Mucor pusillus var. Lindt가 생산하는 Mucor rennet와 Crystalline Mucor rennin에 대한 응유효소로서의 일반적 성질을 Hansen's calf rennet 및 Mucor rennet와 비교하여 검토한 결과 $63^{\circ}C$에서 30분 가열한 후 $CaCl_2$를 0.01M 첨가한 우유에 대하여 $30^{\circ}C$에 측정된 응유력은 HR: MR: CMR=1:2.43:12.09된다는 것을 알 수 있었으며 건조 curd의 최대 수율이 비슷하였고 산도증가에 따른 curd 수율의 감소, 산도증가에 따른 응유활성의 강화, $CaCl_2$ 첨가량의 증가에 따른 응유활성의 증가, 등의 제 성질이 유사하였다. 응유온도에서는 HR이 $45^{\circ}C$ 정도에서 응유활성이 가장 높았고 MR과 CMR의 경우에는 $30^{\circ}C$부터$50^{\circ}C$사이에서 온도상승과 더불어 응유활성이 증가되었다. 치즈착색에 사용한 치자추출활색소는 착색이 잘되며 식용황색 5호와 비교할 때 이보다 색상이 좋은 결과를 보였다. 그러나 과량을 가하게 되면 치즈에서 치자냄새가 풍기므로 우유 10kg에 대하여 치자 3g이하에서 추출한 색소로 착색하는 것이 이상적이라는 것을 알수 있었다. 또한 CMR을 이용하여 Gouda형 치즈를 제조한 결과 HR, MR을 사용하여 제조한 대조 치즈에 비하여 curd의 수율이 비슷하였고 치자추출액에 의해 착색하지 않은 경우에도 착색한 경우와 차이가 없는 것으로 보아 curd 생산에 치자추출액이 영향을 미치지 않는 것을 알 수 있었고 숙성도는 MR Cheese, CMR Cheese, UMR Cheese가 HR Cheese 보다 높았으며 맛과 냄새에 있어서는 HR Cheese와 완전히 일치하지는 않지만 소비자의 미각으로 구별하기 어려운 정도로 비슷하였다. 이와 같이 Crystalline Mucor renin에 의해서 제조할 수 있는 방법이 확립되므로 송아지 Rennet를 이용했을 때보다 염가의 치즈생산이 가능함은 물론 Mucor rennet를 이용했을 때 때로는 응유효소에 오염된 미생물들로 인하여 치즈에서 쓴 맛이 나는 경우가 있었는 데 이러한 문제가 해결됨을 알 수 있었다.
Mucor rennet의 이용(利用) 가능성(可能性)을 타진(打診)하기 위하여 Blue cheese를 제조(製造)하고 그 각종(各種) 질소화합물(窒素化合物)의 특성(特性)을 조사(調査)한 결과(結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. Blue cheese의 수율(收率)은 calf rennet과 Mucor rennet간(間)에는 큰 차이(差異)가 없었다. 2. 숙성과정중(熟成過程中) cheese의 고형분(固形分) 함량(含量)은 증가(增加)하였고 첨가비율(添加比率)에 따른 차이(差異)는 인정(認定)되지 않았다. 3. water soluble nitrogen은 숙성(熟成)이 진행(進行)됨에 따라 증가(增加)하였으며 숙성초일(熟成初日)부터 calf rennet에 비(比)하여 Mucor rennet 편이 높았고 숙성(熟成) 40일(日)부터는 혼합(混合)rennet이 calf rennet보다 낮았다. 4. non protein nitrogen, peptone amino nitrogen, water soluble protein nitrogen, proteose nitrogen, peptone nitrogen 및 숙성율등(熟成率等)도 water soluble nitrogen과 동등(同等)한 변화(變化)를 보였다. 5. Mucor rennet으로 제조(製造)한 Blue cheese casein을 전기영동(電氣泳動)한 결과(結果) as-casein과 ${\beta}$-casein의 분해도(分解度)가 높았으나 calf rennet로 제조(製造)한 Blue cheese의 as-casein과 ${\beta}$-casein의 분해도(分解度)는 비교적 낮았고 숙성(熟成) 60일(日)에는 Mucor rennet 처리구(處理區)의 casein은 다소 잔존(殘存)함을 알 수 있었다. 6. Blue cheese를 60일간(日間) 숙성(熟成)시켰을때 유리(遊離)아미노산(酸) 함량(含量)은 Mucor rennet으로 제조(製造)한 cheese보다 전(全) 숙성기간(熟成期間)동안 많았다.
When of the synthetic peptides were subjected hydrolysis with Mucor-rennin which crystalline milk-clotting enzyme from Mucor pusillus, the peptides of Z-L-Glu-L- Phe-OH, Z-L-Phe-L-Tyr-OH, Z-L-Phe-L-Leu-OH, Z-L-Tyr-L-Leu and Z-L-Glu-L-Phe-OH, were found to be hydrolysis.
