3 파일에 대한 미디어 파일 검증 알고리즘과 verification method을 제안하고, 이러한 메커니즘에 따라 구현된 지능형 robot과 spider 등으로 구성된, 신뢰성 있고 지능적인 MP3 검색 엔진 지원 시스템의 설계와 구현 결과 그리고 성능 등을 종합적으로 요약한다.실어증 환자들은 화시적 대명사를 조응적 대명사보다 더 잘 처리하는 동일한 결과를 보였다. 이러한 실험 결과들은 실어증 환자들이 뇌손상으로 인해 문법적 언어처리에는 어려움을 보이지만 비언어적인, 세상 지식과 관련된 화시적 대명사의 처리는 가능할 것이라는 가설을 뒷받침 해준다. 또한 이러한 실험 결과를 통해 대명사의 기능적인 측면에서 화시와 조응의 처리가 구분되어 있음을 보여준다.l mechanism is concentrate on only the reaction zone. As strain rate and CO2 quantity increase, NO production is remarkably augmented.our 10%를 대용한 것이 무첨가한 것보다 많이 단단해졌음을 알 수 있었다. 혼합중의 반죽의 조사형 전자현미경 관찰로 amarans flour로 대체한 gluten이 단단해졌음을 알수 있었다. 유화제 stearly 칼슘, 혹은 hemicellulase를 amarans 10% 대체한 밀가루에 첨가하면 확연히 비용적을 증대시킬 수 있다는 사실을 알 수 있었다. quinoa는 명아주과 Chenopodium에 속하고 페루, 볼리비아 등의 고산지에서 재배 되어지는 것을 시료로 사용하였다. quinoa 분말은 중량의 5-20%을 quinoa를 대체하고 더욱이 분말중량에 대하여 0-200ppm의 lipase를 lipid(밀가루의 2-3배)에 대하여 품질개량제로서 이용했다. 그 결과 quinoa 대량 7.5%에서 비용적, gas cell이 가장 긍정적 결과를 산출했고 반죽의 조직구조가 강화되었다. 또 quinoa 대체에 의해 전분-지질 복합제의 흡열량이 증대된 것으로부터 전분-지질복합제의 형성 촉진이 시사되었다.이것으로 인하여 호화억제에 의한 노화 방지효과가 기대되었지만

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치은부에 이식한 이중인공진피의 조직학적 치유 (Histological healing after grafting of bilayer artificial dermis in the oral environment)

  • 김민정;정현주;김옥수;김영준
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제33권2호
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    • pp.289-299
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    • 2003
  • The autogenous free gingival graft is the most predictable procedure currently used to increase the width of the attached gingiva in periodontics. But the major disadvantage of the procedure is to create the multiple surgical wounds at both a donor site and a recipient site. The other problem is the limited amount of available graft material in oral cavity. Therefore, recent researches have been focused to develop the biomaterial to substitute the autogenous gingival tissue. The purpose of this study was to evaluate the histologic healing after grafting of bilayer artificial dermis, compared to the free gingival graft. Four non-smoking subjects (mean age, 32.5 years) in systemically healthy state and good oral hygiene were selected according to their particular needs for correction of mucogingival problems as suggested by Nabers(1966). The recipient sites were prepared through the procedure for the free gingival graft and were grouped according to the graft materials: Experimental group(n=5) - bilayer artifcia1 dermis ($Terudermis^{(R)}$; Terumo Co. Japan) and Control group(n=6) - free gingival graft with autogenous palatal mucosa. Biopsies were harvested at 1,2,3 and 6 weeks postsurgery to evaluate histologically. At the third week in the experimental group and at the second week of in the control group, the grafts has been clinically stabilized on the recipient bed and the graft border has been blended into the surrounding tissue. In the experimental group after 1 week of grafting, the epithelial migration from the adjacent tissue to graft material was seen and after 3 weeks of grafting, the : nflmmation decreased, collagen layer of the artificial dermis was lost and the basement membrane of epithelium was formed. After 6 weeks of grafting, both groups demonstrated orthokeratinized epithelium and increased thickness of epithelial tissue and the rete peg formation, similar to the adjacent tissue, Histologic evaluation revealed a biologic acceptance and incorporation of the collagen layers of the graft tissue to the host tissue, without foreign body reaction. In conclusion, a bilayer artificial dermis is essentially similar to autogeneous free gingival graft in the correction of mucogingival problems, and has the advantages of decreased patient morbidity (no donor site) and availability of abundant amounts of graft material when needed.

