Objectives: The effects of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) and enamel matrix derivative (EMD) respectively with mineral trioxide aggregate (MTA) on hard tissue regeneration have been investigated in previous studies. This study aimed to compare the osteogenic effects of MTA/BMP-2 and MTA/EMD treatment in MC3T3-E1 cells. Materials and Methods: MC3T3-E1 cells were treated with MTA (ProRoot, Dentsply), BMP-2 (R&D Systems), EMD (Emdogain, Straumann) separately and MTA/BMP-2 or MTA/EMD combination. Mineralization was evaluated by staining the calcium deposits with alkaline phosphatase (ALP, Sigma-Aldrich) and Alizarin red (Sigma-Aldrich). The effects on the osteoblast differentiation were evaluated by the expressions of osteogenic markers, including ALP, bone sialoprotein (BSP), osteocalcin (OCN), osteopontin (OPN) and osteonectin (OSN), as determined by reverse-transcription polymerase chain reaction analysis (RT-PCR, AccuPower PCR, Bioneer). Results: Mineralization increased in the BMP-2 and MTA/BMP-2 groups and increased to a lesser extent in the MTA/EMD group but appeared to decrease in the MTA-only group based on Alizarin red staining. ALP expression largely decreased in the EMD and MTA/EMD groups based on ALP staining. In the MTA/BMP-2 group, mRNA expression of OPN on day 3 and BSP and OCN on day 7 significantly increased. In the MTA/EMD group, OSN and OCN gene expression significantly increased on day 7, whereas ALP expression decreased on days 3 and 7 (p < 0.05). Conclusions: These results suggest the MTA/BMP-2 combination promoted more rapid differentiation in MC3T3-E1 cells than did MTA/EMD during the early mineralization period.
Purpose: This study sought to compare the elemental constitution, morphological characteristics, particle size distribution, biocompatibility, and mineralization potential of Ortho MTA (OMTA) and ProRoot MTA (PMTA). Materials and Methods: OMTA and PMTA were compared using energy-dispersive spectrometry, particle size analysis, and scanning electron microscopy. The biocompatibility and mineralization-related gene expression (osteonectin and osteopontin) of both MTAs were also compared using methylthiazol tetrazolium assay and reverse transcription-polymerization chain reaction analysis, respectively. The results were analyzed by Kruskal-Wallis test with Bonferroni correction. P-value of <0.05 was considered significant. Result: The morphology of OMTA powders was similar to that of PMTA. The constituent elements of both MTAs were calcium, silicon, and aluminum. The mean particle sizes of OMTA and PMTA were 4.60 and 3.34 mm, respectively. Both MTAs had equally favorable in vitro biocompatibility and affected the messenger RNA expression of osteonectin and osteopontin. Conclusion: Within the limitations of this study, OMTA could be a promising biomaterial in clinical endodontics.
Objectives: New resin cement (NRC) has been developed as a root repairing material and the material is composed of organic resin matrix and inorganic powders. The aim of this study was to compare the rat subcutaneous tissue response to NRC and mineral trioxide aggregate (MTA) cement and to investigate the tissue toxicity of both materials. Materials and Methods: Sixty rats received two polyethylene tube-implants in dorsal subcutaneous regions, MTA and NRC specimens. Twenty rats were sacrificed respectively at 1, 4 and 8 wk after implantation and sectioned to 5 ${\mu}m$ thickness and stained with Hematoxylin-Eosin (H-E) or von-Kossa staining. The condition of tissue adjacent to the implanted materials and the extent of inflammation to each implant were evaluated by two examiners who were unaware of the type of implanted materials in the tissues. Data were statistically analyzed with paired t-test (p < 0.05). Results: In specimens implanted with both NRC and MTA, severe inflammatory reactions were present at one wk, which decreased with time. At eighth wk, MTA implanted tissue showed mild inflammatory reaction, while there were moderate inflammatory reactions in NRC implanted tissue, respectively. In NRC group, von-Kossa staining showed more calcification materials than MTA group at eighth wk. Conclusions: It was concluded that the calcium reservoir capability of NRC may contribute to mineralization of the tissues.
