Kim Sang-Dae;Kim Ji-Hye;Kim Jong-Bong;Han Yeong-Hwang
Korean Journal of Microbiology
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v.41
no.3
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pp.164-167
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2005
The culture condition and medium composition for the enhanced mycelial growth of Lepista nuda DGUM 26501 were investigated. The optimal temperature and pH for the mycelial growth were $24^{\circ}C$ and $7.0\~8.0$, respectively. The partial pressure of oxygen for the enhanced mycelial growth was more than $10\%\;O_2$. When Czapek-Dox medium was used as a minimal medium, manitol and xylitol were very good carbon sources. Organic nitrogen sources were better than inorganic ones for mycelial growth. As the nitrogen source tested, com steep liquor, soytone and protease peptone were the best as a source of organic nitrogen sources. When ammonium phosphate as phosphorus sources was used, the enhanced mycelial growth was shown. Nicotinic acid was proved to be the most appropriate source of vitamin. After the mycelia of L. nuda DGUM 26501 was cultivated at $24^{\circ}C$ for 10 days in LNM broth (pH 7.0), the activities of extracellular enzyme were determined. The specific activity of $\alpha-amylase$ was much higher than those of other enzymes. However, little or no enzyme activities of $\beta-glucosidase$, CMCase, laccase and lipase were found.
To study physiological and ecological characters of the secondary mycelia of Armillariella mellea, it was cultivated on the various media. It was grown very well on the malt extract medium compared with its growth on yeast extract medium, potato dextrose medium and Hamada medium. The temperature of $27^{\circ}C$ gave the best condition for it to grow. The highest rate of growth was shown in medium of pH 6. Heteroauxin of 5 ppm concentration showed a increase as 26.2% in growth in compared with the control group. Gibberelline 10ppm, Tomatoton of 10,000 dilution and Adoton of 5,000 dilution showed positive effect. It was shown that the use of above hormones in appropriate concentration brought the effect of growth, but overuse of them brought inhibitory effect. Under the same condition of 200ppm concentration, vitamin A gave the highest growth of 18.2% than that of the control used.
In order to elucidate the antifungal activity of prochloraz(imidazole) and triadimefon(triazole), the mycelia of the Valsa ceratosperma were treated with the compounds in vitro. Prochloraz applied to the target pathogen inhibited mycelial growth more than triadimefon. The concentration for the 50% inhibition of mycelial growth ($I_{50}$) was 1-5 ppm in treatment of prochloraz and 5-10 ppm in treatment of triadimefon. The mycelia of Valsa ceratosperma treated with low concentration of prochloraz and triadimefon were morphologically abnormal as observed with an optical microscope. Content of total lipid and fatty acids were not changed by the treatments of prochloraz and triadimefon, respectively, in liquid medium.
To produce fruiting bodies of Oudemansiella mucida, porcelain fungus, on the oak sawdust medium, additives suitable for the mycelial growth and fruiting body formation were screened. In general, the mycelial growth of the three strains of O. mucida used in this study have been good on oak sawdust mixed rice bran of $20{\sim}30%$. The mycelia incubated in potato dextrose broth for 7 days were inoculated on oak sawdust medium supplemented with various ratios of rice bran and incubated for 30 days at $25^{\circ}C$ in the dark condition until the mycelia of O. mucida fully colonized the media from top to bottom. Then, top surface of the media in the bottles were horizontally scratched with a spatula and filled with tap water for 3 hours. To induce the primordial formation of O. mucida, the bottles were transferred to the mushroom cultivating room under 12 hrs of light (350 lux) and dark condition with relative humidity of 95% at $17^{\circ}C$. The primordia of O. mucida were formed on the surface of oak sawdust media after 7 days of incubation. The mature fruiting bodies were observed 5 days after primordial formation. The fruiting bodies O. mucida were formed on oak sawdust medium mixed with 5 to 30% rice bran. However, abundant fruiting-bodies of O. mucida were produced in oak sawdust medium supplemented with 20% rice bran. This is the first report associated with an artificial fruiting body production of O. mucida in Korea.