키틴함유 DFMs 급여 한우송아지 분변내 키틴 및 키토산분해효소 생산 미생물 선발 및 동정 (Screening and Isolation of Chitinase and Chitosanase Producing Microbes from the Feces of Korean Native Calves Medicated DFMs Including Chitin)

  • 김태일;권응기;김형철;조영무;박병기;이원규;임석기
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제51권5호
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    • pp.387-394
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    • 2009
  • 본 연구는 키틴으로부터 면역증강물질인 N-acetyl-Dglucosamine을 축적시킴으로써 동물의 면역력을 향상시켜 폐사율을 줄이고자 키틴이 함유된 DFM을 급여한 생후 3~7개월령된 한우 송아지의 분변에서 키틴분해 효소능을 가진 미생물을 분리 동정하기 위해서 수행하였다. 송아지 분변 1g당 키틴이 함유된 배지상에서 $10^5$ 이상의 집락이 형성된 10균주 중 키틴을 분해하는 2균주와 키토산을 분해하는 2균주를 선발하였으며 이들은 모두 용혈성을 갖지 않는 것으로 나타났다. 키틴을 분해하는 균주는 선발한 4균주 모두 그람 음성균으로서 HANDI 110과 HANDI 309는 키틴을 분해하는 균주로 선발되었으며 HANWOO와 HANYOO는 키토산을 분해하는 균주로 선발되었다. 분리된 미생물은 형태학적, 물리화학적 및 유전학적 분류를 통해 HANDI 110는 Escherichia fergusonii으로, HANDI 309는 Acinetobacter parvus으로, HANWOO는 Comamonas koreensis으로 HANYOO는 Chryseobacterium indologenes으로 각각 동정하였다.

Isofourane으로 마취된 개에 medetomidine, medetomidine-buprenorphine, medetomidine-fentanyl의 경막외 투여 시 심혈관계 반응과 진통효과의 비교 (Comparision of cardiovascular and analgesic effects of epidural administration of medetomidine, medetomidine-buprenorphine and medetomidine-fentanyl in dogs anesthetized with isoflurane)

  • 장화석;김혜진;최치봉;이정선;김휘율
    • 대한수의학회지
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    • 제47권1호
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    • pp.103-115
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    • 2007
  • The aim of this study was to compare the reaction of the cardiovascular system, and the anesthetic effect among 3 experimental groups, epidural administration of medetomidine as a single agent, the combination of buprenorphine and medetomidine, and the combination of fentanyl and medetomidine. Twenty one dogs were anesthetized with isoflurane and allowed to breathe spontaneously. Epidural, arterial, and venous catheters were inserted. The tip of epidural catheter was positioned at the level of the space between the sixth and seventh lumbar vertebra. After a stable plane of anesthesia was achieved, these dogs were each administered one of the following treatments epidurally : medetomidine $10{\mu}g/kg$ (Group M), a combination of medetomidine $5{\mu}g/kg$ and buprenorphine $10{\mu}g/kg$ (Group M/B), and a combination of medetomidine $5{\mu}g/kg$ and fentanyl $10{\mu}g/kg$ (Group M/F). Heart rate (HR), Respiratory rate (RR), End-tidal carbon dioxide (EtCO2), and arterial blood pressure were measured before drug administration (base line) and 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, and 60 min postinjection. Blood gas analysis was performed before injection and 5, 15, 25, 35, 45, 60 min postinjection. Isoflurane was discontinued 80 min postinjection and pain/motor function were evaluated up to 260 min postinjection every 15 min. At the early stage of drug introduction (until 5 min), the HR was decreased significantly in all 3 groups compared with base line. In Group M, HR was significantly decreased compared with the other 2 groups. With time (starting 20 min after drug introduction), the HR was decreased significantly in Group M/B in respect to base line. However, no significant difference was seen number-wise in all 3 groups. During 60 min after drug introduction, the systolic, diastolic and mean arterial pressures were highest in Group M and lowest in Group M/F. Among 3 groups, drug action and motor loss duration were longest in Group M/F. Analgesic effect observed in the M/F group was the most prominent and long-lasting, compared to those seen in the other 2 groups. Given the fact that the recovery of motor function takes place in a short period of time after analgesic effects disappeared, additional use of M/F depending on the patient's condition would be a good way to achieve effective pain management. However, proper care should be taken to ensure the function of cardiovascular system in the patient because the administration of M/F under isoflurane anesthesia results in a significant decline in arterial blood pressure ($65{\pm}10mmHg$).

