Two flavonoids (1 and 2) and one phenolic acid (3) obtained from Erigeron annuus have recently been shown to have potent antioxidant activities. Aim of this study was to investigate the inhibitory effects of these components on $interferon-{\gamma}$ and lipopolysaccharide-induced nitric oxide productions in the mouse pheritoneal macrophage. Compounds 2 and 3 showed marked inhibitory activities against inducible nitric oxide synthase (iNOS) on the lipopolysaccharide and $interferon-{\gamma}-stimulated$ mouse pheritoneal macrophages without cytotoxicity. Therefore, these results suggest that the compounds could be effective anti-inflammatory agents as nitric oxide inhibitors in vivo.
This study was performed to observe the therapeutic effects of interferon-gamma ($IFN-{\gamma}$) and gamma-globulin (${\gamma}-globulin$) in experimental Pneumocystis carinii pneumonia of immune suppressed mice. After 9 weeks, trimethoprim-sulfamethoxaBole(TMP-SMZ; 10~50 mg/mouse/day), mouse $IFN-{\gamma}(5{\times}10^4$ units/mouse/day) and mouse ${\gamma}-globulin$(20 mg/mouse/day) were administered to the mice for 3 weeks by the experimental group. The therapeutic efficacy was evaluated by body weights, histopatholo단ic and electron microscopic findings of the lungs, and number of p. carinii cysts by Gomori's methenamine silver stain. Body weights of the mice were significantly increased in the group of combination therapy of TMP-SMZ with $IFN-{\gamma}{\;}or{\;}{\gamma}-globulin$, and in the group of TMP- SMZ treatment(p<0.05), however, little effect was found in the group of T-globulin alone. Histopathologic 6ndings of p. carinii pneumonia were much improved in the group of combination therapy of TMP-SMZ with $IFN-{\gamma}$. Treatment with either TMP-SMZ or $IFN-{\gamma}$ significantly reduced the number of cysts in the p. carinii pneumonia, but {\gamma}-globulin alone was ineffective. In electron microscopic findings of p. carinii pneumonia, the number of trophozoites and cysts were reduced by treatment with either TMP-SMZ or $IFN-{\gamma}$, and most of the cysts were empty or containing one or two intracystic bodies. The present results suggested, that combination therapy of TMP-SMZ with $IFN-{\gamma}$ had synergistic effects in treatment of P carinii pneumonia in experi- mental mice.
The mouse interferon gene (MuIFN-${\gamma}$) was cloned and then used to transform Saccharomyces cerevisiae. Expressed MuIFN-$\{gamma}$ protein (MuIFN-${\gamma}$) was successfully secreted into culture medium due to the presence oi the signal peptide of rice amylase 1A. Two different promoters fused to MuIFN-${\gamma}$ were tested: glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GPD) promoter and a yeast hybrid ADH2-GPD (AG) promoter consisting of alcohol dehydrogenase II (ADH2) and GPD promoter. Using the hybrid promoter, the accumulation of MuIFN-${\gamma}$transcript was the highest after the 24 h cultivation, and then gradually decreased as the cultivation proceeded. However, both cell growth and recombinant MuIFN-${\gamma}$production reached their peaks after the 4-day cultivation. It was possible to produce 6.5 mg/l of MuIFN-${\gamma}$ without any changes in cell growth. Using GPD promoter, the MuIFN-${\gamma}$ transcript accumulation and the recombinant MuIFN-${\gamma}$ production followed the same pattern as the cell growth. However. compared to that of the hybrid promoter, the production of recombinant MuIFN-${\gamma}$ was 0.2 mg/l. The secreted MuIFN-${\gamma}$ had estimated molecular masses of 21 kDa and 23 kDa, which were larger than that of the encoded size due to glycosylation. The protection assay against the viral infection indicated that the recombinant MuIFN-${\gamma}$ was bioactive.
