'Blue Edge' (Hosta minor) was induced by ethyle methane sulfonate (EMS) to obtain mutants. Among induced leaf variegated hosta plants, some with deep-green color pattern on the edge of the leaves was selected. They were cultivated via vegetative propagation. Assessment of botanical characteristics was conducted for three years since 2003. The major characteristic of these cultivars is that they maintain their deep-green color on the edge of the leaves all year round. These cultivars are useful as materials for pot plant or as ground cover plant.
Hosta 'Yellow Tiara' was induced using methyle methane sulfonate (MMS) to obtain mutagens. Among the induced leaf-variegated hosta plants, some with yellow-green leaves were selected. They were cultivated via vegetative propagation. Assessment of the botanical characteristics was conducted for three years since 2004. The major characteristic of these cultivars is that they maintain their yellow-green leaves uniformly all year round. These cultivars are useful as materials for pot plants or as ground cover.
Recently, giant embryonic rice and functional rice food are preferred by more consumers, which are attributed to the fact that the embryo has high concentrations of essential amino acids, fatty acids, and vitamins relative to other parts of rice grains. In this report, the heredity and stability of giant embryo mutations in successive generations were analyzed regarding a giant embryonic line, 'P47', induced by T-DNA insertion and a $F_2$ population from a cross between 'P47' and 'Junam'. The mutant lines with increases of 1.5, 1.7 and 1.8 times on embryo length, width and 100-embryo weight to those of the control showed stable inheritance across three generations. The continuous frequency distributions of embryo size in the $F_2$ population showed that the embryo size is a quantitative trait of polygene controlled. In addition, wide range of transgressive segregations of six traits affecting embryo size confirmed exchange of genetic materials and recombination between genes controlling embryo size. Five giant embryo mutant lines selected from the $F_2$ population will be used for artificial selection and improvement of giant embryonic varieties.
Rice consumption per capta, in South Korea, has been decreased dramatically, owing to the changes of living patterns. Because of not only the major energy source of Korean people but also major income source of Korean farmers, diversifying end-use-quality of rice has been demanded. To the context, 'Suweon 472', a high yielding and early mature japonica line and released as 'Namilbyeo' to framers in 2002, was treated with a chemical mutagen, Sodium Azide to find endosperm mutant types. A total of nine endosperm mutat lines, including five waxy, one dull, two floury, and one white core type, were identified from the 3,542 mutatagen treated lines. Amylose contents, iodine reaction, disintegration in alkali solution, gelatinization in urea solution and amylogram properties of those nine endosperm mutant lines were evaluated to address the possibility as new genetic materials for diversifying rice quality of Korean japonica cultivars. All embryo mutants were clearly differentiated from their wild type, 'Suweon 472', in terms of physic-chemical properties evaluated. The endosperm mutant lines would be very useful in expanding untiliztation of rice through opening new rice markets of processed foods from Korean japonica rice.
Objective: Numerous studies have indicated that the apoptosis and proliferation of granulosa cells (GCs) are closely related to the normal growth and development of follicles and ovaries. Previous evidence has suggested that miR-126-3p might get involved in the apoptosis and proliferation of GCs, and phosphatidylinositol 3-kinase regulatory subunit 2 (PIK3R2) gene has been predicted as one target of miR-126-3p. However, the molecular regulation of miR-126-3p on PIK3R2 and the effects of PIK3R2 on porcine GCs apoptosis and proliferation remain virtually unexplored. Methods: In this study, using porcine GCs as a cellular model, luciferase report assay, mutation and deletion were applied to verify the targeting relationship between miR-126-3p and PIK3R2. Annexin-V/PI staining and 5-ethynyl-2'-deoxyuridine assay were applied to explore the effect of PIK3R2 on GCs apoptosis and proliferation, respectively. Real-time quantitative polymerase chain reaction and Western Blot were applied to explore the regulation of miR-126-3p on PIK3R2 expression. Results: We found that miR-126-3p targeted at PIK3R2 and inhibited its mRNA and protein expression. Knockdown of PIK3R2 significantly inhibited the apoptosis and promoted the proliferation of porcine GCs, and significantly down-regulated the mRNA expression of several key genes of PI3K pathway such as insulin-like growth factor 1 receptor (IGF1R), insulin receptor (INSR), pyruvate dehydrogenase kinase 1 (PDK1), and serine/threonine kinase 1 (AKT1). Conclusion: MiR-126-3p might target and inhibit the mRNA and protein expressions of PIK3R2, thereby inhibiting GC apoptosis and promoting GC proliferation by down-regulating several key genes of the PI3K pathway, IGF1R, INSR, PDK1, and AKT1. These findings would provide great insight into further exploring the molecular regulation of miR-126-3p and PIK3R2 on the functions of GCs during the folliculogenesis in female mammals.