고남산(古南山) 함(含)티탄자철광상(磁鐵鑛床)의 모암(母岩)인 알카리반려암질암의 암석화학적(岩石化學的) 연구(硏究) (Petrochemical Study on the Alkaline Gabbroic Host Rocks of Titaniferous Magnetite Deposits in Gonamsan, Yeoncheon-Gun, South Korea)

  • 장호완;염병우;박노영
    • 자원환경지질
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    • 제20권2호
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    • pp.85-95
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    • 1987
  • The host rocks of titaniferous magnetite deposits in Gonamsan are alkaline gabbros, which are typical of undersaturated alkaline rocks in terms of the lack of normative quartz. According to field occurrences and petrographic features, these alkaline gabbros are divided into 3 rock types: coarse-grained and pegmatitic rock, medium-grained rock with equigranular texture, and layered cumulate rock. All these rocks mainly contain clinopyroxene(salite), plagioclase(An 43-66), pargasite, and ilmenite. The accessory minerals are apatite, sphene, quartz, and sometimes titaniferous magnetite. Pargasite, sphene, and quartz are considered to be secondary minerals formed by the reaction among clinopyroxene, plagioclase and Fe-Ti oxide at deuteric stage. Fe-Ti oxides generally occur as ilmenite in the alkaline rocks, and titaniferous magnetite in the ore deposits. Layered cumulate rocks are characterized by a recurrence of discontinuous thin mesolayer of clinopyroxene-pargasite within leucolayer mainly composed of plagioclase. Clinopyroxene is cumulus mineral whereas plagioclase, ilmenite and apatite occur as intercumulus minerals. According to the variation diagrams of oxide and trace element contents against the differentiation index, incompatible elements, such as Na, Ba and Sr, show positive correlations whereas compatible elements, such as Mg and Cr, show negative correlations. However some compatible elements, such as Co, Ni and V show irregular variations, reflecting relative cumulate status of cumulus and intercumulus minerals. On the de la Roche multicationic diagram, these alkaline gabbros are distributed along the differentiation curve of undersaturated alkaline series from alkaline basaltic composition through basanitic composition to tephritic composition. Layered cumulate rocks, which are distributed between basanitic composition and tephritic composition, reflect their cumulate character, slightly scattering away from the curve. The medium-grained rock shows higher contents in Ba, Sr and light rare earch elements than the coarse-grained and pegmatitic rock. The former shows two times higher contents of total rare earth elements than the latter, $while(La/Lu)_{cn}$ ratios maintain fairly constant values of 5.08~5.06 in these two rocks. This means that coarse-grained and pegmatitic rock, as compared with the medium-grained rock, was formed by the earlier differentiated magma but rare-earth element distribution pattern remained almost parallel during differentiation. From the data the above mentioned, these alkaline gabbros are considered to be comagmatic and to be formed by intrusions of differentiated magmas in its reservoir.

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Preparation and Characterization of Small Intestine Submucosa Powder Impregnated Poly(L-lactide) Scaffolds: The Application for Tissue Engineered Bone and Cartilage

  • Khang, Gilson;Rhee, John M.;Shin, Philkyung;Kim, In Young;Lee, Bong;Lee, Sang Jin;Lee, Young Moo;Lee, Hai Bang;Lee, Ilwoo
    • Macromolecular Research
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    • 제10권3호
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    • pp.158-167
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    • 2002
  • In order to endow with new bioactive functionality from small intestine submucosa (SIS) powder as natural source to poly (L-lactide) (PLA) and poly (lactide-co-glycolide) (PLGA) synthetic biodegradable polymer, porous SIS/PLA and SIS/PLGA as natural/synthetic composite scaffolds were prepared by means of the solvent casting/salt leaching methods for the possibility of the application of tissue engineered bone and cartilage. A uniform distribution of good interconnected pores from the surface to core region was observed the pore size of 40~500 ${\mu}{\textrm}{m}$ independent with SIS amount using the solvent casting/salt leaching method. Porosities, specific pore areas as well as pore size distribution also were almost same. After the fabrication of SIS/PLA hybrid scaffolds, the wetting properties was greatly enhanced resulting in more uniform cell seeding and distribution. Five groups as PGA non-woven mesh without glutaraldehyde (GA) treatment, PLA scaffold without or with GA treatment, and SIS/PLA (Code No.3 ; 1 : 12 of salt content, (0.4 : 1 of SIS content, and 144 ${\mu}{\textrm}{m}$ of median pore size) without or with GA treatment were implanted into the back of nude mouse to observe the effect of SIS on the induction of cells proliferation by hematoxylin and eosin, and von Kossa staining for 8 weeks. It was observed that the effect of SIS/PLA scaffolds with GA treatment on bone induction are stronger than PLA scaffolds, that is to say, in the order of PLA/SIS scaffolds with GA treatment > PLA/SIS scaffolds without GA treatment > PGA nonwoven > PLA scaffolds only with GA treatment = PLA scaffolds only without GA treatment for the osteoinduction activity. The possible explanations are (1) many kinds of secreted, circulating, and extracellular matrix-bound growth factors from SIS to significantly affect critical processes of tissue development and differentiation, (2) the exposure of SIS to GA resulted in significantly calcification, and (3) peri-implant fibrosis due to covalent bonding between collagen molecule by crosslinking reaction. In conclusion, it seems that SIS plays an important role for bone induction in SIS/PLA scaffolds for the application of tissue engineering area.

