• 한국동물학회지
• /
• 제26권1호
• /
• pp.1-17
• /
• 1983

細胞의 分化에 관한 硏究의 一環으로 鷄胚의 筋細胞를 培養하면서 미오신, 악틴, 트로포미오신, 트로포닌 等 筋特異 蛋白質의 合成과 培養細胞에서 培養液內로 放出되는 蛋白質을 形態分化와 竝行하여 分析하였다. 筋特異 蛋白質중 미오신과 악틴은 細胞融合前에 활발히 合成되며 融合後에는 相對的으로 떨어지고, 트로포닌은 融合直後부터 활발히 合成되기 시작하며, 트로포미오신은 分化의 全期間에 걸쳐 合成율이 거의 一定하였다. 培養筋細胞는 細胞融合이 일어나기 前에 分子量 18,000 달톤과 20,000달톤 그리고 그 이상의 몇 가지 蛋白質을 培養液內에 放出시틴다는 것이 거의 確實하다. 이들 蛋白質은 培養筋細胞의 膜蛋白質일 것으로 推定되며 筋細胞의 同時 融合을 誘導하는 機能을 가진 것으로 생각된다.

• 한국동물학회지
• /
• 제38권1호
• /
• pp.49-54
• /
• 1995

본 연구자들은 근원세포를 면역시켜 얻은 hybidoma들을 검색하여. 계배 근원세포의 분화와 관련된 단백질을 인지하여 분화를 억제하는 대과가 있는 monoclonal antibody 3H35를 선별하여 그 항원을 확인한 바 있다(Kim et af.. (1992), Korean J. Zool 35 29-36) 본 연구에서는 λZAP에 cloning된 chicken muscle CDNA library들을 lacZ fusion protein으로 발현시켜 항체 3H35로 검색하여 그 유전자를 찾아내었다. 선별한 CDNA clone 중 C59의 삽입 절편은 1.6 kb이었고, 발현시킨 facE fusion protein 은 60 kDa로, f-galactosidase에 대한 항체에 반응하며 3H35와도 반응함을 immunoaffinitv adsorbant와 immunoblot으로 확인하였다 Clone C59의 삽입 절편의 염기서열을 분석한 결과, 실제 유전자는 1.6 kb 이상이며, 알려진 어느 다른 유전자와도 관련이 없는 새로운 근특이 유전자로 판단되었다. 아미노산으로 전환시켰을 때 31개의 특이한 서열이 7차례 반복된 부분이 나타났으며 이 서열의 23개가 일정하게 보존되어있고 나머지 서열의 아미노산의 polarity도 매우 유사하게 효존되어있다. 이들의 보존성이 극히 높은 것으로 보아 독특한 기능을 수행하는 domain으로 추정된다.

• 한국동물학회:학술대회논문집
• /
• 한국동물학회 1996년도 한국생물과학협회 국제학술대회
• /
• pp.172.2-172
• /
• 1996

No Abstract, See Full Text

• 한국동물학회:학술대회논문집
• /
• 한국동물학회 1999년도 한국생물과학협회 학술발표대회
• /
• pp.175.1-175
• /
• 1999

No Abstract, See Full Text

• 한국동물학회지
• /
• 제38권1호
• /
• pp.78-86
• /
• 1995

Our previous report has suggested that the decrease of fibronectin level during mvogenesis is due to the decreased Bvailabilitv of receptor (matrix assembly receptor) for 29-kDa fragment of fibronectin. In the present study, we demonstrate that G protein and adenvlate cvclase system are involved in the regulation of fibronectin matrix assembly and that when fibronectin level in extracellular matrix decreases, the postmitotic fusion-capable cells emerge more frequently from the proliferative population. This proposal is based on the following observations. (1) Cholers toxin, which increases intracellular CAMP, caused a decrease in the ability of mvoblasts to incorporate fibronectin into extracellular matrix. (2) Cholera toxin decreased the proliferation of mvoblasts and Induced the precocious fusion. (3) decAMP, which was found to induce the precocious fusion and decrease the proliferation of myoblasts, decreased the fibronectin level in extracellular matrix and matrix assembly receptor for fibronectin- (4) RGOS, whlh inhibits the incorporation of fibronectin into extracellular matrix, induced the precocious fusion and reduced the proliferaton of mvoblasts. These results suggest that CAMP regulates the fibronectin levels in extracellular matrix and that the alteration of fibronectin level is involved in regulation of the proliferation and differentiation of chick embryonic mvoblasts.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
• /
• 제20권7호
• /
• pp.1115-1119
• /
• 2007

This study was conducted to determine the difference between satellite cells (porcine) and myoblasts (C2C12) in their differentiation under the influence of 2, 4-thiazolidindion. C2C12 myoblast cells and porcine satellite cells (isolated from 10 d old $Landrace{\times}Duroc$ piglets) were grown to absolute confluency. Post confluent cells (day 0) were further exposed to adipogenic induction medium along with 2, 4-thiazolidindion ($8{\mu}M$) for 2 d. Thereafter, cells were exposed to 2, 4-thiazolidindion alone every 2 d till day 10 and analysed. The control was cultured in differentiation medium without any treatment. Increased (p<0.05) expression of transcriptional factors i.e. C/EBP-${\alpha}$ and PPAR-${\gamma}$ and transition of cells to adipocyte morphology was noticed from 2 d and 4 d onwards in satellite cells (Porcine) and myoblasts (C2C12) respectively. Myogenesis was observed to be suppressed completely in case of satellite cells compared to myoblasts in response to 2, 4-thiazolidindion. Pax-7 (transcriptional factor) appeared as a sole entity to satellite cells only, as it was not identified in case of myoblasts. Although both the cells were converting to adipoblasts, the degree of their conversion was different in response to 2, 4-thiazolidindion. Therefore, the hypothesis that satellite cells contribute various domains to the growing myoblasts appeared obscured and found to be dependent on the proliferative energy/or degree of fusion. However, it revealed satellite cells as currency to myoblasts/muscle.