This study was conducted to establish an effective radiation treatment and selection method for induced mutants in M_1 population of soybean treated with gamma-ray. About 64% of total M_1 plants was reduced in plant height up to 50 - 60% and among which 60 - 70% of the plants were contained mutations in M_2 generation. About 60% of the MI plants have born 6 - 15 seeds per plant and 50 - 60% of their progenies produced mutants in M_2 generation. Positive correlation between plant height and number of seeds per plant in M_1 population was found. Higher visible macro-mutation rate in M_2 was observed in the groups of reduced plant height and seed number in the M_1 generation, whereas the frequency of chlorophyll mutation was increased in the group of less damaged plants. The size of mutation sector was increased with reduction in number of seeds per M_1 plant and the mutants were occurred at random in all the parts of M_1 plants. For the effective selection of mutants in soybean mutation breeding, the M_1 seeds should be harvested from the radiation damaged M_1 plants with the application of higher doses of mutagens, and handling M_2 generation by bulk population method is recommendable.
Hong, Jeong Won;Jeong, Chan Young;Yu, Jeong Hee;Kim, Su-Bae;Kang, Sang Kuk;Kim, Seong-Wan;Kim, Nam-Suk;Kim, Kee Young;Park, Jong Woo
Journal of Life Science
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제30권8호
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pp.701-707
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2020
Gene editing technology using the clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR) and the CRISPR associated protein (Cas)9 has been highly anticipated in developing breeding techniques. In this study, we discuss gene scissors as a tool for silkworm molecular breeding through analysis of Bombyx mori Kynurenine 3-Monooxygenase (BmKMO) gene editing using the CRISPR/Cas9 system and analysis of generational transmission through mutagenesis and selective crossing. The nucleotide sequence of the BmKMO gene was analyzed, and three guide RNAs (gRNAs) were prepared. Each synthesized gRNA was combined with Cas9 protein and then analyzed by T7 endonuclease I after introduction into the BM-N silkworm cell line. To edit the silkworm gene, K1P gRNA and Cas9 complexes were subsequently microinjected into the silkworm embryos; the hatching rate was 18% and the incidence of mutation was 60%. The gene mutation was verified in the heterozygous G0 generation, but no phenotypic change was observed. In homozygotes generated by self-crossing, a mutant phenotype was observed. These results suggest that silkworm molecular breeding using the CRISPR/Cas9 system is possible and could be an effective way of shortening the time required.
Cho, Hyun Yong;Park, Seo Jung;Kim, Dong Sub;Jang, Cheol Seong
Korean Journal of Breeding Science
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제42권4호
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pp.365-373
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2010
TILLING (Targeting Induced Local Lesions IN Genomes) is broadly regarded as an excellent methodology for reverse genetics applications. Approximately 15,000 $M_3$ TILLING lines have been developed via the application of gamma-ray irradiation to rice seeds (cv. Donganbyeo), followed by subsequent selections. In an effort to evaluate the genetic diversity of the TILLING population, we have employed the AFLP multiple dominant marker technique. A total of 96 (0.64%) TILLING lines as well as Donganbyeo were selected randomly and their genetic diversity was assessed based on AFLP marker polymorphisms using 5 primer combinations. An average of 100.4 loci in a range of 97 to 106 was detected using these primer combinations, yielding a total of 158 (31.4%) polymorphic loci between Donganbyeo and each of the 96 lines. A broad range of similarity from 80% to 96% with an average of 89.4% between Donganbyeo and each of the 96 lines was also observed, reflecting the genetic diversity of the TILLING population. Approximately 28 polymorphic loci have been cloned and their sequences were BLAST-searched against rice whole genome sequences, resulting in 20 matches to each of the gene bodies including exon, intron, 1 kb upstream and 1 kb downstream regions. Six polymorphic loci evidenced changes in the coding regions of genes as compared to the rice pseudomolecules, 4 loci of which exhibited missense mutations and 2 loci of which exhibited silent mutations. Therefore, the results of our study show that the TILLING rice population should prove to be a useful genetic material pool for functional genomics as well as mutation breeding applications.
Glyphosate inhibits the target enzyme 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase (EPSPS) in the shikimate pathway. A mutant of EPSPS from Pantoea sp. was identified using site-directed mutagenesis. The mutant showed significantly improved glyphosate resistance. The mutant had mutations in three amino acids: Gly97 to Ala, Thr 98 to Ile, and Pro 102 to Ser. These mutation sites in Escherichia coli have been studied as significant active sites of glyphosate resistance. However, in our research, they were found to jointly contribute to the improvement of glyphosate tolerance. In addition, the level of glyphosate tolerance in transgenic Arabidopsis confirmed the potentiality of the mutant in breeding glyphosate-resistant plants.
The economic scale of nuclear application is a good indicator to show how the radiation technology is useful and contribute to improve public welfare and living standard. Recent research in Japan shows that the economic scale of nuclear field was 4,112 B¥ for radiation application(46%) and 4,741 B¥ for nuclear energy (54%) playing a role of "two wheels of one cart" in nuclear field and the total 8,853 B¥ constitutes 1.8% of gross domestic products (GDP). The radiation application consisted of 2,295 B¥ (56%) in industry (semiconductor, sterilization, nondestructive testing, radiation processing of tires, etc.), 1,538 B¥ (37%) in medicine (therapy and diagnosis such as X-ray, nuclear medicine, computed tomography, etc.) and 279 B¥ (7%) in agriculture (mutation breeding, food irradiation, sterile insect technique, etc.). Radiation application by ${\gamma}$-ray, electron beam and ion beam is steadily increasing in Japan.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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