• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
• /
• 제32권7호
• /
• pp.1052-1061
• /
• 2019

Objective: This study was conducted to identify duck liver-expressed antimicrobial peptide 2 (LEAP-2) and demonstrate its antimicrobial activity against various pathogens. Methods: Tissue samples were collected from 6 to 8-week-old Pekin ducks (Anas platyrhynchos domesticus), total RNA was extracted, and cDNA was synthesized. To confirm the duck LEAP-2 transcript expression levels, quantitative real-time polymerase chain reaction was conducted. Two kinds of peptides (a linear peptide and a disulfide-type peptide) were synthesized to compare the antimicrobial activity. Then, antimicrobial activity assay and fluorescence microscopic analysis were conducted to demonstrate duck LEAP-2 bactericidal activity. Results: The duck LEAP-2 peptide sequence showed high identity with those of other avian species (>85%), as well as more than 55% of identity with mammalian sequences. LEAP-2 mRNA was highly expressed in the liver with duodenum next, and then followed by lung, spleen, bursa and jejunum and was the lowest in the muscle. Both of LEAP-2 peptides efficiently killed bacteria, although the disulfide-type LEAP-2 showed more powerful bactericidal activity. Also, gram-positive bacteria was more susceptible to duck LEAP-2 than gram-negative bacteria. Using microscopy, we confirmed that LEAP-2 peptides could kill bacteria by disrupting the bacterial cell envelope. Conclusion: Duck LEAP-2 showed its antimicrobial activity against both gram-positive and gram-negative bacteria. Disulfide bonds were important for the powerful killing effect by disrupting the bacterial cell envelope. Therefore, duck LEAP-2 can be used for effective antibiotics alternatives.

• 대한본초학회지
• /
• 제36권1호
• /
• pp.87-95
• /
• 2021

Objective : Liquidambaris Storax, the processed resin of Liquidambar orientalis Mill., has been therapeutically used as orifice-opening medicinals in Korean Medicine. However, unauthenticated resinous drugs from various origins were sold as Liquidambaris Storax. This study aimed to establish the quality assessment of genuine Liquidambaris Storax and to provide quantitative differences of Liquidambaris Storax in herbal markets. Methods : Bibliographic research on ancient Liquidambaris Storax was performed using classic books of herbology. The quality assessment was approached by searching modern books of herbal medicines. The marker compounds in Liquidambaris Storax from various origins were quantitatively analyzed using high-performance liquid chromatography. Results : L. orientalis was botanically characterized by palmately 5-lobed shape of leaves. Genuine Liquidambaris Storax was recognized as resinous or semi-solid form (ancient―Song dynasty) to liquid form (Myeong/Cheong dynasty) and two processed forms were available in current markets. Genuine liquid Liquidambaris Storax should be lengthened as a thread when it was lifted by a stick and be sunken under the water. The crystals of cinnamic acid was seen under microscopic observation and the scent of benzaldehyde occurred after the treatment with potassium permanganate. Cinnamyl alcohol, cinnamic acid, and cinnamaldehyde were quantified in two liquid samples of Liquidambaris Storax, while cinnamaldehyde was not quantified in resinous (semi-solid) sample. Conclusion : This study presents the detailed methods of quality assessment for genuine Liquidambaris Storax as well as the status in the herbal markets. Further quantitative study with diverse samples is required to establish the quality standard of Liquidambaris Storax.

• Animal Bioscience
• /
• 제34권8호
• /
• pp.1253-1270
• /
• 2021

Assessment of male fertility is based on the evaluation of sperm. Semen evaluation measures various sperm quality parameters as fertility indicators. However, semen evaluation has limitations, and it requires the advancement and application of strict quality control methods to interpret the results. This article reviews the recent advances in evaluating various sperm-specific quality characteristics and methodologies, with the help of different assays to assess sperm-fertility status. Sperm evaluation methods that include conventional microscopic methods, computer-assisted sperm analyzers (CASA), and flow cytometric analysis, provide precise information related to sperm morphology and function. Moreover, profiling fertility-related biomarkers in sperm or seminal plasma can be helpful in predicting fertility. Identification of different sperm proteins and diagnosis of DNA damage has positively contributed to the existing pool of knowledge about sperm physiology and molecular anomalies associated with different infertility issues in males. Advances in methods and sperm-specific evaluation has subsequently resulted in a better understanding of sperm biology that has improved the diagnosis and clinical management of male factor infertility. Accurate sperm evaluation is of paramount importance in the application of artificial insemination and assisted reproductive technology. However, no single test can precisely determine fertility; the selection of an appropriate test or a set of tests and parameters is required to accurately determine the fertility of specific animal species. Therefore, a need to further calibrate the CASA and advance the gene expression tests is recommended for faster and field-level applications.

