Mercaptoacetic acid (MAA) and mercaptopropionic acid (MPA) capped ZnS:Mn nanocrystals were synthesized and their physical characteristics were examined by XRD, HR-TEM, EDXS, and FT-IR spectroscopy. The optical properties of the MPA capped ZnS:Mn nanocrystals dispersed in aqueous solution were also measured by UV/Vis and solution photoluminescence (PL) spectra, which showed a broad emission peak around 598 nm (orange light emissions) with calculated relative PL efficiency of 5.2%. Comparative toxicity evaluation of the uncoordinated ligands, MAA and MPA, with the corresponding ZnS:Mn nanocrystals revealed that the original ligands significantly suppressed the growth of wild type E. coli whereas the ligandcapped nanocrystals did not show significant toxic effects. The reduced cytotoxicity of the conjugated ZnS:Mn nanocrystals was also observed in NIH/3T3 mouse embryonic fibroblasts. These results imply that potential toxicities of the capping ligands can be neutralized on ZnS:Mn surface.
The inner shell of the chestnut (Castanea crenata S. et Z., Fagaceae) has been used as an anti-wrinkle/skin firming agent in East Asia, and preliminary experiments have found that a 70% ethanol extract from this plant material can prevent cell detachment of skin fibroblasts from culture plates. In order to examine the molecular mechanisms underlying this phenomenon, its effects on the expression of adhesion molecules, such as fibronectin and vitronectin, were investigated using the mouse skin fibroblast cell line, NIH/3T3. Using fixed-cell ELISA, Western blotting and immunofluorescence cell staining, it was clearly demonstrated that the chestnut inner shell extract enhanced the expression of the cell-associated fibronectin and vitronectin. Scoparone (6,7-dimethoxycoumarin), isolated from the extract, also possessed similar properties. These findings suggest that the enhanced expression of the adhesion molecules may be one of the molecular mechanisms for how the chestnut inner shell extract preventing cell detachment and may be also responsible for its anti-wrinkle/skin firming effect.
Exopolysaccharide (CBP) from submerged culture broth of Ganoderma lucidum mycelium and the water soluble (BWS) and water insoluble (BWI) fractions of CBP were prepared by gel filtration. Antitumor activity and effects on proliferation and differenciation of human cancer cells and mouse NIH 3T3 cells were studied. Cytotoxicity test of CBP, BWS and BWI fractions on human cancer cell lines was performed by using sulforhodamine B (SRB) assay. A549 (lung carcinoma), Colo320 DM and HSR (colon carcinoma), and NIH 3T3 cells were used. BWI fraction showed the strongest cytotoxicity (maximum 20% survival) to all human cells tested. However it did not induced apoptosis. Interestingly BWI fraction did not exert cytotoxic effect on NIH 3T3 cells at low concentration of cells ($5{\times}10^4$) but strong toxic effect at high concentration of cells($5{\times}10^5$) which showed transformed morphology. These results suggest that BWI may have cancer cell specific anticancer activity. However, BWI fraction did not effect the amount of pRb and c-myc protein, which implied that BWI fraction did not act at the early stage of signal transduction pathway. CBP fraction induced differenciation of human leukemic cell line, HL-60 cells suggesting the carcinogenesis prevention of normal cell and possible induction of normalization for cancer cell.
