Heat shock protein (HSP) expression is unregulated in tumor cells and, HSP expression is likely marker of the malignant potential of oral epithelial lesion. Furthermore, the 70kDa HSP is implicated in the degree of tumor differentiation, the rate of tumor proliferation and the magnitude of the anti-tumor Immune response. Accordingly, the distribution and intensity of HSP70 and HSP47 expression was assessed in the DMBA induced oral carcinogenesis in hamster. Golden Syrian hamsters which were 3 months-age and $90{\sim}120g$ were collected. 9,10-dimethyl -1,2-benzanthracene (DMBA) in a 0.5% solution in mineral oil was painted on the buccal pouch mucosa 3 times per week in the study group. In each control and experimental groups of 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20 weeks, specimen were sectioned for immunohistochemical study with anti-HSP47 and anti-HSP70 antibody. The following results were obtained. 1. HSP47 positive cells were race or negative of normal oral mucosa, increased mildly in basal and suprabasal basal layer, and spinous cell layer after experimental 6 weeks (dysplastic or CIS stage). In CIS stage, HSP47 expression is prominent in dysplastic free or normal adjacent epithelium. 2. HSP47 positive cells in connective tissue were mainly inflammatory cells, which is gradually increased from control to precancerous and cancer stage. But HSP47 positive cells after 14 weeks were decreased, especially normal and cancer adjacent epithelium. 3. The positive staining cells of HSP70 in control, dysplastic, and CIS stage were not seen. But they were mild findings in basal layer and moderate findings in spinous layer after experimental 14 weeks (cancer stage). 4. HSP70 positive cells were increased in precancerous and cancer stage than control group in connective tissue. After experimental 16 weeks, we could not find the HSP expression in cancer cells according to cancer differentiation or cancer stage. It is concluded that HSP70 or HSP47 expression is not a definitive marker of oral malignancy or malignant potential. However, with further development, HSP immunoreactivity may be valuable as an adjunct to conventional histology for assessing the malignant potential of oral mucosal lesions.
Heat shock protein (HSP) expression is unregulated in tumor cells and, HSP expression is likely marker of the malignant potential of oral epithelial lesion. Furthermore, the 70kDa HSP is implicated in the degree of tumor differentiation, the rate of tumor proliferation and the magnitude of the anti-tumor immune response. Accordingly, the distribution and intensity of HSP 70 and HSP 47 expression was assessed in the DMBA induced oral carcinogenesis in hamster. Golden Syrian hamsters which were 3 months-age and 90-120g were collected. 9,10-dimethyl-1,2-benzanthracene (DMBA) in a 0.5% solution in mineral oil was painted on the buccal pouch mucosa 3 times per week in the study group. In each control and experimental groups of 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20 weeks, specimen were sectioned for immunohistochemical study with anti-HSP47 and anti-HSP70 antibody. The following results were obtained. 1. HSP47 positive cells were rare or negative of normal oral mucosa, increased mildly in basal and suprabasal basal layer, and spinous cell layer after experimental 6 weeks (dysplastic or CIS stage). In CIS stage, HSP47 expression is prominent in dysplastic free or normal adjacent epithelium. 2. HSP 47 positive cells in connective tissue were mainly inflammatory cells, which is gradually increased from control to precancerous and cancer stage. But HSP47 positive cells after 14 weeks were decreased, especially normal and cancer adjacent epithelium. 3. The positive staining cells of HSP70 in control, dysplastic, and CIS stage were not seen. But they were mild findings in basal layer and moderate findings in spinous layer after experimental 14 weeks (cancer stage). 4. HSP70 positive cells were increased in precancerous and cancer stage than control group in connective tissue. After experimental 16 weeks, we could not find the HSP expression in cancer cells according to cancer differentiation or cancer stage. It is concluded that HSP70 or HSP47 expression is not a definitive marker of oral malignancy or malignant potential. However, with further development, HSP immunoreactivity may be valuable as an adjunct to conventional histology for assessing the malignant potential of oral mucosal lesions.
