전통발효식초에 속하는 사과식초로부터 에탄올 및 증류수를 이용, 다당체를 분리하여 새로운 면역활성 물질을 확인하고자 하였다. 사과식초를 농축하고, 80% 에탄올을 가하여 침전물을 얻었으며 소량에 물에 용해하여 투석 및 동결건조를 거쳐 조다당 KAV-0를 얻었다. 구성당 분석 결과, KAV-0는 주로 mannose 38.2%, galactose 19.1% 및 glucose 14.3%로 구성되어있음을 확인하였고, 정상세포주(RAW 264.7 세포 및 대식세포) 및 종양세포주(B16-BL6 melanoma 세포)에 대해 세포독성 측정 결과, 직접적인 세포독성을 나타내지 않았다. 대식세포 유래 세포주인 RAW 264.7 세포 자극에 대한 사이토카인 및 산화질소 생산능을 측정한 결과, IL-6, $TNF-{\alpha}$ 및 산화질소 모두 농도 의존적으로 분비능이 증가하고 저농도에서도 우수한 활성을 나타냈으며, 마우스 복강유래 대식세포 자극에 대한 사이토카인 및 산화질소 생산능에서도 동일한 양상의 결과를 보여 사과식초 유래 조다당 KAV-0가 높은 대식세포 활성능을 소유함을 확인할 수 있었다. 한편, KAV-0의 정맥투여에 따른 NK 세포 활성화를 측정한 결과(ex vivo), 시료에 의해 활성화된 NK 세포는 Yac-1 종양 세포주에 대한 치사활성을 농도 의존적으로 증진시켰으며, $1,000{\mu}g/mouse$에서 월등히 우수한 NK 세포 활성능을 유도하였다. 또한, B16-BL6 melanoma를 이용한 폐암전이모델에서 KAV-0를 정맥투여한 뒤 항전이 활성을 측정한 결과, 농도 의존적으로 암 저해 효과가 나타났으며, 특히 $1,000{\mu}g/mouse$에서는 약 53%의 우수한 암전이 억제 활성을 나타냈다. 이상의 결과로부터 사과식초 유래 조다당 KAV-0는 인체의 면역계를 자극하여 우수한 면역활성 및 항전이 효과를 나타낼 수 있음이 확인되었고 건강 기능성 소재로의 활용 가능성이 충분할 것으로 최종 판단되었다.
본 연구의 목적은 뇌졸중 환자가 병원 내 재활운동 프로그램을 통해서 지속적으로 운동 시에 면역세포(T cell, B cell, NK cell) 등이 면역력 향상에 미치는 영향을 구명하고, 생리적 스트레스 반응의 지표인 혈청 Cortisol이 스트레스를 줄이는데 효과가 있는지 보고자 하였다. 연구 대상은 2013년 3월2일부터 2015년 2월 28일까지 2년간 실시하였으며, 실험군으로는 광주에 있는 S대 병원과 C병원의 뇌졸중 환자 13명, 대조군으로는 일반인(학생, 주부, 직장인) 12명을 선정하여 총 25명을 대상으로 연구하였다. 본 연구 결과는 T cell의 실험군에서는 $69.18{\pm}11.78%$, 대조군에서는 $70.75{\pm}6.33%$로써 통계적으로 실험군과 대조군의 유의한 차이는 없었다. 한편 B cell의 실험군에서는 $12.95{\pm}3.74%$이고 대조군에서는 $16.27{\pm}3.49%$로써 실험군과 대조군의 유의한 차이를 보였다. NK cell의 실험군에서는 $21.98{\pm}8.98%$ 대조군에서는 $15.72{\pm}5.07%$로써 NK cell의 비율이 통계상 유의하게 증가하지 않았지만(p<0.05), 실험군에서 수치가 증가하였음을 알 수 있었다. Cortisol은 실험군 운동전 $13.65{\pm}6.85%$ 실험군 운동 후 $9.90{\pm}4.66%$, 대조군 운동 전 $11.635{\pm}4.02%$ 대조군 운동 후 $12.64{\pm}2.30%$ 대조군에서는 두 군의 차이가 유의하지 않았으나, 실험군에서는 유의하게 증가하였다(p<0.05). 선행연구에서 단기간의 최대운동이나 중등도의 운동 후 면역세포의 활성이 증가됨을 보고하였고, 본 연구에서도 병원 내 재활운동 프로그램을 통해서 지속적인 운동으로 면역세포 중 NK cell의 실험군의 전후 차와 T cell에서 실험군의 전후 차가 증가하여 면역력 향상에 영향이 있음을 알 수 있었고, Cortisol의 실험군의 전후 차는 감소하여 스트레스를 줄이는데 효과가 있음을 알 수 있었다.