Toxoplasmn감염 마우스에 있어서 $interferon-{\gamma}(IFN-{\gamma})$ 투여 시기에 따른 T세포 아형 변화를 관찰하였다. T. gondii Beverley주를 감염시킨 마우스(마우스당 약 100개의 씨스트)에 recombinantmouse $IFN-{\gamma}$(마우스당 $5{\;}{\times}{\;}10^4$ Units)를 감염 4일전/2일전, 감염 2일전/감염일, 감염일/감염후 2일, 감염후 2일/4일에 각각 투여한 다음, 이들 4군의 비장 림프구 T 세포 아형 변화를 매주 1회씩 4주 동안 단세포군 항체를 이용하여 flow cytometry로 분석하였다. Thy-1, 2 세포 (전체 T 세포)는 감염 1주부터 감소하여 2주에 가장 적었으며, 감염대조군에 비해 $IFN-{\gamma}$를 감염 2 일전/감염일 또는 감염일/감염후 2일 투여군에서 유의하게 증가하였다. L3T4 세포(helper/lnducer T 세포)는 유의한 차이가 없었으며, Ly-2 세포($cytotoxic$pressor T 세포)는 $IFN-{\gamma}$투여시 감염 2주까지는 감염대조군과 유사하였으나 감염 3, 4주에는 모두 감소하였다. L3T4/Ly-2 세포 비율은 감염 1주 이후부터 감소하였으며, $IFN-{\gamma}$를 감염 2일전/감염일 또는 감염일/감염후 2일 투여군에서 유의하게 증가하였다. 이상의 성적으로 보아 Toxoplasma 감염 마우스에 $IFN-{\gamma}$ 투여시 변화된 T 세포 아형이 정상 상태로 회복되었으며, $IFN-{\gamma}$를 감염 직후 투여시 더욱 현저한 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
Mouse guanylate-binding protein 3 (mGBP3) is a 71-kDa GTPase which belongs to GTP-binding protein family. The present study showed that the expression of mGBP3 transcript was readily induced in a dose dependent fashion in the macrophage cell line RAW264.7 treated with either $interferon-{\gamma} (IFN-\gamma)$ or lipopolysaccaride (LPS). The expression of mGBP3 protein was also apparent by 4 and 6 h after the treatment of cells with IFN-\gamma (100 U/ml) or LPS ($1{\mu}g/ml$) , and remained at palteau for at least 24 h. Cycloheximide ($10{\mu}g/ml$) had no effect on the $IFN-\gamma-$ or LPS-induced mGBP3 expression, suggesting that the mGBP3 induction did not require further protein synthesis. Interestingly, a protein kinase C (PKC) inhibitor staurosporine (50 nM) abolished the induction of mGBP3 expression by LPS, but not by $IFN-{\gamma}$. These findings suggest that mGBP3 may be involved in the macrophage activation process and both IFN-\gamma and LS induce the mGBP3 expression through distinct signal transduction pathways.
Interferon(IFN) is a sort of glycoproteins that are produced by activated lymphocyte, monocyte and fibroblast. IFN has anti-viral effects, immuno-defensive mechanism and regulating properties to the several kinds of cells that includes affect on the bone formation and resorption. The effect of IFN on the osteoclast & other tissue cells has been studied in a number of researchers with the limited reports on the osteoblast. The purpose of this study was to evaluate the effects of IFN on the osteoblastic function. The MC3T3/El cell(Mouse osteoblast) was incubated in ${\alpha}-minimum$ essential medium containing 10% FBS. To detect the cytotoxic effect of $IFN-{\gamma}$ on osteoblast, the cells were cultured in 96-well plate to which $IFN-{\gamma}$ of various concentrations were added for 2 days. After staining with trypan blue, total cells and living cells were counted under microscope. To determine the activity of alkaline phosphataset(ALP), various concentrations of $IFN-{\gamma}$ were treated to culture medium, and biochemical assay was performed. $IFN-{\gamma}$ and $IFN-{\gamma}$ plus cycloheximide were added to culture medium separately and then ALP activity were determined. To detect the effect of the $IFN-{\gamma}$ on the bone formation of osteoblast, long-term culture was performed, and calcified nodule formation were observed using von Kossa's staining. After the addition of $IFN-{\gamma}$ with various concentrations to the medium, no cytotoxic effect of $IFN-{\gamma}$ was detected at any concentration. The significant increase in ALP activity of osteoblast were found the concentration of $IFN-{\gamma}$ 500-2500U/ml and the culture time of 24-48 hours respectively. The enhancement of ALP activity by $IFN-{\gamma}$ of osteoblast was decreased significantly by the treatment of cycloheximide. After long-term culture of osteoblast, the nodule formation was found to be increased in number and density by the addition of 500 U/ml $IFN-{\gamma}$. These results suggest that $IFN-{\gamma}$ was affected on the bone formation of osteoblast. Forthemore this kind of study or $IFN-{\gamma}$ to osteoblast will be held continuously.
Expression of monokine induced by IFN-$\gamma$(Mig) mRNA is well-known to strictly depend on Interferon-$\gamma$(IFN-$\gamma$). Lipopolysaccharide (LPS) alone Is weakly effective on Mig mRNA expression in mouse Peritoneal macrophages. This study was undertaken to investigate the synergistic effect of LPS and IFN-$\beta$ on chemokine Mig gene expression in mouse peritoneal macrophages. Although IFN-$\beta$ alone was minimally effective, LPS plus IFN-$\beta$ synergized to produce a high level of Mig mRNh. The synergistic effect of LPS and IFN-$\beta$ (LPS/IFN-$\beta$) on Mig mRNA expression was strain-specific. The most effective synergistic effect of LPS/IFN-$\beta$ on the mRNh expression was found in simultaneous stimulation of LPS/IFN-$\beta$. This synergy was modulated at the level of the gene transcription and was not dependent on a new protein synthesis. Synergistic effect of LPS/IFN-$\beta$ also required the activation of $NF-_KB$. Accordingly, these data suggest that LPS/IFN-$\beta$ synergizes the expression of Mig mRNA through a process that depends on a pretranscriptional level and/or coincident Mig mRNA transcription.