Zhang, Peng;Hong, Ji;Yoon, I Na;Kang, Jin Ku;Hwang, Jae Sam;Kim, Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권6호
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pp.1163-1170
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2017
Clostridium difficile releases two exotoxins, toxin A and toxin B, which disrupt the epithelial cell barrier in the gut to increase mucosal permeability and trigger inflammation with severe diarrhea. Many studies have suggested that enteric nerves are also directly involved in the progression of this toxin-mediated inflammation and diarrhea. C. difficile toxin A is known to enhance neurotransmitter secretion, increase gut motility, and suppress sympathetic neurotransmission in the guinea pig colitis model. Although previous studies have examined the pathophysiological role of enteric nerves in gut inflammation, the direct effect of toxins on neuronal cells and the molecular mechanisms underlying toxin-induced neuronal stress remained to be unveiled. Here, we examined the toxicity of C. difficile toxin A against neuronal cells (SH-SY5Y). We found that toxin A treatment time- and dose-dependently decreased cell viability and triggered apoptosis accompanied by caspase-3 activation in this cell line. These effects were found to depend on the up-regulation of reactive oxygen species (ROS) and the subsequent activation of p38 MAPK and induction of $p21^{Cip1/Waf1}$. Moreover, the N-acetyl-$\text\tiny L$-cysteine (NAC)-induced down-regulation of ROS could recover the viability loss and apoptosis of toxin A-treated neuronal cells. These results collectively suggest that C. difficile toxin A is toxic for neuronal cells, and that this is associated with rapid ROS generation and subsequent p38 MAPK activation and $p21^{Cip1/Waf1}$ up-regulation. Moreover, our data suggest that NAC could inhibit the toxicity of C. difficile toxin A toward enteric neurons.
본 연구는 생리적, 환경적 변화에 따른 명태 Gadus chalcogrammus 피부계의 변화 연구를 위한 기초 연구로서 피부계의 구조, 구성 세포 종류 및 조직화학적 특징을 기재하였다. 측선은 전반부가 완만한 곡선형이었으며, 중반부터 후반부까지는 직선으로 나타났다. 피부는 상피층과 진피층으로 구성되며, 상피층은 다층으로 상피세포, 점액세포, 곤봉세포로 이루어져 있다. 상피세포는 표면층의 편평형 세포, 중간층의 입방형 세포, 기저층의 원주형 세포로 구성된다. 상피층의 두께는 122.9 ㎛, 체장에 대한 상피층의 두께 비율은 0.03%였다. 단세포선인 점액세포와 곤봉세포는 주로 상피층의 표면층과 중간층에 분포하며, 점액세포는 산성 당단백질의 점액물질을 함유하고 있었다. 상피층에서 점액세포와 곤봉세포의 분포비율은 각각 21.3 (± 7.0.)%와 4.0 (± 1.0)%였다. 진피층은 치밀결합조직으로 주로 콜라겐 섬유로 구성되며, 섬유세포, 혈관, 색소포, 비늘이 관찰되었다.
Interferon (IFN)-λ plays an essential role in mucosal cells which exhibit strong antiviral activity. Lactobacillus plantarum (L. plantarum) has substantial application potential in the food and medical industries because of its probiotic properties. Alphacoronaviruses, especially porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) and transmissible gastroenteritis virus (TGEV), cause high morbidity and mortality in piglets resulting in economic loss. Co-infection by these two viruses is becoming increasingly frequent. Therefore, it is particularly important to develop a new drug to prevent diarrhea infected with mixed viruses in piglets. In this study, we first constructed an anchored expression vector with CWA (C-terminal cell wall anchor) on L. plantarum. Second, we constructed two recombinant L. plantarum strains that anchored IFN-λ3 via pgsA (N-terminal transmembrane anchor) and CWA. Third, we demonstrated that both recombinant strains possess strong antiviral effects against coronavirus infection in the intestinal porcine epithelial cell line J2 (IPEC-J2). However, recombinant L. plantarum with the CWA anchor exhibited a more powerful antiviral effect than recombinant L. plantarum with pgsA. Consistent with this finding, Lb.plantarum-pSIP-409-IFN-λ3-CWA enhanced the expression levels of IFN-stimulated genes (ISGs) (ISG15, OASL, and Mx1) in IPEC-J2 cells more than did recombinant Lb.plantarum-pSIP-409-pgsA'-IFN-λ3. Our study verifies that recombinant L. plantarum inhibits PEDV and TGEV infection in IPEC-J2 cells, which may offer great potential for use as a novel oral antiviral agent in therapeutic applications for combating porcine epidemic diarrhea and transmissible gastroenteritis. This study is the first to show that recombinant L. plantarum suppresses PEDV and TGEV infection of IPEC-J2 cells.
왕종개 Iksookimia longicorpa의 공기호흡에 관한 호흡체계를 조사하기 위해 표피 (epidermis)와 소화관 (intestinal tract)를 관찰하였다. 표피는 작은 점액세포 (mucous cell)와 곤봉세포 (club cell)로 이루어진 두 종류의 선세포 (gland cell)을 가진다. 점액세포는 대부분 acid sulfomucin으로 구성되었으나 곤봉상세포는 점액물질에 대한 어떠한 반응도 보이지 않았다. 기저층에는 작은 림파구를 포함하는 lymphocytes가 존재하며, 다량의 모세혈관이 기저층 바로 아래부분에 존해하고 있다. 장( intestinal tract)은 거의 일직선형태이며, 크게 장(intestine)과 직장(rectum)으로 구성된다. 이러한 장은 점액층 (mucosa), 점막하층 (laminal propria-submucosa), 근육층 (musculary), 장막 (serosa) 층으로 구성되었다. 이러한 장은 짧은 fold와 얇은 벽으로 구성되었으며, 점막층은 acid sulfomucin의 점액을 가지고 있다. 공기호흡하는 어류들의 변형된 공기호흡 기관의 특징들과 비교해 볼 때 왕종개는 하천의 가뭄으로 인해 용존산소가 부족할 경우 장에서는 이루어지지않고 표피에서만 공기를 흡입하는 것으로 생각된다.