적양배추 유래물의 면역 활성 및 항전이 활성을 평가하기 위하여 적양배추 유래 열수추출물 RCW 및 조다당 RCP를 분리하였다. RCW는 중성당이 60%의 높은 비율로 검출되었으며, 이중 Glc가 28.2%로 구성되어 있었으며, RCP는 중성당과 산성당이 각각 40.0% 및 58.9%로 이루어져 있으며, 구성당 분석 결과, Ara(27.5%)와 Gal (17.2%)가 높은 비율로 검출되었다. RCW와 RCP는 정상세포 및 암 세포에 대한 어떠한 독성도 나타나지 않았으며, 오히려 정상세포에서는 약간의 증식능이 확인되었다. 또한 대식세포 자극을 통한 cytokine 분비능을 측정한 결과, RCW는 IL-6, IL-12 및 $TNF-{\alpha}$ 생산능은 어떠한 농도에서도 확인되지 않았으며, $1000{\mu}g/mL$ 고농도에서 NO 생산능이 확인되었다. 반면에 RCP는 $8{\mu}g/mL$의 저농도에서도 IL-6, IL-12, $TNF-{\alpha}$ 및 NO의 생산능이 확인되었다. 높은 cytokine 생산능을 나타낸 RCP의 NK 세포 활성 및 항전이 활성을 측정한 결과, RCP를 $1000{\mu}g/mouse$농도로 정맥투여할 경우, NK 세포를 무처리군 대비 최대 12배 활성화 시키는 것으로 확인되었으며, 47.3%의 항전이 활성이 확인되었다. 적양배추 유래 면역 활성 다당의 구조를 추정하기 위하여 ${\beta}-Glucosyl$ Yariv reagent와의 반응성을 검토한 결과, RCP $1000{\mu}g/mL$에는 약 9.7%의 $arabino-{\beta}-3,6-galactan$이 검출되었다. 본 결과로부터 적양배추에는 $arabino-{\beta}-3,6-galactan$을 일부 함유하는 RG-I 형태의 다당으로 존재하며, 이들에 의해 강력한 면역 증진 활성이 나타나는 것이라 결론지을 수 있었다.
본 연구는 동충하초 추출물을 PC12 및 BV2 세포에서 인지능력 개선에 대한 효능을 평가하고자 하였다. 동충하초 추출물을 증류수로 추출하여 PC12 및 BV2 세포로 MTT 분석을 통해 세포 생존율을 확인하고 L-glutamate로 유도한 PC12 세포를 통해 세포 보호 효능과 아세틸콜린 함량 및 아세틸콜린에스테아제 활성을 평가하였다. 또한, LPS로 유도한 BV2 세포를 통해 nitric oxide (NO) 및 prostaglandin E2 (PGE2) 생성량 등의 항염증 효능을 측정하고 western blot 분석을 통해 $NK-{\kappa}B$, p38, JNK, caspase-3 등의 단백질 발현량을 확인하였다. 동충하초 추출물은 $200{\mu}g/m{\ell}$ 농도를 제외하고 1, 10, $100({\mu}g/m{\ell})$ 농도에서 세포 독성이 나타나지 않았다. L-glutamate로 유도한 PC12 세포에서 유의성있게 세포 보호 효능과 아세틸콜린 함량의 증가, 아세틸콜린에스테아제 활성 감소가 나타났다. 또한, 동충하초 추출물은 NO 및 PGE2 생성량과 $NK-{\kappa}B$, p38, JNK, caspase-3 등의 단백질 발현을 억제하였다. 이와 같은 결과는 동충하초 추출물이 인지능력에 대한 예방 및 개선 효능이 있음을 나타낸다. 따라서 동충하초 추출물은 인지능력 개선을 위한 새로운 천연 소재로 활용될 수 있다.