• Journal of Yeungnam Medical Science
• /
• 제5권2호
• /
• pp.129-139
• /
• 1988

1987년 5월 1일부터 9월 31일까지 5개월간 영남대학교 의과대학 부속병원 산부인과외래에 내원한 환자 549예를 대상으로 질내 pH 검사, 아민검사, 생리식염수 및 10% KOH습식도말현미경검사를 시행하였다. 질염과 관련된 임상증상 및 소견과 이를 기초로 한 이학적 진단과 비교분석한 결과 다음과 같은 성적을 얻었다. 1. 각 감염성 질염에서의 질산도 측정 및 아민검사와 생리식염수 습식도말검사성적은 세균성 질염 환자군에선 질 pH 5.0 이상이 81.0%, 아만검사 양성이 62.8%, 유산균 감소 소견이 77.4%, 백혈구 감소가 70.1%이었으며, 트리코모나스 질염 환자군은 질 pH 5.0 이상이 93.3%, 아민검사 음성이 90.0%, 유산균 감소가 90.0%, 백혈구 증가가 93.3%이었다. 진균성 질염 환자군은 질 pH 3.0 또는 4.0이 83.2%, 아민검사 음성이 100%, 정상유산균 소견이 89.7% 및 정상백혈구 소견이 72.4%이었다. 2. 생리식염수 및 10% KOH 습식도말검사에 대한 이학적 진단의 정확도는 정상군이 77.6%. 세균성 질염군 26.3%, 진균성 질염군 47.5% 및 트리코모나스 질염군이 70.0%이었다. 질 pH 측정 및 아민검사에 의한 진단의 정확도는 정상 및 진균성 질염군이 83.2%, 세균성 질염군이 60.6%, 트리코모나스 질염군이 83.3%이었다. 3. 세균성 질염군에서 질 pH 3.0 또는 4.0 및 아민검사 음성을 나타낸 23예의 질상피 세포에 대한 clue cell의 비율은 10.0%이하가 12예, 20.0% 및 30.0%가 5예, 50.0%가 4예, 그리고 50.0% 이상이 2예이었다. 이상의 성적으로 외래에서 손쉽게 시행할 수 있는 질내 산도측정과 아민검사는 각 감염성 질염의 감염여부에 대한 screening과 감별진단에 유용한 것으로 사료되며, 생리식염수 및 10% KOH 습식도말검사에 이들 검사를 추가할 경우 진단의 신빙도를 높일 수 있을 뿐만 아니라 배양검사가 요구되는 환자의 선택에 있어서도 가치가 있을 것으로 추정되었다.

• 대한본초학회지
• /
• 제23권2호
• /
• pp.41-49
• /
• 2008

Objectives : In order to distinguish morphological characteristics of trunk bark and root bark of Ulmus davidiana var. japonica (Rehder) Nakai and the trunk bark and root bark of Hemiptelea davidii Planchon were sampled and compared in terms of their external and internal features with flour states according to their medical use, through microscopic examination. Methods : The slice of the tested material made by paraffin section technique was colored with Safranine Malachite Green contrast methods, and the flour of it was mounted by the liquid made by the same ratio of each of glycerin, acetic acid, and water, and then observed and photographed by olympus-BHT. Results : 1. Internal Features 1) A large parenchymatous cell was observed in the phloem of the slice of both trunk bark and root bark of Ulmi Cortex. However, both of the trunk bark and root bark of Hemipteleae Cortex did not have parenchymatous cell in the phloem; instead, stone cells including much square crystal of calcium oxalate were distributed around fiber bundle, and the parenchymatous cell included much druse crystal of calcium oxalate. 2) In both the Ulmi Cortex and Hemipteleae Cortex, rhytidome was observed in trunk bark, but not in root bark, but in the parenchymatous cell of the root bark of the Ulmi Cortex contained starch grain. 2. Flour States 1) In the flour of root bark of the Ulmi Cortex, a large parenchymatous cell was observed. However, in the flour of trunk bark and root bark of Hemipteleae Cortex, no parenchymatous eel was found; instead, stone cell including square crystal of calcium oxalate and druse crystal of calcium oxalate were observed. 2) There was no remarkable difference between the trunk bark and root bark of Hemipteleae Cortex. However, starch grain was contained in the parenchymatous cell of the root bark of Ulmi Cortex but not in the trunk bark of it. Conclusions : There were some morphological differences in external, internal, and flour parts of Ulmi Cortex and Hemipteleae Cortex. In particular, there was a morphological difference in flour states between the trunk bark and root bark of Ulmi Cortex, it is possible to use microscope to distinguish their flour states.

