• 제목/요약/키워드: Moraxella sp. CK-1

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Moraxella sp. CK-1의 세포외 Autolysin의 분리 정제 및 활성도 측정 (Purification and Assay of Extracellular Autolysin from Moraxella sp. CK-l)

  • 오영상;이장현;한명수;윤문영
    • 미생물학회지
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    • 제39권3호
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    • pp.148-154
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    • 2003

  • Moraxella sp. CK-1는 남조류 Anabaena cylindrica의 생장을 억제한다고 알려져 있다. Moraxella sp. CK-1의 세포외 autolysin의 분리는 다음과 같은 방법으로 분리를 시도하였다. 흡광도 660 nm에서 0.7～0.8이 되도록 BGC-11세포배양액에서 키우고, 원심분리로 균주인 Moraxella sp. CK-1를 제거한 뒤 세포배양액을 Amicon ultrafiltration으로 농축을 하였다. 농축한 세포배양액을 $(NH_{4})_{2}SO_{4}$ 로 0～20%, 20～40%, 40～60%, 60～80%로 분획하여 단백질을 14,000${\times}$g로 침전 시켰다. 침전된 단백질을 20 mM Tris-HC1, pH 8.0완충용액으로 현탁시킨 뒤, 동일 완충용액을 이용하여 투석을 하였다. $(NH_{4})_{2}SO_{4}$로 분획한 뒤 활성확인을 위해 Anabaena Cylindrica가 도포된 평판배지에서 활성을 확인한 결과, 40～60%, 60～80%에서 활성이 있음을 확인하였다. 이들을 각각 Mono-$Q^{TM}$ HR 5/5 (column volume 1 ml) column을 이용하여 FPLC에서 단백질을 분리하였다. $(NH_{4})_{2}SO_{4}$ 로 분획한 40～60%에서는 major peak 3개, 60～80% 분획에서는 2개의 major peak가 분리되었다. Mono-$Q^{TM}$ HR 5/5 column에서 분리되어 나온 major peak 5개를 투석한 뒤 Anabaena cylindrica lawn에서 활성을 확인하였으나 확인이 되지 않았다. PVDF membrane을 이용하여 transfer하여 40～60% 침전에서 17 kDa의 단백질을 얻어냈다. 이를 N-terminal amino acid sequence를 하여 serine pretense의 계열임을 확인하였다.

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Moraxella sp. CK-1의 세포외 Autolysins 특성 연구 (Characterization of the Extracellular Autolysins from Moraxella sp. CK-1.)

  • 안준익;김철호;최영길
    • 미생물학회지
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    • 제33권1호
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    • pp.15-21
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    • 1997

  • 남조류 분해세균으로 알려진 Moraxella sp. CK-1의 세포외 자가용균효소의 특성을 규명하였다. Moraxella sp. CK-1은 대수증기식 초기부터 세포외부로 자가용균효소를 분비하며, 이들 효소는 60-$70^{\circ}C$, pH 9.0의 최적 활성 조건을 나타내었다. 이들 효소는 $Na^{+}$, $K^{+}$, $Li^{+}$등의 이온에 의해 활성이 촉진되고, $Ba^{2+}$, $Mg^{2+}$, $Ca^{2+}$ 및 $Mn^{2+}$ 등의 이온에 의해 활성이 억제되며, 특히, $Fe^{2+}$와 $Cu^{2+}$ 이온 존재하에서는 효소의 활성이 거의 나타나지 않았다. Micrococcusluteus 세포를 기질로 이용하여 renaturing, SDS-PAGE를 수행한 결과 Moraxella sp. CK-1은 분자량이 각각 30,32,38 그리고 41 kDa인 4가지 효소를 분비하며, 이중 32와 41 kDa의 효소는 생장 초기부터 사멸기까지 지속적으로 배지에 분포하는 반면, 38 kDa의 효소는 대수증식기 중기 이전, 30 kDa의 효소는 대수증식기 중기 이후에 배지에 분포하였다. M. luteus의 SDS-insoluble peptidoglycan에 효소추출물을 처리하였을 때 반응액의 유리 아미노기 농도가 증가하는 것은 이들 효소가 N-acetylmuramyl-L-ananine amidase 또는 endopeptidase라는 사실을 시사한다.

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Isolation of a Bacterium That Inhibits the Growth of Anabaena cylindrica

  • Kim, Chul-Ho;Leem, Mi-Hyea;Choi, Yong-Keel
    • Journal of Microbiology
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    • 제35권4호
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    • pp.284-289
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    • 1997

  • A Gram (-), rod-shaped bacterium $2.3{\sim}2.8{\times}0.45{\mu}m$ in size which exhibited growth-inhibiting effects against a cyanobacterium (Anabaena cylindrica) was isolated from Daechung Dam Reservoir. This isolate was identified as Moraxella sp. and designated Moracella sp. CK-1. Hollow zones formed around bacterial colonies on the cyanobacterial lawn. In a mixed-culture of A. cylindrica and the isolate, each microorganism grew inverse-proportionally, and the cyanobacterial vegetative cells completely disappeared within 24 hours. On treatment with Moraxella sp. CK-1, cell walls of A. cylindrica disappeared, but sheathes remained in a more electron dense form. The unit membrane such as thylakoidal membrane was stable to bacterial lysing activity. This bacterium showed a broad action spectrum against cyanobacteria. The growth-inhibiting activity of Moracella sp. CK-1 against A. cylindrica is believed to be performed through the excretion of active substances.

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