Objectives: In recent in vitro study, it was reported that osteostatin (OST) has an odontogenic effect and synergistic effect with mineral trioxide aggregate (MTA) in human dental pulp cells. Therefore, the aim of this study was to evaluate whether OST has a synergistic effect with MTA on hard tissue formation in vivo. Materials and Methods: Thirty-two maxillary molars of Spraque-Dawley rats were used in this study. An occlusal cavity was prepared and the exposed pulps were randomly divided into 3 groups: group 1 (control; ProRoot MTA), group 2 (OST 100 μM + ProRoot MTA), group 3 (OST 10 mM + ProRoot MTA). Exposed pulps were capped with each material and cavities were restored with resin modified glass ionomer. The animals were sacrificed after 4 weeks. All harvested teeth were scanned with micro-computed tomography (CT). The samples were prepared and hard tissue formation was evaluated histologically. For immunohistochemical analysis, the specimens were sectioned and incubated with primary antibodies against dentin sialoprotein (DSP). Results: In the micro-CT analysis, it is revealed that OST with ProRoot MTA groups showed more mineralized bridge than the control (p < 0.05). In the H&E staining, it is showed that more quantity of the mineralized dentin bridge was formed in the OST with ProRoot MTA group compared to the control (p < 0.05). In all groups, DSP was expressed in newly formed reparative dentin area. Conclusions: OST can be a supplementary pulp capping material when used with MTA to make synergistic effect in hard tissue formation.
Ranjdar Mahmood Talabani;Balkees Taha Garib;Reza Masaeli;Kavosh Zandsalimi;Farinaz Ketabat
Restorative Dentistry and Endodontics
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제46권1호
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pp.1.1-1.13
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2021
Objectives: The aim of this study was to evaluate the dystrophic mineralization deposits from 3 calcium silicate-based cements (Micro-Mega mineral trioxide aggregate [MM-MTA], Biodentine [BD], and EndoSequence Root Repair Material [ESRRM] putty) over time after subcutaneous implantation into rats. Materials and Methods: Forty-five silicon tubes containing the tested materials and 15 empty tubes (serving as a control group) were subcutaneously implanted into the backs of 15 Wistar rats. At 1, 4, and 8 weeks after implantation, the animals were euthanized (n = 5 animals/group), and the silicon tubes were removed with the surrounding tissues. Histopathological tissue sections were stained with von Kossa stain to assess mineralization. Scanning electron microscopy and energy-dispersive X-ray spectroscopy (SEM/EDX) were also used to assess the chemical components of the surface precipitates deposited on the implant and the pattern of calcium and phosphorus distribution at the material-tissue interface. The calcium-to-phosphorus ratios were compared using the non-parametric Kruskal-Wallis test at a significance level of 5%. Results: The von Kossa staining showed that both BD and ESRRM putty induced mineralization starting at week 1; this mineralization increased further until the end of the study. In contrast, MM-MTA induced dystrophic calcification later, from 4 weeks onward. SEM/EDX showed no statistically significant differences in the calcium- and phosphorus-rich areas among the 3 materials at any time point (p > 0.05). Conclusions: After subcutaneous implantation, biomineralization of the 3-calcium silicate-based cements started early and increased over time, and all 3 tested cements generated calcium- and phosphorus-containing surface precipitates.
최근 유구치의 치수절단술 약제로 MTA의 임상 적용이 문헌들에서 보고된 바 있으나 MTA 표면에서 일어나는 유치 치수 세포의 반응에 대한 시험관내 연구는 많이 보고되지 않았다. 이번 연구의 목적은 유치 및 영구치에서 유래한 치수기질세포가 경화된 MTA 표면에서 나타내는 증식 및 분화 능력을 비교 평가하는 것이었다. 사람 영구치와 유치 치수 조직에서 분리된 치수기질세포를 경화된 MTA 표면에서 배양 후 세포증식율과 세포주기를 검사하였으며, 정량적 역전사 중합효소 연쇄반응(RT-PCR)을 사용하여 분화양상을 분석하였다. Runt-related transcription factor 2(Runx2)와 alkaline phosphatase(ALP)가 정량적 RT-PCR의 표지자로 사용되었고, MTA 표면에서 증식된 치수기질세포의 형태학적 변화를 주사전자현미경 하에서 관찰하였다. 영구치와 유치의 치수기질세포군은 세포증식률, 세포주기 분포 및 mRNA 발현 양상에 있어서 차이를 보이지 않았으며, 주사전자현미경 상에서 두 군 모두 수지상 형태를 나타내었다. MTA 상에서 관찰된 유치와 영구치의 치수기질세포의 비슷한 증식력 및 광화를 유도하는 세포로의 분화능은 유치의 치수절단술 제재로 MTA가 생체친화적으로 적합함을 보여준다.