• 생명과학회지
• /
• 제22권2호
• /
• pp.259-265
• /
• 2012

환경에서 분리된 CK214 균주는 1.5% (w/v) agar가 포함되어 있는 LB 평판배지에서 빠르게 이동하는 특징을 가지며, agar 고체평판배지 위의 CK214 균주의 집락 주위로 움푹한 투명환이 관찰되었다. 이 균주는 단일 탄소원으로 agar만이 첨가된 최소 배지에서 잘 자랐으며, DNS 법을 이용하여 CK214 균주의 외부추출성분이 agar 분해활성을 가진다는 것을 확인하였다. CK214 균주는 다양한 농도의 agar (0.5, 1.0, 1.5 2.0% w/v)가 포함된 고체평판 배지에서 swarming 운동을 하였다. CK214 균주를 동정하기 위해 그람염색과 현미경 관찰, 생화학적 분석(API), 16S rRNA 염기서열분석에 기초한 계통발생학적 분석을 수행하였다. 이를 통해 CK214 균주는 그람 양성의 간균으로, Paenibacillus 속에 포함되었으며 Paenibacillus lactis MB 2035와 가장 가까운 연관성을 보이는 것을 확인할 수 있었다. 또한 CK214 균주는 agar 고체표면에서 주모성의 편모를 형성하는 것을 투과 전자 현미경(TEM)을 통해 관찰하였다. CK214 균주의 agarase 활성과 운동성의 연관성에 관한 앞으로의 연구를 위해 transposon random mutagenesis에 의한 agar 분해활성 결손 돌연변이주를 구축하였다.

• 한국임상수의학회지
• /
• 제25권3호
• /
• pp.207-210
• /
• 2008

Trichophyton erinacei is a dermatophyte pathogen that infects both humans and hedgehogs. A two-month old female four-toed hedgehog presented to the Chonbuk Animal Medical Center with pruritus, excoriation and crust on her face for ten days. The owner of the hedgehog also exhibited the clinical signs of scaly erythema with fine vesicles on her neck. A presumptive diagnosis of dermatophytosis was made based on the results of an acetate tape preparation in which hyphae and chains of arthroconidia were observed. The crusts from the lesions were then cultured on Sabouraud Dextrose Agar for identification. After 10 days of incubation, downy colored colonies that had a central umbo with a white granular surface and a yellow pigment ring in the reverse were observed. Microscopic analysis revealed the presence of numerous teardrop shaped microconidia singly attached to the sides of the hyphae. In addition, 2-6 roomed macroconidia that were somewhat irregular in shape and size were present, and abundant intermediate sized spores were observed between the micro and macro conidia. To confirm that the culture was T. erinacei, the internal transcribed spacer region of the 5.8S phase of the ribosomal RNA gene (ITS1-5.8S-ITS2 rDNA) was amplified by PCR and then sequenced. A 679-base pair fragment of DNA was then compared with sequences in GenBank and found to be 99% homologous with sequences of T. erinacei (Z97997 and Z97996. The clinical signs were resolved after four weeks of treatment with oral and topical ketoconazole and chlorhexidine. To the best of our knowledge, this represents the first case of T. erinacei isolated from a four-toed hedgehog in Korea.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제48권5호
• /
• pp.699-708
• /
• 2000

배경 : 올리고누클레오티드 탐식자를 이용한 조직내교잡법은 감염성 질환의 진단에 이용되고 있는 분자병리학적 검사방법이다. 그러나 결핵균의 세포벽에는 다량의 지방 성분이 포함되어 있어 탐식자의 침투에 어려움이 있다. 따라서 본 연구에서는 탐식자의 침투력을 높일 수 있는 조건을 알아보고, 결핵의 조직학적 진단법으로써 조직내교잡법의 이용 가능성을 확인해 보고자 한다. 방법 : 결핵으로 진단된 환자의 인체조직 절편과 배양된 결핵균을 흰쥐의 간 조직 내에 인위적으로 주입하여 제작한 실험조직 절편을 실험대상으로 하고, 바이오틴을 부착시킨 올리고누클레오티드 탐식자를 이용하여 조직내교잡법을 시행하였으며, 탐식자의 효과적인 침투를 위해 전처리를 시도하였다. 결과 : 펩신-염산 (2 mg/ml, 0.1M) 혼합액을 이용한 전처리 과정 (5-6분) 후 조직내교잡법을 수행한 결과 배양된 결핵균을 주입한 실험조직에서 결핵균의 검출에 성공할 수 있었다. 간 조직이 주사바늘에 의해 기계적으로 손상된 자리를 따라 군데군데 위치하고 있는 배양액 내에서 불규칙하게 모여있는 점상 혹은 간상의 양성반응을 관찰할 수 있었으며, 민감도는 80-90% 수준이었다. 그러나 결핵환자의 조직절편에서는 조직내교잡법을 이용하여 결핵균을 검출할 수 없었다. 결론 : 이는 배양액 내에서 빠르게 증식하는 결핵균과는 달리 인체에 감염된 결핵균에서는 rRNA의 양이 적어, 바이오틴이 부착된 탐식자를 이용한 조직내교잡법의 민감도를 벗어났을 것으로 추정된다. 따라서 향후 조직내교잡법으로 인체조직 내의 결핵균을 진단하기 위해서는 제자리 중합효소연쇄반응 (in situ PCR) 법의도입이나, 보다 높은 민감도를 갖는 동위원소를 부착 시킨 탐식자의 사용이 필요하다고 생각된다.