We have examined whether Soamsan 1 (SA 1) augment the inhibitory effect of oral administration of Soamsan (SA) on lung metastasis of mouse 816 melanoma cells. The inhibitory effect was slightly enhanced by increase in administration dosage of SA 1. SA 1 as well as SA inhibited effectively the lung metastasis regardless of the pretreatment with anti-mouseNK monoclonal antibody. However, in the case of 2-chloroadenosine-pretreated mice, the inhibitory effects of SA and SA 1 were decreased by 18 and 23%, respectively. In vitro stimulation of the mouse splenocytes with mitogens showed that SA or SA 1 significantly augmented the proliferation of mouse splenocytes. Especially, the activity was more prominent in the presence of a B cell mitogen. LPS than a T cell mitogen, Con A. These results suggest that oral administration of SA 1 or SA inhibited lung metastasis of B16 melanoma cells, possibly through a mechanism mediated by the activation of macrophages and B lymphocytes in the host immune system. However, SA 1 did not showed more significant augment of the activation of immune system than SA.
Objectives and methods : To study on the anti-cancer, anti-metastasis and immune response improvement effects of Herbal-acupuncture with Sinomenii acuti Lignum infusion solution(SAL-HAS), we injected Sinomenii acuti Lignum infusion solution into Joksamni$(ST_{36})$ of C57BL/6 mouse which is corresponding to human Joksamni(ST36). We observed its effect on the number of $CD25^+/CD4^+,\;CD8^+/CD3e^+,\;CD69^+/B220^+,\;NK1.1^+/CD3e^+$ cells in mouse PBMCs(peripheral blood mononuclear cells), the number of the pulmonary colony, and the effect on MST(mean survival time) and ILS(increase in MST over control) of C57BL/6 mice implanted intravenously with B16-F10 melanoma. Results and Conclusions : 1. The spleen cells proliferation of the sample groups treated with SAL-HAS extract has increased significantly compared with that of the control group. 2. The percentage of the $CD25^+/CD4^+,\;CD8^+/CD3e^+,\;CD69^+/B220^+,\;NK1.1^+/CD3e^+$ cells in C57BL/6 mouse PBMCs of the sample groups treated with SAL-HAS has increased compared with that of the control group. 3. The pulmonary colony number of the sample groups SAL-HAS has decreased significantly compared with that of the control group. 4. MST and ILS of the sample groups SAL-HAS have increased significantly compared with those of the control group.
Objective: We investigated the effects of outdoor access for 1 h per day on the animal welfare (AW) of tethered cows, in terms of lying and sleeping postures, and immune function. Methods: A total of five dry cows were tethered all day indoors (tethering) for 30 days and then tethered indoors with 1 h daily outdoor access (ODA-1h) for 30 days. To analyze the effects of ODA-1h, we calculated the total duration and bout frequency per day, and bout duration of lying and sleeping postures during the last five days of each treatment period. We also analyzed the populations of T cells, B cells, and NK cells in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) by fluorescence-activated cell sorting and determined the concanavalin A (Con A) -induced proliferation rate of T cells. Results: The mean total time per day of lying during the ODA-1h treatment was significantly shorter than that during the tethering treatment (p<0.001). The Con A-induced proliferation rate of T cells during the ODA-1h treatment was significantly higher than that during the tethering treatment (p = 0.007). The proportion of NK cells in PBMC during the ODA-1h treatment tended to be higher than that during the tethering treatment (p = 0.062). Conclusion: Although ODA-1h may decrease lying time, it increases the available space for tethered cows towards that typically found in grazing and free barn feeding systems. This increased available space promotes the expression of normal behaviors such as walking and social behaviors except lying and may also improve the immune function of tethered dry cows, thereby improving their overall welfare.
