Background : The NF-${\kappa}B$ transcription factors control various biological processes including the immune response, acute phase reaction and cell cycle regulation. NF-${\kappa}B$ complexes are retained in the cytoplasm in the basal state and various stimuli cause a translocation of the NF-${\kappa}B$ complexes into the nucleus where they bind to the ${\kappa}B$ elements and regulate the transcription of the target genes. Recent reports also suggest that NF-${\kappa}B$ proteins are involved in oncogenesis, tumor growth and metastasis. High expression of NF-${\kappa}B$ expression was reported in many cancer cell lines and tissues. The constitutive activation of NF-${\kappa}B$ was also reported in several cancer cell lines supporting its role in cancer development and survival. The anti-apoptotic action of NF-${\kappa}B$ is important for cancer survival. NF-${\kappa}B$ also controls the expression of several proteins that are important for cellular adhesion (ICAM-1, VCAM-1) suggesting a role in cancer metastasis. In lung cancer, high expression levels of the NF-${\kappa}B$ subunit p50 and c-Rel were reported. In fact, high expression does not mean a high activity, and the activation pattern of NF-${\kappa}B$ in lung cancer has not been reported. Materials and Methods : In this study, the NF-${\kappa}B$ nuclear binding activity in the basal and TNF-${\alpha}$ stimulated states were exmined in various lung cancer cell lines and compared with the normal bronchial epithelial cell line. Twelve lung cancer cell lines including the non-small cell and small cell lung cancer cell lines (A549, NCI-H358, NCI-H441, NCI-H552, NCI-H2009, NCI-H460, NCI-H1229, NCI-H1703, NCI-H157, NCI-H187, NCI-H417, NCI-H526) and BEAS-2B bronchial epithelial cell line were used. To evaluate the NF-${\kappa}B$ expression and DNA binding activity, western blot analysis and an electrophoretic mobility shift assay with the nuclear protein extracts. Results : The basal expressions of the p65 and p50 subunits were observed in the BEAS-2B cell line and all lung cancer cell lines except for NCI-H358 and NCI-H460. The expression levels of p65 and p50 were increased 30 minutes after stimulation with TNF-${\alpha}$ in BEAS-2B and in 10 lung cancer cell lines. In the NCI-H358 and NCI-H460 cell lines, p65 expression was not observed in the basal and stimulated states and the two p50 related protein levels were higher after stimulation with TNF-${\alpha}$ These new proteins were smaller than p50 and are thought to be variants of p50. In the basal state, NF-${\kappa}B$ was nearly activated in the BEAS-2B and all lung cancer cell lines. The DNA binding activity of the NF-${\kappa}B$ complexes was markedly higher after stimulation with TNF-${\alpha}$ In the BEAS-2B and all lung cancer cell line except for NCI-H358 and NCI-H460, the activated NF-${\kappa}B$ complex was a p65/p50 heterodimer. In the NCI-H358 and NCI-H460 lung cancer cell lines, the NF-${\kappa}B$ complex was variant of a p50/p50 homodimer. Conclusion : The NF-${\kappa}B$ activation pattern in the lung cancer cell lines and the normal bronchial epithelial cell lines was similar except for the activation of a variant of the p50/p50 homodimer in some lung cancer cell linse.
Kim, Min-Ji;Bae, Nan-Yong;Kim, Koth-Bong-Woo-Ri;Park, Ji-Hye;Park, Sun-Hee;Jang, Mi-Ran;Ahn, Dong-Hyun
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.45
no.2
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pp.194-201
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2016
The anti-inflammatory activity of ethanol extract from Chondrus nipponicus Yendo (CNYEE) was investigated by measuring production of a lipopolysaccharide-induced inflammatory response mediator. CNYEE had no cytotoxic effects on proliferation of macrophages compared to the control. CNYEE significantly inhibited (over 50%) NO production at $50{\mu}g/mL$, with inhibitory effects on expression levels of cytokines such as interleukin (IL)-6, tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), and IL-$1{\beta}$. In particular, IL-6 inhibitory activity of CNYEE was higher than 70% at $100{\mu}g/mL$. CNYEE also reduced protein expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), and nuclear factor (NF)-${\kappa}B$ in a dose-dependent manner. CNYEE also significantly reduced phosphorylation of p38, extracellular signal-regulated kinase, and c-Jun N-terminal kinase. Therefore, these results suggest that CNYEE may have anti-inflammatory effects by modulating the NF-${\kappa}B$ and mitogen-activated protein kinases signaling pathways and may be used as an anti-inflammatory therapeutic material.