Eight distinct bacteria were isolated form diseased mycelia of the edible mushroom, Pleurotus eryngii. 16S rDNA sequence analysis showed that the isolates belonged to a variety of bacterial genera including Bacillus (LBS5), Enterobacter (LBS1), Sphingomonas (LBS8 and LBS10), Staphylococcus (LBS3, LBS4 and LBS9) and Moraxella (LBS6). Among them, 4 bacterial isolates including LBS1, LBS4, LBS5, and LBS9 evidenced growth inhibitory activity on the mushroom mycelia. The inhibitory activity on the growth of the mushroom fruiting bodies was evaluated by the treatment of the bacterial culture broth or the heat-treated cell-free supernatant of the broth. The treatment of the culture broths or the cell-free supernatants of LBS4 or LBS9 completely inhibited the formation of the fruiting body, thereby suggesting that the inhibitory agent is a heat-stable compound. In the case of LBS5, only the bacterial cell-containing culture broth was capable of inhibiting the formation of the fruiting body, whereas the cell-free supernatant did not, which suggests that an inhibitory agent generated by LBS5 is a protein or a heat-labile chemical compound, potentially a fungal cell wall-degrading enzyme. The culture broth of LBS1 was not inhibitory. However, its cell-free supernatant was capable of inhibiting the formation of fruiting bodies. This indicates that LBS1 may produce an inhibitory heat-stable chemical compound which is readily degraded by its own secreted enzyme.
Kim, Sang-Gyu;Jang, Ye-Lim;Kim, Hye-Young;Koh, Young-Jin;Kim, Young-Ho
The Plant Pathology Journal
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v.26
no.4
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pp.340-345
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2010
Two similar microbial fungicides (termed as MA and MB) developed in a Korean biopesticide company were analyzed and compared each other in their biocontrol activities against the phytophthora blight of chili pepper caused by Phytophthora capsici. MA and MB contained the microbe Paenibacillus polymyxa and Bacillus subtilis, respectively, with concentrations over those posted on the microbial products. In comparison of the isolated microbes (termed as MAP from MA and MBB from MB) in the antagonistic activities against P. capsici was effective, prominently against zoospore germination, while MBB only significantly inhibited the mycelia growth of the pathogen. Some effectiveness of MAP and MBB was noted in the inhibition of zoosporangium formation and zoospore release from zoosporangia; however, no such large difference between MAP and MBB was noted. In a pot experiment, MA reduced the severity of the phytophthora blight more than MB, suggesting that the disease control efficacy would be more attributable to the inhibition of zoospore germination than mycelia growth of P. capsici. These results also suggest that the similar microbes MA and MB targeting different points in the life cycle of the pathogen differ in the disease control efficacies. Therefore, to develop microbial fungicides it is required to examine the targeting points in the pathogen's life cycle as well as the action mode of antagonistic microorganisms.
Biological efficiency (BE), the ratio of fresh mushrooms harvested per dry substrate weight, expressed as the percentage of Lentinula edodes, also known as shiitake, was determined using the 'Sanjo 701' strain stored in the Department of Mushroom at the Korea National College of Agriculture and Fisheries. The mycelia were grown in glass columns with varying levels of moisture content and varying mixing periods of 0.5, 1, 2, and 3 hours. The substrate was sterilized using a steam pressure autoclave sterilizer at normal and high pressure to avoid contamination. The results showed that mycelial growth (126 mm/15 days) was optimized at 55% moisture content. The best mycelial growth of 117 mm/15 days was obtained with 2 hours of mixing time. Normal pressure sterilization yielded better results with mycelial growth of 96 mm/15 days at $100^{\circ}C$ compared to 88 mm /15 days with sterilization at $121^{\circ}C$. Mycelial density was higher, i.e. 3(+++), with normal pressure sterilization compared to 2(++) with high pressure sterilization. Furthermore, sawdust mixed with 5% woodchips increased the substrate porosity and yielded higher mycelial growth. Thus, we demonstrated that the optimum harvest or potential increased yield of shiitake can be obtained by modulating moisture content, mixing time, and substrate porosity.