성숙한 A/J, $C_{57}BL/6N$, DBA/2 및 NIH-GP계(系) 마우스에 benzo(a) pyrene과 charcoal powder를, $C_{57}/6N$ 및 NIH-GP계(系) 마우스에 Urethan을 기관내(氣管內) 주입(注入)하여 폐장(肺臟)의 종양발생(腫瘍發生)과 조직변화(組織變化)를 관찰(觀察)한 바 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. Benzo(a)pyrene을 주입(注入)한 군(群)에서는 편평상피암(扁平上皮癌) 및 선암(腺癌), 그리고 편평상피암(扁平上皮癌)과 선암(腺癌)의 혼합 발생예(例)를 볼 수 있었다. 이와 같은 병변(病變)은 A/J 및 $C_{57}BL/6N$계(系) 마우스에서 발생률(發生率)이 높았으며 A/J계(系) 마우스에서 편평상피암(扁平上皮癌)의 발생(發生) 및 분화(分化)가 현저하였다. 한편 DBA/2 및 NIH-GP계(系) 마우스에서는 종양(腫瘍) 발생률(發生率)이 극히 낮았다. Benzo(a)pyrene의 주입시(注入時) 동일 계통의 마우스에서도 대량을 주입(注入)할 때 선암(腺癌)보다 편평상피암(扁平上皮癌)의 발생(發生)이 많았으며 A/J계(系) 마우스에서는 편평상피암(扁平上皮癌) 단독(單獨) 발생예(發生例)가 다수 관찰(觀察)되었고 $C_{57}BL/6N$계(系) 마우스에서는 선암(腺癌) 및 선암(腺癌)과 편평상피암(扁平上皮癌)의 혼합 형태(形態)가 주(主)로 관찰(觀察)되었다. 그리고 기관지상피(氣管支上皮)의 편평상피화생(扁平上皮化生) 및 편평상피암(扁平上皮癌)의 발생시(發生時) alcian blue-PAS 양성반응세포가 관여함을 알 수 있었고 선종양조직(腺腫樣組織) 발생예(發生例)에서도 편평상피화생(扁平上皮化生) 및 편평상피암(扁平上皮癌)으로 분화(分化)되는 경우도 관찰(觀察)되었다. Urethan 주입군(注入群)은 극히 낮은 종양발생률(腫瘍發生率)을 나타내어 발암물질(發癌物質)의 종류(種類), 용량(用量) 및 마우스의 계통(系統)에 따라 종양(腫瘍)의 발생률(發生率) 및 형태(形態)의 차이가 인정되었다.
Kim, Joonmo;Jung, Eun-Young;Jang, Kyung-Lib;Min, Do-Sik
Journal of Life Science
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v.13
no.5
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pp.551-558
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2003
Hepatitis C Virus (HCV) is associated with a severe liver disease and increased frequency in the development of hepatocellular carcinoma. Overexpression of HCV core protein is known to transform fibroblast cells. Phospholipase D (PLD) activity is commonly elevated in response to mitogenic signals, and PLD has been also reported to be overexpressed and hyperactivated in some human cancer. The aim of this study was to understand how PLD can be regulated in HCV core protein-transformed NIH3T3 mouse fibroblast cells. We observed that in unstimulated state, basal PLD activity was higher in NIH3T3 cells overexpressing HCV core protein than in vector-transfected cells. Although expression of PLD and protein kinase C (PKC) in core protein-transformed cells was similar with that of control cells, phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), which is known to activate PKC, stimulated significantly PLD activity in core protein-transformed cells, compared with that of the control cells. PLD activity assay using PKC isozyme-specific inhibitor, and PKC translocation experiment showed that PKC-$\delta$ was mainly involved in the PMA-induced PLD activation in the core-transformed cells. Taken together, these results suggest that PLD might be implicated in core protein-induced transformation.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.20
no.8
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pp.477-484
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2019
Several types of scavenger receptors, including the Collectin-Placenta 1 (CL-P1) receptorthat is present in mammals, are molecules that are expressed on the surfaces of endothelial cells, macrophages and smooth muscle cells. These molecules are cell surface glycoproteins that can be conjugated to oxidized low density lipoprotein (oxLDL). Among these molecules, the effect of quercetin on CL-P1 activation has been confirmed. Quercetin is known as an antioxidant that stops oxidation because it acts to remove free radicals that are responsible for the oxidation reaction. In this study, fragments from the transcription start site of the mouse CL-P1 gene promoter to the -500th base were cloned using DNA polymerase. These fragments were then introduced into macrophage like RAW264.7 cells and fibroblast-like NIH3T3 cells to study the effect of quercetin on the CL-P1 gene expression. As a result, we found that bases ranging from -250 to -350 in the anterior part where gene expression starts are important for producing CL-P1 protein. Among them, the DNA mutation experiments we performed confirmed that the E2F binding sites are critical for producing the CL-P1 protein? In addition, when quercetin was added to the RAW264.7 culture medium, which was a culture of adherent cells, observedthe phenomenon of the cells falling off from the surface of the culture container.
Major characteristics of embryonic stem cells (ESCs) are sustaining of sternness and pluripotency by self-renewal. In this report, transcriptional profiles of the molecules in the developmentally important signaling pathways including Wnt, BMP4, $TGF-\beta$, RTK, Hh, Notch, and JAK/STAT signaling pathways were investigated to understand the self-renewal of mouse ESCs (mESCs), J1 line, and compared with the NIH3T3 cell line and mouse embryonic fibroblast (MEF) cells as controls. In the Wnt signaling pathway, the expression of Wnt3 was seen widely in mESCs, suggesting that the ligand may be an important regulator for self-renewal in mESCs. In the Hh signaling pathway, the expression of Gli and N-myc were observed extensively in mESCs, whereas the expression levels of in a Shh was low, suggesting that intracellular molecules may be essential for the self-renewal of mESCs. IGF-I, IGF-II, IGF-IR and IGF-IIR of RTK signaling showed a lower expression in mESCs, these molecules related to embryo development may be restrained in mESCs. The expression levels of the Delta and HESS in Notch signaling were enriched in mESCs. The expression of the molecules related to BMP and JAK-STAT signaling pathways were similar or at a slightly lower level in mESCs compared to those in MEF and NIH3T3 cells. It is suggested that the observed differences in gene expression profiles among the signaling pathways may contribute to the self-renewal and differentiation of mESCs in a signaling-specific manner.