Park, Seung-Jae;Kim, Ji-Yeon;Jang, Young-Pyo;Cho, Young-Wuk;Ahn, Eun-Mi;Baek, Nam-In;Lee, Kyung-Tae
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.38
no.4
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pp.339-348
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2007
This study were designed to evaluate the anti-inflammatory effects of $genistein-4'-O-{\alpha}-L-rhamnopyranosyl-(1-2)-{\beta}-D-glucopyranoside$ (GRG) isolated from Sophora japonica (Leguminosae) on the lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) and prostaglandin ($PGE_2$) production by RAW 264.7 cell line. GRG significantly inhibited the LPS-induced NO and $PGE_2$ production. Consistent with these observations, GRG reduced the LPS-induced expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) at the protein and mRNA levels in a concentration-dependent manner. In addition, the release and the mRNA expression levels of tumor necrosis $factor-{\alpha}\;(TNF-{\alpha})$ and interleukin-6 (IL-6) were also reduced by GRG. Moreover, GRG attenuated the LPS-induced activation of nuclear factor-kappa B ($NF-{\kappa}B$), a transcription factor necessary for pro-inflammatory mediators, iNOS, COX-2, $TNF-{\alpha}$ and IL-6 expression. These results suggest that the down regulation of iNOS, COX-2, $TNF-{\alpha}$, and IL-6 expression by GRG are achieved by the downregulation of $NF-{\kappa}B$ activity, and that is also responsible for its anti-inflammatory effects.
Objective: This study was performed to investigate the effect of Acanthopanax sessiliflorum Cheonghyeol plus (ASCP) on NF-κB and MAPK signaling and vascular adhesion factors associated with dyslipidemia in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Methods: We measured the scavenging activity of DPPH radical and ABTS radical by ASCP in HUVECs. We measured the protein expression levels of NF-κB, IκBα, ERK, JNK, and p38 after treatment of HUVECs with TNF-α. We measured the expression levels of MCP-1, ICAM-1, and VCAM-1 mRNA and of MCP-1, ICAM-1, and VCAM-1 biomarkers after treatment of HUVECs with TNF-α. Results: The DPPH and ABTS radical scavenging activity of ASCP increased in a concentration-dependent manner. NF-κB, IκB, ERK, p38 protein expression levels decreased following ASCP treatment at all concentrations compared to untreated control HUVECs. JNK protein expression levels decreased in ASCP-treated HUVECs compared to untreated controls at concentrations of 100 ㎍/mL. MCP-1 mRNA expression level decreased with ASCP treatment ≥200 ㎍/mL compared to the control. ICAM-1 and VCAM-1 mRNA expression levels decreased at all concentrations compared to the control. MCP-1 protein expression level was reduced compared to the control at concentrations ≥200 ㎍/mL, ICAM-1 protein expression level was reduced compared to the control at concentrations ≥100 ㎍/mL, and VCAM-1 protein expression level was reduced at all concentrations. Conclusions: These results suggest that ASCP has an antioxidative and hypolipidemic effect and that ASCP could treat and prevent dyslipidemia, atherosclerosis, and cardio-cerebrovascular diseases.
Jo, Gi-Woong;Kim, Young-Sun;Ham, Soun-Kyu;Bae, Eun-Ji;Lee, Jae-Pil;Kim, Doo-Hwan;Kim, Woo-Sung;Lee, Geung-Joo
Weed & Turfgrass Science
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v.6
no.4
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pp.322-332
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2017
Microbial fertilizer has been used to prompt turfgrass growth and quality and to prevent turfgrass diseases in turfgrass management of golf courses. This study was conducted to evaluate effects of microbial fertilizer containing Lactobacillus fermentum (MFcL) on changes of turfgrass quality and growth by investigating turf color index, chlorophyll index, clipping yield, and nutrient content in the turfgrass tissue. Treatments were designed as follows; non-fertilizer (NF), control fertilizer (CF), MFcL treatments [CF+$1.0g\;m^{-2}$(MFL), CF+$2.0g\;m^{-2}$ (2MFL)], and only MFcL treatment (OMF; $1.0g\;m^{-2}$ MFL). Chemical properties of soil by application of MFcL was unaffected. Turf color index, chlorophyll index, clipping yield and nutrient content and uptake of MFcL treatments were similar to CF. Furthermore, turfgrass shoot density of MFL was increased by 20% than that of CF, and that of OMF by 22% than NF. These results show that the application of microbial fertilizer containing L. fermentum increased turfgrass shoot density, which is not attributed to nutrient uptake in this study, but needs to be further investigated with other mechanisms such as biostimulant induction or phytohormone production.
Effect of Oenanthe javanica ethanol extract (OJE) on nuclear factor-${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$)-mediated inflammatory reaction in RAW 264.7 macrophage cells was investigated. The OJE dose-dependently inhibited secretions of tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) and prostaglandins $E_2\;(PGE_2)$ from lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cells and blocked LPS-induced expression of cyclooxygenase-2. To clarify mechanistic basis for its inhibitions of NF-${\kappa}B$ and activator protein-1 (AP-1) activations, effects of OJE on activations of NF-${\kappa}B$ and AP-1 genes by luciferase reporter activity were examined. The LPS-stimulated activations of NF-${\kappa}B$ and AP-1 were significantly blocked by 400 and $600\;{\mu$}g/mL of OJE, implicating that OJE might regulate gene expression through more than one signaling pathway. Cytosolic degradation of I-${\kappa}B{\alpha}$ was inhibited by OJE dose-dependently, indicating that the nuclear translocation of p65 was inhibited by OJE. These findings suggest that the inhibition of LPS-stimulated COX-2 expression by OJE is due to its inhibition of NF-${\kappa}B$ activation by blocking I-${\kappa}B{\alpha}$ degradation, which may be mechanistic basis of anti-inflammatory effects of OJE.
