Emerging evidence suggests that gap formation and opening of the endothelial junctions during leukocyte extravasation is actively controlled to maintain the integrity of the vascular barrier. While the role for endothelial cells to this process has been well defined, it is not clear whether leukocytes are also actively contributing to endothelial barrier function. We have recently showed that extravasating leukocytes deposit microparticles on the subendothelium during the late stages of extravasation, which is LFA-1 dependent. Using multiphotonintravital microscopy (MP-IVM) of mouse cremaster muscle vessels in the current work, we show that microparticle formation and deposition maintains the integrity of the microvascular barrier during leukocyte extravasation. Inhibition of neutrophil-derived microparticle formation resulted in dramatically increased vascular leakage. These findings suggest that deposition of microparticles during neutrophil extravasation is essential for maintaining endothelial barrier function and may result in temporal difference between neutrophil extravasation and an increase in vascular leakage.
Lactobacillus crispatus (L. crispatus) ZJ001 is highly adhesive to epithelial cells and expresses S-layer proteins. In this study, S-S-layer layer genes were sequenced and expressed in E. coli to characterize the function of proteins with this particular strain. L. crispatus ZJ001 harbored two S-layer genes slpA and slpB, and only slpA gene was expressed in the bacterium, as revealed by RT-PCR and immunoassays. The mature SlpA showed 47% amino acid sequence identity to SlpB. The SlpA and SlpB of L. crispatus ZJ001 were highly homologous at the C-terminal region to other Lactobacillus S-layer proteins, but were substantially variable at N-terminal and middle regions. Electron microscopic analysis indicated that His-slpA expressed in E. coli was able to form a sheet-like structure similar to the natural S-layer, but His-slpB formed as disc-like structures. In the cell binding experiments, HeLa cells were able to bind to both recombinant His-slpA and His-slpB proteins to the extent similar to the natural S-layer. The cell binding domains remain mostly in the N-terminal regions in SlpA and SlpB, as shown by high binding of truncated peptides SlpA2-228 and SlpB2-249. Our results indicated that SlpA was active and high binding to HeLa cells, and that the slpA gene could be targeted to display foreign proteins on the bacterial surface of ZJ001 as a potential mucosal vaccine vector.
Objectives: This study investigated the administration of Jeungmiyijin-tang (JYT) to rats with reflux esophagitis (RE) induced by pylorus and forestomach ligation operations. Methods: Twenty laboratory rats were divided into three groups with 5~7 rats in each group. The control group consisted of rats with no inflammation (CON). The RE group had rats with gastroesophageal reflux elicited by pylorus and forestomach ligation operations. The JYT group had rats that were orally administered Jeungmiyijin-tang (1.5 ml/day/300 g) once a day for 14 days before reflux esophagitis was induced by the pylorus and forestomach ligation operations. Six hours after the operations, the rats were sacrificed, morphological changes were observed, and histological examinations were done in the stomach and esophagus lesion areas. If apoptosis was observed, the apoptotic cells in the esophagus lesion areas were counted. Results: The morphological and histochemical changes consisted of various injuries from hemorrhagic erosion in the RE group, while there were significantly fewer in the JYT group. The RE group marked increases of gastric mucosa erosion and infiltration of inflammatory cells in the submucosa, as well as cell division in the epithelial layer, the proliferation and degranulation of mast cells, and increases in the IL-$1{\beta}$, TNF-${\alpha}$, and MMP-9 expressions in the esophagus of the rats. The JYT group was inhibited above expression compared with the RE group. Apoptosis was statistically significantly decreased in the JYT group compared with the RE group. Conclusions: According to the above results, it appears that Jeungmiyijin-tang inhibits the expression of pro-inflammatory cytokines (TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, and MMP-9) and apoptosis in the esophagus mucosa, thereby preventing esophageal mucosal damage from esophageal reflux.