As an epidemiological survey, mortality of marbled rockfish, Sebastiscus tertius observed from a fish farm in Gyeongnam province of South Korea. The major macroscopic sign of the diseased fish was severe multifocal dermal ulceration. Histological observation revealed inflammation, necrosis and colonization of bacteria in various tissues (gill, liver, spleen and kidney). Bacteria was isolated from spleen and kidney in moribund and mortality fish. Seven bacterial isolates from the diseased fish were identified as Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida using API 20E and 20NE, API 50CH API ZYM system. Under light microscopy, infected marbled rockfish showed the lifting of the lamella epidermal layer, edematous changes and hypertrophy of epithelial cell in the gill filament. The atrophy of the mucosal fold, erythema in the intestine, and the necrosis of hematopoietic tissue and renal tubule cells with karyolysis were observed in the kidney. In this study was demonstrated the histological reaction of red marbled rockfish infected by Aeromonas salmonicida. Furthermore, this is the first account of extensive dermatitis in Sebastiscus tertius due to atypical A. salmonicida infection, which has high potential in aquaculture among native fish species.
Probiotics are live microorganisms that, when administered in adequate amounts, confer health benefits to the host. This study was conducted for the isolation of potential lactic acid bacteria (LAB) with probiotic properties from goat milk and yogurt. Several tests were conducted in vitro using the standard procedures for evaluating the inhibitory spectra of LAB against pathogenic bacteria; tolerance to NaCl, bile salt, and phenol; hemolytic, milk coagulation, and bile salt hydrolase activities; gastrointestinal transit tolerance; adhesion properties; and antibiotic susceptibility. Among 40 LAB strains screened according to culture characteristics, five isolates exhibited antagonistic properties. Three were identified as Pediococcus acidilactici, and two were identified as Enterococcus faecium, exploiting 16S rRNA gene sequencing. All the isolates succeeded in the gastrointestinal transit tolerance assay and successively colonized mucosal epithelial cells. Based on the results of these in vitro assays, both P. acidilactici and E. faecium can be considered as potential probiotic candidates.
Emerging evidence suggests that gap formation and opening of the endothelial junctions during leukocyte extravasation is actively controlled to maintain the integrity of the vascular barrier. While the role for endothelial cells to this process has been well defined, it is not clear whether leukocytes are also actively contributing to endothelial barrier function. We have recently showed that extravasating leukocytes deposit microparticles on the subendothelium during the late stages of extravasation, which is LFA-1 dependent. Using multiphotonintravital microscopy (MP-IVM) of mouse cremaster muscle vessels in the current work, we show that microparticle formation and deposition maintains the integrity of the microvascular barrier during leukocyte extravasation. Inhibition of neutrophil-derived microparticle formation resulted in dramatically increased vascular leakage. These findings suggest that deposition of microparticles during neutrophil extravasation is essential for maintaining endothelial barrier function and may result in temporal difference between neutrophil extravasation and an increase in vascular leakage.
Lactobacillus crispatus (L. crispatus) ZJ001 is highly adhesive to epithelial cells and expresses S-layer proteins. In this study, S-S-layer layer genes were sequenced and expressed in E. coli to characterize the function of proteins with this particular strain. L. crispatus ZJ001 harbored two S-layer genes slpA and slpB, and only slpA gene was expressed in the bacterium, as revealed by RT-PCR and immunoassays. The mature SlpA showed 47% amino acid sequence identity to SlpB. The SlpA and SlpB of L. crispatus ZJ001 were highly homologous at the C-terminal region to other Lactobacillus S-layer proteins, but were substantially variable at N-terminal and middle regions. Electron microscopic analysis indicated that His-slpA expressed in E. coli was able to form a sheet-like structure similar to the natural S-layer, but His-slpB formed as disc-like structures. In the cell binding experiments, HeLa cells were able to bind to both recombinant His-slpA and His-slpB proteins to the extent similar to the natural S-layer. The cell binding domains remain mostly in the N-terminal regions in SlpA and SlpB, as shown by high binding of truncated peptides SlpA2-228 and SlpB2-249. Our results indicated that SlpA was active and high binding to HeLa cells, and that the slpA gene could be targeted to display foreign proteins on the bacterial surface of ZJ001 as a potential mucosal vaccine vector.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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