Tricholoma matsutake, one of edible and medicinal mushroom belonging to Tricholomaceae of Agaricales, has been known to contain some curing effect on gastric cancer and ulcer, and inhibitory effect on sarcoma 180 and Ehrlich sarcoma. Neutral salt soluble (0.9% NaCl), hot water soluble and methanol soluble substances (hereinafter referred to Fr. NaCl, Fr. HW and Fr. MeOH, respectively) were extracted from fruiting body of the mushroom. In vitro cytotoxicity tests, crude polysaccharides were not cytotoxic against cancer cell lines such as Sarcoma 180, HepG2, HT29 and NIH3T3 at the concentration of 2.0 mg/ml. Intraperitoneal injection with crude polysaccharides showed life prolongation effect of 23.4$\sim$37.2% in mice previously inoculated with Sarcoma 180. Fr. MeOH and Fr. HW exhibited the immuno-potentiating activity of B lymphocyte by increasing the alkaline phosphatase activity by 2.2$\sim$11.9 folds compared with control at the concentration of 0.2$\sim$0.5 mg/ml. In case of Fr. NaCl, the numbers of peritoneal exudate cells and circulating leukocytes were increased by 6.0 and 1.5 folds at the concentration of 50 mg/kg, respectively. Therefore, it is concluded that crude polysaccharides extracted from fruiting body of Tricholoma matsutake showed antitumor and immuno-potentiating activity against Sarcoma 180 of mouse.
Kim, Sun-Young;Jeong, Seung-Il;Kim, Sung-Zoo;Shim, Jae-Suk;Jang, Seon-Il
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.23
no.6
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pp.1314-1319
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2009
In previous study, we have shown that continentalic acid (CA) isolated from Aralia continentalis induced the growth inhibition and apoptosis in HepG2 cells. In this study, we examine the effects of CA from A. continentalis on growth inhibition and apoptosis induction in human leukemia HL-60 and mouse fibroblast NIH 3T3 cell lines. The results demonstrated that CA decreased cell growth of leukemia HL-60 cells but not human HaCaT keratinocytes, assessed with the MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide] and LDH (lactate dehydrogenase) assay. Flow cytometric analysis of mouse fibroblast cell lines exposed to CA showed that apoptotic cells increased in a time- and dose-dependent manner. Treatment with CA decreased the number of normal cells and increased the number of early apoptotic and late apoptotic cells in a dose-dependent manner. The induction of apoptosis in mouse cell lines by CA was mediated through the activation of caspase-3, Bak, and Bax and the down-regulation of Bcl-2. Our results suggest that CA efficiently induces apoptosis in human leukemia cells.
The cytotoxic and antitumor activity of Herba cratalariae sessiliflorae on cultured NIH 3T3 fibroblast and human oral epitheloid carcinoma cells were evaluated by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide (MTT) colorimetric method. The light microscopic study was carried out to observe morphological changes of cultured mouse fibroblast and human oral epitheloid carcinoma cells (KB). These results were obtained as follows; Ethyl acetate, chloroform and hexane extracts showed a significant cytotoxicity in NIH 3T3 fibroblast, but the other extracts did not show. All extracts exhibited a significant antitumor activity in human oral epitheloid carcinoma cells, but ethanol extract did not show a antitumor activity. Hexane extract showed low cytotoxic effect, but exhibited the most antitumor activity. The MTT absorbance in NIH 3T3 fibroblast was significantly decreased by treatment with chloroform, ethyl acetate and hexane extracts respectively. Human oral epitheloid carcinoma cells was significantly decreasd by treatment with all extracts with the exception of ethanol extract. The difference in MTT absorbance in two cell Types was most remarkable when treated with water and hexane extracts. Cholroform and hexane extracts showed the strongest effect in growth inhibition of human oral epitheloid carcinoma cells. These results indicated that water extract possessed no cytotoxicity and a strong antitumor activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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