가스크로마토그라프와 질량분석기 (GC-MS)를 이용하여 감마리놀렌산(GLA) 생산 균주를 선발하였다. KACC에 보존 중인 Phytophthora 속, Pythium 속 및 Mucor 속 및 Rhizopus 속 등 4속에 속하는 44개 균주를 GC-FID를 통하여 GLA를 분석하였다. 4속 39종의 곰팡이 균주에서 GLA를 확인하였으며, M. hiemalis f. sp. hiemalis KACC 40264 균주에서는 GLA의 조성비가 전체 지방산의 24.8%로서 가장 높은 비율을 나타냈다. 속간에 전체적인 GLA 함량은 Mucor 속(14.2%)과 Rhizopus 속(14.3%)의 Zygomycota가 상대적으로 높은 함량을, 그리고 Phytophthora 속(3.3%)과 Pythium 속(3.0%)의 Oomycota는 낮은 함량을 나타냄으로서 뚜렷한 양분현상을 나타냈다. 지방산총량에서도 Mucor 속(15.4 mg/100 ml)과 Rhizopus 속(7.1 mg/100 ml)가 Phytophthora 속(2.6 mg/100 ml)와 Pythium 속(4.5 mg/100 ml)보다 높게 나타나서 전체적으로 지방산을 생산하는 유용한 균류자원으로 평가되었다. Mucor 속 내에서도 계통별로 큰 차이를 나타냈는데 18.2%의 GLA를 생성함으로 지방산총량이 50.8 mg/100 ml까지 이른 Mucor blumbeus KACC 40935가 실제적으로 가장 활력이 좋은 균주로 평가되었다.
the nucleotide sequence of the 3' terminal 568 bases of the 18S rRNA gene from Mucor racemosus was determined. The 3' end of the structural gene was identified by comparison with the published sequence for the Saccharomyces cerevisiae gene. The M. racemosus gene was found to share 83.8% homology with that of S. cerevisiae and 71-81% homology with those of human, mouse, maize, Xenopus laevis and Tetrahymena thermophila. The known methylation sites in X. laevis and human were also highly conserved in M. racemosus and located within most conserved regions of 18S RNA gene throughout evolution.
Protease production and its characteristics were investigated with Mucor racemosus f. racemosus PDA 103 which was isolated from Korean traditional meju. Optimum culture conditions of the strain for the production of the protease in basic medium[bean(Baektae):H2O=1:1(w/v)] were as follows: pH 6, 3$0^{\circ}C$ and 72hrs. Optimum pH and temperature for the enzyme activity of the protease produced by Mucor racemosus f. racemosus were pH 5 and 5$0^{\circ}C$, respectively. The enzyme was relatively stable a pH2.0~5.0 and at temperature below 4$0^{\circ}C$. Phenylmethane-sulfonyl fluoride and Ag+ inhibited the enzyme activity. This indicates that the enzyme is serine protease. Km value was 0.9$\times$10-4M and Vmax value was 5.93$\mu\textrm{g}$/min. This enzyme hydrolyzed casein more rapidly than bovine albumin.
The filamentous bacterium Leucothrix mucor, an epiphyte of seaweed, showed antifouling activity against Ulva pertusa spore settlement and germling development. The chemical constituents representing the antifouling activity were identified as giffinisterone B and oleamide based on nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy and mass spectroscopy (MS). Approximately 3.6 mg of giffinisterone B and 2.8 mg of oleamide were isolated from 1.6 g of Leucothrix mucor crude extract. Giffinisterone B fully inhibited spore settlement and germling development at $100{\mu}g/mL$. Oleamide inhibited spore settlement at $10{\mu}g/mL$ and germling development at $100{\mu}g/mL$.
Mucor-rennin, the crystalline milk-clotting enzyme, isolated from Mucor pusillus var. Lindt, has an acid protease activity. The optimum pH for the digestion of k-casein is 4.5, while that for hemoglobin digestion is 4.0. The skim milk solution was easily clotted acidic solution than alkalin solution, and the milk clotting activated by Ca ion. The enzyme was heat stable against heat from pH 4.0 to 6.0 but was more stable at pH 5.0. The activity of the enzyme at pH 5.0 did not decrease at 30 C for 15 days and the activity was not effected by sodium propionate and salicilic acid. Therefore, the enzyme of liguid type could store for a long time and could be transported from Erzyme production Co. to Manufacture of cheese Co. by adding the antiesptic and by adjusting pH to 5.0.
미생물에서 추출된 lipase를 유지방분해에 이용하기 위한 기초연구로서 Rhizopus delemar, Mucor sp. 및 Candida cylindracea에서 추출된 3중의 lipases를 유지방분해에 적합한 반응조건을 설정하고, 이들의 반응 특이성을 연구한 결과는 다음과 같다. 최적온도 및 최적pH는 Rhizopus delemar lipases가 $45^{\circ}C$, pH5.6 Mucor sp. lipases가 $35^{\circ}C$, pH7.5였으며, Candida cylindracea lipase는 $35^{\circ}C$, pH 7.0 이었다. 유지방에 대한 적정효소농도는 3종의 lipase 모두 $600{\sim}800\;units/ml$였다. 적정기질농도는 효소의 종류에 관계없이 유지방함량 20%였으며, 이들의 Km값은 R. delemar lipase가 6.06%, M sp. lipase가 7.69%, Can. cylindracea lipase가 7.99%였다. 반응시간에 따른 반응율을 조사한 결과 R. delemar lipase, M. sp. lipase, Can. cylindracea lipase순으로 높았으며 반응시간이 진행됨에 따라 저급지방산의 분해율이 높아졌으며, 반응 8시간에서는 R. delemar lipase는 butylic acid, M. sp. lipase는 palmitic acid, Can. cylindracea lipase는 Capric acid의 함량이 높았다.
${\gamma}-linolenic$ acid를 함유한 유지를 생산하기 위해 포도당을 주기적으로 첨가하면서 Mucor sp. KCTC 8405P를 유가배양하였다. 배양 시작 후 2일까지 효모 모양으로 배양한 후 배지의 pH를 높여 균사체 모양으로 유도하여 배양하면, 지방질은 포도당이 고갈되는 배양 7일째까지 축적되었다. 본 배양조건에 의하여 건조 균체량 99.3 g/l, 총지방질 38.0 g/l와 3.5 g/l의 ${\gamma}-linolenic$ acid를 얻을 수가 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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