Transactions of the Korean Society of Automotive Engineers
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v.11
no.6
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pp.101-107
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2003
Since stainless steel sheets have good mechanical properties, weldability, appearance and corrosion resistance, they are commonly used as one of the structural materials of the railroad cars or the commercial vehicles which are manufactured by the spat welding. Among the many kinds of spot welded lap joints, it can be found that multi-lap joints are employed in their body structure. But, fatigue strength of these joints is lower than that of base metal due to high stress concentration at the nugget edge of spot weld and is considerably influenced by welding conditions as well as the mechanical and geometrical factors. Thus, it is necessary to establish a reasonable and systematic design criterion for the long life design of the spot-welded body structures. In this paper, the stress distribution and deformation around the spot-welded multi-lap joints subjected to tensile shear load was numerically analyzed. Also, the $\Delta$P-Nf curve was obtained by fatigue tests. Using these results, $\Delta$P-Nf curves were rearranged in to the ${\Delta}{\sigma}$-Nf relation with the maximum stress at nugget edge of spot weld.
The fouling of Nanofiltration membrane (NF) was examined using wastewater containing reactive black dye RB5 of 1500 Pt/Co color concentrations with 16890 mg/l TDS collected from El-alamia Company for Dying and Weaving in Egypt. The NF-unit was operated at constant pressure of 10 bars, temperature of 25℃, and flowrate of 420 L/min. SEM, EDX, and FTIR were used for fouling characterization. Using the ROIFA-4 program, the total inorganic fouling load was 1.07 mM/kg present as 49.3% Carbonates, 10.1% Sulfates, 37.2% Silicates, 37.2% Phosphates, and 0.93% Iron oxides. The permeate flux, recovery, salt rejection and mass transfer coefficients of the dye molecules were reduced significantly after fouling. The results clearly demonstrate that the fouling had detrimental effect on membrane performance in dye removal, as indicated by a sharp decrease in permeate flux and dye recovery 68%. The dye mass transfer coefficient was dropped dramatically by 34%, and the salt permeability increased by 14%. In this study, all the properties of the membrane used and the fouling that caused its poor condition are identified. Another study was conducted to regeneration fouled membrane again by chemical methods in another article (Abdel-Fatah et al. 2017).
Objectives : The effects of aqueous extract of Backhapgogumtanggami-bang (BGTG, a newly devised herb medicine) on the induction of apoptotic cell death were investigated in human lymphoid origin leukemia cell lines, HL-60. Methods : Cells were treated with various concentrations and $400{\;}\mu\textrm{g}/ml$ BGTG for 12 hr. Genomic DNA was isolated and separated on 1.8% agarose gels. Lysates from the cells were used to measure the activity of caspase-2, -3, -8, and -9 protease by using fluorogenic peptide. Cells were preincubated with SB-203580 for 30 min. Nuclear protein from the cells was incubated with oliginucleotide probe of AP-l and NF-kB. Nuclear extracts from the cells were isolated and reacted with antibodies. Results : The viability of HL-60 cells were markedly decreased by BGTG extract in a dose- and time-dependent manner. BGTG extract induced the apoptotic death of HL-60 cells which was characterized by the DNA fragmentation. The activations of Caspase-2, 3, and 9 were induced by BGTG. However, selective inhibition of the p38 mitogen-activated protein kinase pathways by SB-203580 did not affect the extent of BGTG extract-induced cell death. Furthermore, we observed the transient activations of transcriptional factors such as AP-l and NF-kB. Conclusions : These results suggest that BGTG extract induced apoptotic death of HL-60 cells and caspase activations as well as the modulation of transcriptional factors such as AP-1 and NF-kB.
PURPOSE : Andrographis Herba is used as a traditional herbal medicine in the Asian countries for the treatment common cold, fever, diabetes, hypertension, hepatitis, skin infections, snake bite, and other diseases. In this study, we investigated the anti-inflammatory effect of MeOH extract of Andrographis Herba (AHME) on LPS-activated Raw 264.7 cells. METHODS : Cell viability was determined by MTT assay. Nitric oxide (NO) production was determined by Griess reagent. Pro-inflammatory cytokines were detected by enzyme-linked immunosorbent assay. Expression levels of pro-inflammatory proteins were determined by Western blot analysis. RESULTS : Production of NO in LPS activated Raw 264.7 cells, was significantly decreased by pre-treatment with 3-30 ㎍/mL of AHME. Production of pro-inflammatory mediators such as TNF-α and IL were significantly decreased by AHME 30 ㎍/mL pre-treatment. AHME significantly decreased p-IκB and NF-κB expression. CONCLUSION : The results of this study indicate that AHME could inhibit the acute inflammatory response, via modulation of NF-κB activation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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