Park, Sang Min;Do-Thi, Van Anh;Lee, Jie-Oh;Lee, Hayyoung;Kim, Young Sang
Molecules and Cells
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제43권5호
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pp.479-490
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2020
Interleukin-9 (IL-9) is well known for its role in allergic inflammation. For cancer, both pro- and anti-tumor effects of IL-9 were controversially reported, but the impact of IL-9 on tumor metastasis has not yet been clarified. In this study, IL-9 was expressed as a secretory form (sIL-9) and a membrane-bound form (mbIL-9) on B16F10 melanoma cells. The mbIL-9 was engineered as a chimeric protein with the transmembrane and cytoplasmic region of TNF-α. The effect of either mbIL-9 or sIL-9 expressing cells were analyzed on the metastasis capability of the cancer cells. After three weeks of tumor implantation into C57BL/6 mice through the tail vein, the number of tumor modules in lungs injected with IL-9 expressing B16F10 was 5-fold less than that of control groups. The percentages of CD4+ T cells, CD8+ T cells, NK cells, and M1 macrophages considerably increased in the lungs of the mice injected with IL-9 expressing cells. Among them, the M1 macrophage subset was the most significantly enhanced. Furthermore, peritoneal macrophages, which were stimulated with either sIL-9 or mbIL-9 expressing transfectant, exerted higher anti-tumor cytotoxicity compared with that of the mock control. The IL-9-stimulated peritoneal macrophages were highly polarized to M1 phenotype. Stimulation of RAW264.7 macrophages with sIL-9 or mbIL-9 expressing cells also significantly increased the cytotoxicity of those macrophages against wild-type B16F10 cells. These results clearly demonstrate that IL-9 can induce an anti-metastasis effect by enhancing the polarization and proliferation of M1 macrophages.
Even though appropriate immune response is necessary for the survival of the individual, excessive or insufficient immune Response might cause autoimmune or allergic disease. So the immune response must be controlled to the degree that is beneficial for the well being of the individual. This study was undertaken to know the effects of Gunleetang Gagambang on the immune system of the mouse. Gunleetang Gagambang has been used for cure of tumor as a traditional medicine without any experimental evidence to support the rational basis for its clinical use. This study was carried out to evaluate the possible therapeutic or antitumoral effects of Gunleetang Gagambang extract against tumor, and to carry out some mechanisms responsible for its effect. Some kinds of tumor were induced by the typical application of 3-methylcholanthrene(MCA) or by the implantation(s.c) of malignant tumor cells such as leukemia cells(3LL cells) or sarcoma cells(S180 cells). Treatment of the Gunleetang Gagambang on water-extract(dailly 1mg/mouse, i. p.) was continued for 7 days prior to tumor induction and after that the treatment was lasted for 20 days. Against squamous cell carcinoma induced by MCA, Gunleetang Gagambang decreased not only the frequency of tumor production but also the number and the weight of tumors per tumor bearing mice(TBM). Gunleetang Gagambang on also significantly suppressed the development of 3LL cell and S180 cell-implanted tumors in occurrence-frequency and their size. and some developed tumors were regressed by the continuous treatment of Gunleetang Gagambang extract into TBM. In vitro, treatment of Gunleetang Gagambang extract had no effect on the growth of some kinds of cell line such as FsaII, A431 strain but significantly inhibited the proliferation of 3LL, S180 cells and augmented the DNA synthesis of mitogen-activated lymphocytes. Gunleetang Gagambang also stimulated the migrative ability of leukocyte, the MIF and IL-2 production of T lymphocytes, but not IL 6 production of B cells. Gunleetang Gagambang administration to mice enhanced NK cells activities. These results demonstrated that Gunleetang Gagambang extract exhibited a significant prophylactic benefits against tumors and its antitumor activity was manifested depending on the type of tumor cells. And these results also suggested that effect of Gunleetang Gagambang might be chiefly due to nonspecitie enhancement of NK cell activities and cell-mediated immune responses.
Interleukin-32 (IL-32) was originally identified in natural killer (NK) cells activated by IL-2 in 1992. Thus, it was named NK cell transcript 4 (NK4) because of its unknown function at that time. The function of IL-32 has been elucidated over the last decade. IL-32 is primarily considered to be a booster of inflammatory reactions because it is induced by pro-inflammatory cytokines and stimulates the production of those cytokines and vice versa. Therefore, many studies have been devoted to studying the roles of IL-32 in inflammation-associated cancers, including gastric, colon cancer, and hepatocellular carcinoma. At the same time, roles of IL-32 have also been discovered in other cancers. Collectively, IL-32 fosters the tumor progression by nuclear $factor-{\kappa}B$ ($NF-{\kappa}B$)-mediated cytokines and metalloproteinase production, as well as stimulation of differentiation into immunosuppressive cell types in some cancer types. However, it is also able to induce tumor cell apoptosis and enhance NK and cytotoxic T cell sensitivity in other cancer types. In this review, we will address the function of each IL-32 isoform in different cancer types studied to date, and suggest further strategies to comprehensively elucidate the roles of IL-32 in a context-dependent manner.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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