Lipopolysaccharide (LPS) is responsible for the tissue injury that occurs following the invasion of multicelluar organisms by Gram-negative microbes. The effect of LPS on IFN-$\gamma$-induced chemokine Mig gene expression in mouse peritoneal macrophages was investigated. Very little Mig mRNA was detectable upon exposure to LPS without IFN-$\gamma$. Although LPS alone is only minimally effective, LPS plus IFN-$\gamma$ synergized to produce a high level of Mig mRNA in the peritoneal macrophages. This synergy was not dependent on a new protein synthesis, and was not controlled at the level of the gene transcription. Futhermore, LPS did not increase IFN-$\gamma$-induced Mig mRNA stability. Accordingly, it is suggested the LPS may synergize the expression of IFN-$\gamma$-induced Mig mRNA through a process that depends on a pretranscriptional level or concurrent Mig mRNA translation.
T. gonnii의 Beverley주를 감염시킨 마우스(감염군)로부터 분리한 복강대식세포에 cytokine의 종류 및 농도에 따른 대식세포의 활성화 정도를 평가하기 위하여 복강대식세포 단세포층에 medium, 조제 Iymphokine, 재조합 tumornecrosis $factor-{\alpha}{\;}(TNF-{\alpha})$. 재조합 $interferon-{\gamma}{\;}(IFN-{\gamma})$, 및 재조합 $IFN-{\gamma}와{\;}TNF-{\alpha}$를 함께($IFN-{\gamma}/TNF-{\alpha}$) 처치한 후, 각 처치군별 $H_2O_2{\;}생산량,{\;}NO2^{-}$ 생산량 및 T. gondii의 대식세포내 침투억제능을 측정하였다. 감염군의 복강대식세포에 $IFN-{\gamma}{\;}처치시{\;}NO2^{-}$ 생산량은 농도에 따라 유의하게 증가하였으나 그외의 처치군에서는 농도에 따른 유의한 차이가 없었다. 감염군 대식세포에 $IFN-{\gamma}나{\;}IFN-{\gamma}/TNF-{\alpha}$ 처치시 $H_2O_2$ 생산량이 medium처치군보다 유의하게 증가하였으며. $NO2^{-}$ 생산량은 $TNF-{\alpha},{\;}IFN-{\gamma}나{\;}IFN-{\gamma}/TNF-{\alpha}$ 처치시 유의하게 증가하였다. 감염군에 cytokine 처치시 T. gondii의 대식세포내 침투억제능은 medium 처치시보다 모두 증가되었다 또한 정상군과 감염군의 $H_2O_2$ 생산량, $NO2^{-}$ 생산량 및 T. gondii의 대식세포내 침투억제능을 상호 비교시 $IFN-{\gamma}$ 처치군은 유의한 차이를 나타냈으나 그 외의 cytokine 처치군에서는 유의한 차이를 나타내지 않았다. 이상의 성적으로 보아 $IFN-{\gamma}$가 Toxoplosma감염 마우스 복강대식세포의 활성화에도 중요한 역할을 함을 알 수 있었다.
Jin, Hee;Jin, Jung-Sook;Park, Ho-Sun;Kim, Sung-Kwang;Lee, Jai Youl;Kim, Hee-Sun
IMMUNE NETWORK
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제2권1호
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pp.12-18
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2002
Interferon-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$) is well known as a potent inducer in monokine induced by IFN-${\gamma}$ (Mig) mRNA expression. Although lipopolysaccharide (LPS) alone is weakly effective on Mig mRNA expression. the stimulation of LPS and IFN-${\gamma}$ (LPS/IFN-${\gamma}$ simultaneously has been shown to synergize to produce a high level of Mig mRNA in mouse peritoneal macrophages. In this study, interleukin-10 (IL-10) was found to suppress the LPS/IFN-${\gamma}$-induced Mig mRNA expression in cell type- and mouse strain-specific fashion, but IFN-${\gamma}$ alone-induced Mig mRNA was unaffected by IL-10 under identical experimental conditions. The IL-10-mediated suppression of LPS/IFN-${\gamma}$-stimulated Mig mRNA expression was dependent on the concentration of IL-10, and was prevented when the agent was added 2 hours after LPS/IFN-${\gamma}$ treatment. The suppressive action of IL-10 was dependent on a protein synthesis. However, IL-10 did not reduce the stability of LPS/IFN-${\gamma}$-induced Mig mRNA. These data may have important implications for a previously unrecognized role for IL-10 as a regulator of synergistic effect of LPS on the IFN-${\gamma}$-induced expression of the Mig gene in macrophages.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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