Mushroom strains of Polyporales from the genera Coriolus, Trametes, Pycnoporus, Ganoderma, and Formitella were explored in terms of mycelial growth characteristics for the application of mushroom mycelia as alternative sources of materials replacing fossil fuel-based materials. Among the 64 strains of Polyporales, G. lucidum LBS5496GL was selected as the best candidate because it showed fast mycelial growth with high mycelial strength in both the sawdust-based solid medium and the potato dextrose liquid plate medium. Some of the Polyporales in this study have shown good mycelial growth, however, they mostly formed mycelial mat of weak physical strength. The higher physical strength of mycelial mat by G. lucidum LBS5496GL was attributed to its thick hyphae with the diameter of 13 mm as revealed by scanning electron microscopic analysis whereas the hyphae of others exhibited less than 2 mm. Glycerol and skim milk supported the best mycelial growth of LBS5496GL as a carbon and a nitrogen source, respectively.
Strain improvement and morphology investigation in bioreactor cultures were undertaken in suspended cultures of Phellinus linteus mycelia for mass production of protein-bound polysaccharides(soluble ${\beta}$-D-glucan), a powerful immuno-stimulating agent. Phellineus sp. screened for this research was identified as Phellinus linteues through ITS rDNA sequencing method and blast search, demonstrating 99.7% similarity to other Phellinus linteus strains. Intensive strain improvement program was carried out by obtaining large amounts of protoplasts for the isolation of single cell colonies. Rapid and large screening of high-yielding producers was possible because large numbers of protoplasts ($1{\times}10^5{\sim}10^6\;protoplasts/ml$) formed using the banding filtration method with the cell wall-disrupting enzymes could be regenerated in relatively high regeneration frequency($10^{-2}{\sim}10^{-3}$) in the newly developed regeneration medium. It was demonstrated that the strains showing high performances in the protoplast regeneration and solid growth medium were able to produce 5.8~6.4%(w/w) of ${\beta}$-D-glucan and 13~15 g/L of biomass in stable manners in suspended shake-flask cultures of P. linteus mycelia. In addition, cell mass increase was observed to be the most important in order to enhance ${\beta}$-D-glucan productivity during the course of strain improvement program, since the amount of ${\beta}$-D-glucan extracted from the cell wall of P. linteus mycelia was almost constant on the unit biomass basis. Therefore we fully investigated the fungal cell morphology, generally known as one of the key factors affecting cell growth extent in the bioreactor cultures of mycelial fungal cells. It was found that, in order to obtain as high cell mass as possible in the final production bioreactor cultures, the producing cells should be proliferated in condensed filamentous forms in the growth cultures, and optimum amounts of these filamentous cells should be transferred as active inoculums to the production bioreactor. In this case, ideal morphologies consisting of compacted pellets less than 0.5mm in diameter were successfully induced in the production cultures, resulting in shorter period of lag phase, 1.5 fold higher specific cell growth rate and 3.3 fold increase in the final biomass production as compared to the parallel bioreactor cultures of different morphological forms. It was concluded that not only the high-yielding but also the good morphological characteristics led to the significantly higher biomass production and ${\beta}$-D-glucan productivity in the final production cultures.
The contents of insoluble protein nitrogen, water soluble protein nitrogen anti peptides' nitrogen were determined of the samples which were taken in seven and half hours intervals during soybean-koji preparation to study changes of soybean protein, and the contents of total nitrogen and amino nitrogen were measured for the fractions resulting from molecular sieving by using Dowex 50 having various cross linkages for the peptides from soybean-koji extracts. As the results of the studies, The followings were obtained: 1. The contents of insoluble protein nitrogen and peptides' nitrogen are fairy constant at the earlier stage, where the former decreased and the latter increased markedly as mycelia grow, then rate of the decreases and the increases of them become lower at later stage after sporulation. The contents of water soluble protein are also constant at the earlier stage until covering of mycelia over the koji and increased since then until the stage of sporulation and then decreased at the later stage. 2. The amount of peptides nitrogen in each fraction obtained by the molecular sieving was almost constant at the earlier stage and the values in fractions of X-16, X-12, X-8. X-4 and X-2 increased considerably together as mycelia grow. Then the values in the fractions showed almost plateaux, after sporulalion, where the effluent fraction showed markedly increased values throughout mycelia growth.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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