연구목적: 이 연구에서는 mineral trioxide aggregate 제재인 white ProRoot MTA (wMTA)와 수산화칼슘 제재인 Dycal을 인간치수세포에 적용한 후 치수세포의 분화와 증식, 석회화, 신생혈관형성(angiogenesis) 그리고 염증에 관여하는 유전자들의 발현 변화를 비교하였다. 연구 재료 및 방법: 실험군은 wMTA와 Dycal을 테플론 튜브(내경 10 mm, 길이 1 mm)에 담아 4시간 경화시킨 후 일차세포배양한 인간치수세포에 적용하였고, 대조군은 빈 튜브만을 적용하였다. 3시간, 6시간, 9시간, 24시간 후 total RNA를 추출하고 oligonucleotide microarray 방법을 통하여 유전자 발현 양상을 분석하였다. 위의 결과를 역전사 중합효소 연쇄반응(reverse transcriptase polymerase chain reaction)으로 재확인하였다. 결과: wMTA를 적용한 실험군에서 24,546개의 유전자 중 43개 유전자의 발현이 2배 이상 증가하였으며(예. BMP2, FOSB, THBS1, EDN1, IL11, COL10A1, TUFT1, HMOX1) 25개 유전자의 발현이 50% 이하로 감소하였다(예. SMAD6, TIMP2, DCN, SOCS2, CEBPD, KIAA1199). Dycal을 적용한 실험군에서 239개 유전자의 발현이 2배 이상 증가하였으며(예. BMP2, BMP6, SMAD6, IL11, FOS, VEGFA, PlGF, HMOX1, SOCS2, CEBPD, KIAA1199) 358개 유전자의 발현이 50% 이하로 감소하였다(예. EDN1, FGF). 결론: wMTA를 적용한 치수세포에서는 분화와 증식 그리고 석회화에 관여하는 유전자들의 변화가 관찰되었다. Dycal을 적용한 치수세포에서는 분화와 증식 그리고 신생혈관형성에 관여하는 유전자들의 변화가 관찰되었다. 또 Dycal이 염증에 관여하는 유전자들을 더 많이 발현시키는 양상을 보였다.
Background: This study was performed to provide a long-term bacterial seal through the formation of reparative dentin bridge, calcium silicate-based pulp capping materials have been used at sites of pulpal exposure. The aim of this study was to evaluate the mineralization-inducing potentials of calcium silicate-based pulp capping materials (ProRoot MTA [PR], Biodentine [BD], and TheraCal LC [TC]) in human dental pulp cells (HDPCs). Methods: Specimens of test materials were placed in deionized water for various incubation times to measure the pH variation and the concentration of calcium released. The morphology of HDPCs cultured on the specimens was examined using a confocal laser scanning microscope (CLSM). Alizarin red S staining and alkaline phosphatase assays were used to evaluate mineralization-inducing potentials of the capping materials. Results: BD showed the highest calcium release in all test periods, followed by PR and TC. (p<0.05). All experimental groups showed high alkalinity after 1 day, except at 14 days. BD showed the highest cell viability compared with PR and TC after 1 and 3 days, while TC showed the lowest value (p<0.05). The CLSM analysis showed that cells were well adhered and expressed actin filaments for all pulp capping materials. Mineralization by PR and BD groups was higher than that by TC group based on alizarin red S staining. BD showed significantly higher alkaline phosphatase activity than PR and TC, while TC showed the lowest value (p<0.05). Conclusion: Within the limitations of the in vitro study, BD had higher mineralization-inducing potential than PR and TC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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