게르마늄 Prearmophization 이온주입을 이용한 티타늄 salicide 접합부 특성 개선 (Effects of the Ge Prearmophization Ion Implantation on Titanium Salicide Junctions)

  • 김삼동;이성대;이진구;황인석;박대규
    • 한국재료학회지
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    • 제10권12호
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    • pp.812-818
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    • 2000
  • 본 연구에서는 Ge PAM이 선폭 미세화에 따른 C54 실리사이드화 및 실제 CMOS 트랜지스터 접합부에서의 각종 전기적 특성에 미치는 영향을, As PAM과의 비교를 통하여 관찰하였다. 평판 상에서 각 PAM 및 기판의 도핑 상태에 따른 Rs의 변화량을 측정하였으며, 각 PAM 방식은 기존의 살리사이드 TiSi$_2$에 비해 개선된 C54 형성 효과를 보였다. 특히, Ge PAM은 n+ 기판에서 As PAM보다 효과적인 실리사이드화를 보였고, 이 경우 XRB 상에서도 가장 강한 (040) C54 배향성을 나타내었다. ~0.25$\mu\textrm{m}$ 선폭 및 n+ 접합층에서 기존 방식에 비해 As과 Ge PAM은 각각 ~85,66%의 개선된 바저항을 보였으며, P+ 접합층에서는 As과 Ge PAM 모두 62~63% 정도의 유사한 Rs 개선 효과를 보였다. 콘택 저항에서도 각 콘택 크기 별로 바저항(bar resistance) 개선과 같은 경향의 PAM 효과를 관찰하였으며, 모든 경우 10 $\Omega$/ct. 이하로 양호한 결과를 보였다. 누설 전류는 area 형 패턴에서는 모든 공정 조건에서 <10E-14A/$\mu\textrm{m}^{2}$ 이하로, edge 형에서는 특히 P+ 접합부에서 As 또는 Ge PAM 적용 시 <10E-13 A/$\mu\textrm{m}^{2}$ 이하로 다소 누설 전류를 안정화시키는 결과를 보였다. 이러한 결과는 XTEM에 의해 관찰된 바 Ge PAM 적용 시 기존의 경우에 (PAM 적용 안한 경우) 비해 유사한 평활도의 TiSi$_2$박막 형상과 일치하였으며, 또한 본 실험의 Ge PAM 이온주입 조건이 접합층에 손상을 주지 않는 범위에서 적정화되었음을 제시하였다

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Adipose-Derived Stem Cells Suppress Inflammation Induced by IL-1β through Down-Regulation of P2X7R Mediated by miR-373 in Chondrocytes of Osteoarthritis

  • Jin, Rilong;Shen, Miaoda;Yu, Liedao;Wang, Xuanwei;Lin, Xiangjin
    • Molecules and Cells
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    • 제40권3호
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    • pp.222-229
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    • 2017
  • Adipose-derived stem cells (ADSCs) were previously considered to have an anti-inflammatory effect, and Interleukin-$1{\beta}$ ($IL-1{\beta}$) was found to be a pro-inflammatory factor in chondrocytes, but the mechanism underlying ADSCs and $IL-1{\beta}$ is unclear. In this study, we investigate whether P2X7 receptor (P2X7R) signalling, regulated by microRNA 373 (miR-373), was involved in the ADSCs and $IL-1{\beta}$ mediated inflammation in osteoarthritis (OA). Chondrocytes were collected from 20 OA patients and 20 control participants, and ADSCs were collected from patients who had undergone abdominal surgery. The typical surface molecules of ASDCs were detected by flow cytometry. The level of nitric oxide (NO) was determined by Griess reagent. Concentrations of prostaglandin E2 (PGE2), interleukin 6 (IL-6), matrix metallopeptidase 3 (MMP-3) were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The expressions of IL-6, MMP-3, miR-373 and P2X7R were determined by real-time polymerase chain reaction (PCR), and Western blot was used to detect the protein expression of P2X7R. The typical potential characters of ADSCs were verified. In chondrocytes or OA tissues, the miR-373 expression level was decreased, but the P2X7R expression was increased. $IL-1{\beta}$ stimulation increased the level of inflammatory factors in OA chondrocytes, and ADSCs co-cultured with $IL-1{\beta}$-stimulated chondrocytes decreased the inflammation. OA chondrocytes transfected with the miR-373 inhibitor increased the inflammation level. The miR-373 mimic suppressed the inflammation by targeting P2X7R and regulated its expression, while its effect was reversed by overexpression of P2X7R. $IL-1{\beta}$ induced inflammation in OA chondrocytes, while ADSCs seemed to inhibit the expression of P2X7R that was regulated by miR-373 and involved in the anti-inflammatory process in OA.