• Animal cells and systems
• /
• 제1권4호
• /
• pp.641-646
• /
• 1997

Lysophosphatidic acid (LPA; 1-acyl-glycerol-3-phosphate) has been known as an intercellular phospholipid messenger with a wide range of biological activities. In this study, the effect of LPA on both the proliferation and differentiation of rat E63 myoblasts has been investigated. In the serum-free Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) media, the proliferation of E63 cells was largely restricted. Addition of LPA into the ITS media strongly promoted the cell proliferation and resulted in two to four fold increase of cell number. Furthermore, it appeared to increase the percent fusion in a dose-dependent manner up to 15 ug/ml. The synthesis of myosin heavy chain (MHC) was increased by LPA as well. These results indicate that LPA is able to promote both cell proliferation and differentiation in rat E63 myoblasts. Suramin, known to have uncoupling activity on growth factor-receptor interaction, was tested for antagonistic activity in myoblast proliferation and differentiation. Myoblasts grown in the ITS medium containing LPA were able to proliferate well even in the presence high concentration of suramin whereas myoblast differentiation was completely blocked by 30 ug/ml of suramin. The inhibitory effect of suramin on the myoblast differentiation was completely reversible by removing the suramin. This result indicates that the intracellular signaling pathway of LPA leading to cell proliferation might be distinct from that leading to cell differentiation on E63 myoblasts. Also, the antagonistic effect of suramin suggests that the differentiation activity elicited by LPA might be mediated by a specific G protein-coupled receptor.

• 대한물리의학회지
• /
• 제14권2호
• /
• pp.63-70
• /
• 2019

PURPOSE: While electrical stimulation (ES) is known to be a safe and flexible tool in rehabilitation therapy, it has had limited adoption in muscle regeneration. This study was performed to investigate whether ES can induce myogenic differentiation and to clarify the mechanism underlying the effects of ES on myogenic differentiation. METHODS: This study used rat L6 cell lines as myoblasts for myogenic differentiation. Electric stimulation was applied to the cells using a C-Pace EP culture pacer (IonOptix, Westwood, Ma, USA). The gene expressions of myogenic markers were examined using qPCR and immunochemistry. RESULTS: Our study showed that ES increased the thickness and length of myotubes during myogenic differentiation. It was found that ES increased the expression of myogenic markers, such as MyoD and Myogenin, and also activated the fusion of the myoblast cells. In addition, ES suppressed the expression of small GTPases, which can explain why ES promotes myogenic differentiation. CONCLUSION: We found that ES induced myogenic differentiation by suppressing small GTPases, inhibiting cell division. We suggest that ES-based therapies can contribute to the development of safe and efficient muscle regeneration.

• 한국동물학회지
• /
• 제38권4호
• /
• pp.483-489
• /
• 1995

많은 세포와 조직에서 분화 조절물질로 알려져 있는 비타민 A의 대사산물인 rectinoic acid(RA)가 배양 계배 근원세포의 성장과 분화에 미치는 영향을 조사하였다. RA가 처리된 세포는 그 농도가 증가함에 따라 융합 억제 효과도 증가함을 보였고, 배양액으로부터 RA를 제거해 주면 근원세포의 융합이 재개되는 것으로 보아, RA는 근원세포의 융합을 가역적으로 억제함을 알 수 있었다. 그러나 이미 최종 분화 단계에 들어선 세포에서는 융합 억제 효과를 보이지 않아, RA의 효과는 분화 단계에 따라 특이적으로 작용함을 보여준다. 융합 억제 효과에도 불구하고, RA는 근원세포의 융합 전단계인 방추형으로 신장하는 것과 그들이 가상의 축을 따라 배열하는 데는 영향을 주지 않았다. 또한 세포의 증식과 creatine kimase, tropomyosin과 같은 근특이 단백질의 축적에도 큰 영향을 주지 않았다. 한편, 근원세포는 융합하기 전에 필수적으로 fibronectin의 감소를 억제함을 알 수 있었다. 이상의 결과로 RA는 배양 근원세포의 융합만을 특이하게 억제하는 물질이며, 그 작용은 fibronectin의 감소를 방해하는 것과 밀접한 관계가 있는 것으로 사료된다.

• 한국동물학회지
• /
• 제33권2호
• /
• pp.158-165
• /
• 1990

Calpain은 $Ca^2$+-의존성 단백질 분해요소로서, 세포 골격단백질이나 근수축성 단백질을 분해하는 것으로 알려져있다. 한편, 배양 근원세포의 분화는 세포융합이라는 뚜렷한 형태적인 변화를 겪는데, 이때 근원세포의 세포막과 세포골격에 많은 변화가 일어난다고 알려져 있다. 본 실험에서는 근원세포 융합과정에서의 calpain의 역할을 알아보기 위하여 배양근원세포의 융합에 따른 calpain의 활성과 양적 변화를 조사하였다. 배양시간이 경과할 수록 calpain의 활성은 증가하여 세포융합이 왕성히 일어나고 있는 배양 60시간에 최대치를 이루었다. 또한, 닭골격근으로 부터 순수분리된 calpain에 대한 항체를 만들어서 배양 근원세포의 분화에 따른 calpain의 양적 변화를 immunoblot으로 조사하여 본 결과, calpain은 배양 24시간에서 48시간 사이에 그 양이 급격히 증가하여, 세포융합이 시작되는 배양 48시간 사이에 최다량으로 존재하는 것으로 나타났다. 이러한 결과는 calpain의 단백질 분해활성이 세포 융합과정에 관련된 있음을 암시해준다.