Kim, So Jeong;Lee, Jinju;Choi, Woo Sun;Kim, Hyo Jeong;Kim, Mi-Yeon;Kim, Sun Chang;Kim, Hun Sik
Journal of Ginseng Research
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v.45
no.6
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pp.695-705
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2021
Background: Ginsenosides have beneficial effects on several airway inflammatory disorders primarily through glucocorticosteroid-like anti-inflammatory activity. Among inflammatory cells, eosinophils play a major pathogenic role in conferring a risk of severe refractory diseases including chronic rhinosinusitis (CRS). However, the role of ginsenosides in reducing eosinophilic inflammation and CRS pathogenesis is unexplored. Methods: We investigated the therapeutic efficacy and underlying mechanism of ginsenoside F1 (G-F1) in comparison with those of dexamethasone, a representative glucocorticosteroid, in a murine model of CRS. The effects of G-F1 or dexamethasone on sinonasal abnormalities and infiltration of eosinophils and mast cells were evaluated by histological analyses. The changes in inflammatory cytokine levels in sinonasal tissues, macrophages, and NK cells were assessed by qPCR, ELISA, and immunohistochemistry. Results: We found that G-F1 significantly attenuated eosinophilic inflammation, mast cell infiltration, epithelial hyperplasia, and mucosal thickening in the sinonasal mucosa of CRS mice. Moreover, G-F1 reduced the expression of IL-4 and IL-13, as well as hematopoietic prostaglandin D synthase required for prostaglandin D2 production. This therapeutic efficacy was associated with increased NK cell function, without suppression of macrophage inflammatory responses. In comparison, dexamethasone potently suppressed macrophage activation. NK cell depletion nullified the therapeutic effects of G-F1, but not dexamethasone, in CRS mice, supporting a causal link between G-F1 and NK cell activity. Conclusion: Our results suggest that potentiating NK cell activity, for example with G-F1, is a promising strategy for resolving eosinophilic inflammation in CRS.
It has been shown in this and earlier investigation that the turtle bladder mucosa has three main cell types on their mucosal surface. They are the granular cells, ${\alpha}$ CA cells, and ${\beta}$ CA cells. The three major transport mechanisms that occurs in the turtle bladder are sodium reabsorption, proton secretion, and bicarbonate secretion. In the present work the trans-port mechanisms by bladder epithelial cells of freshwater turtle, Pseudemys scripta, are summarized as follows. 1. The granular cells play an important role in sodium transport, while the ${\alpha}$ and ${\beta}$ CA cells do not appear to play a determining role in sodium transport. 2. It appears that the active sodium transport in the granular cells occurs in two-step process, implying that first, sodium diffuses into the cells, followed by an energy-dependent efflux step, which is catalyzed by the ouabain-sensitive Na-K ATPase. 3. The ${\alpha}$ type of CA cells are responsible for the proton secretion using the proton pump on the apical plasma membrane, while the ${\beta}$ type of CA cells are believed to be responsible for bicarbonate secretion. 4. When looked at under freeze-fracture electron microscopy, the apical plasma membrane of ${\alpha}$ cells have a characteristic population of rod-shaped intramembranous particles which are believed to be components of the proton pumps. Conversely, ${\beta}$ type of CA cells show rod-shaped particles in their basolateral plasma membranes, which is consistent with the proton absorptive, bicarbonate secretory mechanism. 5. In the turtle bladder, the ${\alpha}$ and ${\beta}$ type of cells are believed to be both responsible for proton transport, but in opposite directions.
Kim, Yi-Kyung;Jeong, Joon-Bum;Lee, Mu-Kun;Park, Soo-Il;Park, Myeong-Ae;Choe, Mi-Kyung;Yeo, In-Kyu
Journal of fish pathology
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v.24
no.1
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pp.11-18
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2011
This study was aimed to investigate the pathophysiological changes of olive flounder, Paralichthys olivaceus suffering from emaciation. A plasma osmolality was higher in the emaciated and control flounders than that of normal teleost, suggesting osmoregulatory failure in both of them. Also, the control in the same stock with emaciated flounder seem to be classified into a primary degree of emaciation. According to microscopic observations, the inflammatory responses were observed in the submucosal layer of anterior intestine, although the some of mucosal intestinal epithelium still remained. It was suggested that the pathological changes of the anterior part give rise to malabsorption of nutrients through the mucosa. In the posterior intestine and rectum, the mucosal epithelium were almostly sloughed off and severe inflammatory responses were observed in the submucosa. Immunoreaction for NKCC was not detected in the mucosal epithelial cells in intestine because of sloughing of epithelium. These changes would lead to functional disorder in the intestine, such as malabsorption of nutrients and osmoregulatory failure. Also important is to investigate the recovery phase.
Kim, Hyemin;Im, Jong Pil;Kim, Joo Sung;Kang, Jae Seung;Lee, Wang Jae
IMMUNE NETWORK
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v.15
no.3
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pp.135-141
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2015
Dysfunction of gut immune regulation is involved in mucosal damage in inflammatory bowel disease (IBD). However, there is still no efficacious immune-regulator for the treatment of IBD. Alloferon is a novel immune-modulatory peptide that was originally isolated from infected insects. It shows anti-inflammatory effects by the regulation of cytokine production by immune cells and their activities. Therefore, we investigated the effect of alloferon in a mouse model of colitis using dextran sulfate sodium (DSS). Colitis was induced by administration of DSS in drinking water for 7 consecutive days. It was confirmed by the presence of weight loss, diarrhea, hematochezia, and colon contraction. Alloferon was injected 4 days after DSS administration. We found that alloferon improved the pathogenesis of IBD based on the reduced disease activity index (DAI) and colon contraction. Edema, epithelial erosion, and immune cell infiltration were found in mice administered DSS, but the phenomena were reduced following alloferon treatment. The plasma level of IL-6, a classical pro-inflammatory cytokine in colitis, was also decreased by alloferon. Moreover, alloferon inhibited the TNF-${\alpha}$-induced degradation and phosphorylation of $I{\kappa}B$ in Colo205 colon cancer cells. Taken together, these results show that alloferon has anti-inflammatory effects and attenuates DSS-induced colitis.