• 아시안잔디학회지
• /
• 제19권2호
• /
• pp.85-94
• /
• 2005

위에서 골프장의 안양 중지 이병 잎에서 분리한 병원균인 달라스팟 유사 병원균을 분리 동정하였다. 2000년도 국내에 처음 보고된 이후 현재까지 뚜렷하게 진전된 연구가 보고 되지 않아 향후 사전 예방과 발생시 방제 법을 강구하기 위함과 아울러 코스관리자의 면밀한 관심을 유도하기 위하여 병원균 분리, 동정 및 특성을 한지형 잔디(Agyostis palustris Huds. cv Penncross)에서 발생하는 달라스팟 병원균과 비교 실험을 실시하였다. 1. 기존에 알려진 것처럼 Sclerotinia homoeocarpa 에서 보이는 온도에 대한 민감도를 새로운 병원성 Scz1 균주에서도 볼 수있어 특정온도에서의 생장억제는 안양 중지 달라스팟 병의 발병하는 시기뿐만 아니라 병방제관리에 도움이 될 것으로 생각된다. 2. 병원균 균사 특성에서 전자현미경사진으로는 구별하기 어려웠으나, PDA배지상에서의 Scz1와 Scz2 색상은 동일한 반면 Scb1균사색상과는 차이가 남으로 향후 간단하게 균사색상으로 식별이 용이 할 것이다. 3. 실험실상에서 병원균의 약제 민감도 측정결과는 이프로디온과 프로피코나졸 약제가 우수하였다. 4. 병 접종 실험을 통하여 분리된Sczl 균주가 안양 중지에 대한 기주 특이성을 보임으로 조이시아 달라스팟의 주요 병원균으로 밝혀졌다. 5. Scz1의 병원성은 안양 중지에 대한 기주 특이성이 높은 것으로 밝혀졌다.

• 대한두경부종양학회지
• /
• 제12권2호
• /
• pp.169-176
• /
• 1996

결핵의 진단은 특징적 병리조직양상, 항산균 염색에 의한 균 증명과 M. tuberculosis균 배양으로 이루어지나 형태적으로는 결핵이 의심되더라도 항산균이 조직표본이나 도말에서 검출되지 않거나 M. tuberculosis가 배양되지 않아 정확한 원인적 진단이 불가능할 경우가 많다. 이에 저자들은 경부 결핵성 임파선염으로 적출되어 보내어진 경부 임파선 조직의 신선한 조직이나 통상적으로 처리되어 제작된 파라핀 블록을 이용하여 M. tuberculosis에 특수한 반복성 DNA sequence인 IS986를 표적으로 한 primers을 사용하여 nested PCR방법을 이용하여 예민도가 높은 M. tuberculosis 검출로 빠른 시간 내에 결핵을 진단하고자 본 연구를 실시하였다. 최근 유전자 기술의 진보로 M. tuberculosis의 여러 항원들의 유전자가 클론화되고 그 염기 배열이 밝혀졌으며 이에 저자들은 결핵의 확진을 위하여 파라핀 포매조직을 대상으로 nested PCR에 의한 188bp의 DNA를 증폭한후 증폭한 DNA분절의 염기 배열을 결정한 후 Bst UI와 Hha I 효소를 이용한 소화과정을 거친 후 restriction fragment length polymorphism(RFLP)을 은염색에 의해 그 패턴에 의해 M. tuberculosis를 확인하고 또한 다른 종의 Mycobacteria를 배제시킬 수 있었다. 본 방법은 1$\sim$2일에 끝나며, 방사선물질을 사용하지 않으면서도 감도 및 특이성이 우수하여 일반 병리실힘실에서도 M. tuberculosis를 포함한 각종 항산균의 신속한 검출법으로 손쉽게 사용할 수 있다고 생각되어 이에 보고하였다.