Enteroaggregative E. coil (EAEC) is an important aethiological causal agent of diarrhea in people of developed and undeveloped countries. Different in vitro and in vivo models have been proposed to study the pathdgenic and immune mechanisms of EAEC infaction. The aim of this study was to analyze whether BALB/c mice could be used as an animal model to study EAEC pathogenesis Six-week-old BALB/c mice were inoculated with EAEC strain 042 (044:H88) nalidixic acid resistant, and re-inoc-ulated ten days after. Mice feces were monitored for the presence of the EAEC strain over a period of 20 days . Bacteria were enumerated on MacConkey agar containing 100$\mu$g of nalidixic acid per ml. Results showed that 35% of the animals were colonized for 3 days, 15% for 5 and 10% for more than 7 days . After re-inoculation only 16% of the animals remained colonized for more than 3 days. During the necropsy, the intestinal fluid of same of the infected animals presented mucus and blood. Six of these fluids showed the presence of IgA antibodies againset Pet toxin and IgG natibodies raised against the toxin were also detected in the animal serum. Histopathologic evidence confirms the stimulation of mucus hypersecretion, an increased amount of goblet cells and the presence of bacterial aggregates in the apical surfaces of intestinal epithelial cells. Edema was present in the submucosa. These results suggest that BALB/c mice could be used as an animal model for in vivo study of EAEC infection.
This study was carried out to examine the $H^+$ transport mechanism by observing the properties of cellular membrane having an ${\alpha}$ type of carbonic anhydrase (CA)-containing cells in turtle urinary bladder. The urinary bladder consists of a heterogenous population of cells. As a result of fine observation with traditional thin-section electron microscopy. the bladder epithelium has three different cell types on mucosal surface. They are a basal cell, a granular cell and a third type of CA-rich cell. The CA-rich cells are divided into two distinct smaller groups within them and called them ${\alpha}$ type and ${\beta}$ type of CA cells. The ${\alpha}$ type of CA cells are responsible for the proton secretion using the proton pumps on the apical plasma membrane, while the ${\beta}$ type of CA cells secrete bicarbonate via an oppositely-directed proton pumps in their basolateral plasma membrane. After performing the freeze-fracture technique, it was shown that there were distributed a large number of intramembranous particles having a special structure on the apical membrane of ${\alpha}$ type of CA-rich cells in the process of their $H^+$ secretion. In turtle bladder ${\alpha}$ type of CA-rich cells, this particle was the only prominent structure in the apical membrane. These intramembrane rod-shaped particles probably represent the integral membrane components of the proton pump. This result may explain that carbonic anhydrase within epithelial cell of urinary bladder takes part in formation of $H^+$ and bicarbonate, that active transport of $H^+$ is done, and that the reabsorption of bicarbonate suggests transport mechanism containing $H^+$ secretion. However, it seems that more studies are required for considering their regular transport pathway.
An, Chul Min;Kim, Jae Won;Jin, Young Guk;Park, Jung Jun;Lee, Jung Sick
Korean Journal of Ichthyology
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v.19
no.3
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pp.201-209
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2007
The fine structures and histochemical features on the integumentary system of the grass puffer, Takifugu niphobles were examined by means of the light and transmission electron microscopy. Integumentary surface of the grass puffer showed irregular folds in light microscope. The folds of the ventral region are more pronounced than those in the dorsal region. Integumentary system is composed of outer epidermal layer and inner dermal layer. The stratified epidermal layer consists of epithelia, mucous cells, club cells, granular cells and multivacuolar gland. Epithelial cells are classified into superficial, intermediated and basal cell, and free surface of superficial cell is covered with microridges. Glands of the epidermal layer are divided into unicellular and multicellular gland. Mucous cells of multicellular gland contains mucosal materials of neutral glycoprotein. Multivacuolar gland is composed of numerous vacuole cells of about $20{\mu}m$ in axial diameter. Vacuole cells contains a large central vacuole and are connected to another by many desmosomes. The mucous glands and multivacuolar glands are more abundant in ventral region than dorsal integument. The thickness of dermis is more three to five times than epidermis in ventral integument. The collagen fibers, fibrocytes, nerve cells, basal plate of spine and chromatophore are observed in the dermal layer of compact connective tissue.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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