• 미생물학회지
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• 제15권4호
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• pp.145-153
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• 1977

Penicillin amidase (EC 3.5.1.11) was produced by a mutant strain of Bacillius megaterium ATCC 14945. Hydroxylamine assay method for the determination of 6-APT was modified by using "HCl addition techniques" in order to simplify the time consuming orginal assay method without sacrifice of accuracy. Using the new mutant strain, the effects of fermentation conditions on enzyme production were studied.e studied.

• 한국식품과학회지
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• 제32권5호
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• pp.1009-1014
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• 2000

PA를 분석하기 위하여 효소면역측정법을 개발하고자 하였다. Bc방법과 Po방법으로 BSA에 PA를 conjugation하여 각각의 PA-BSA conjugate(PA-BSA[Bc]와 PA-BSA[Po])를 제조하였으며, 이를 토끼에 면역하여 항PA-BSA 항체를 얻었다. 항PA-BSA[Po] 항체를 사용한 ciELISA의 결과에서 경합반응이 제대로 일어나지 않았기 때문에, 식품 속에 있는 PA를 검출하기 위해서 PA-BSA[Po]을 코팅한 후 항PA-BSA[Bc] 항체를 사용하였다. 이 결과에서 PA의 검출한계가 1 ppm인 것을 확인할 수 있었으며, 교차반응을 통해 PA 유도체들에 대해서도 항PA-BSA[Bc] 항체가 PA에 대해 특이성이 매우 강하였다. 또한, MBA의 결과에서는 그 검출한계가 10ppb인 것을 확인할 수 있었다. 분석시료인 계란(109%), 상추(64%), 소간(344%)의 식품시료에 대한 실험에서 상추를 제외하고는 ciELISA는 MBA의 결과와 비교해 볼 때 양호한 결과를 얻을 수 있었다. 그러므로, ciELISA는 MBA보다 분석시간, 교차반응 등의 면에서 장점이 있어 식품 중 PA의 검출에 효과적으로 활용할 수 있을 것이다.

• 한국식품과학회지
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• 제30권6호
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• pp.1273-1278
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• 1998

Biotin의 분석에 사용되는 기존의 미생물 분석법보다 신속하고 간편한 효소-단백질결합 분석법(enzyme protein binding assay; EPBA)을 개발하였다. Biotin-KLH conjugate와 streptavidin을 이용한 EPBA에서, biotin의 활성을 갖는 biocytin에 대하여 각각 109% $(IC_{50}=0.3\;ppb)$와 197% $(IC_{50}=0.8\;ppb)$의 교차반응을 보였으나 desthiobiotin과 diaminobiotin 그리고 2-iminobiotin에서는 교차반응을 보이지 않았다. Streptavidin과 biotin-KLH conjugate를 이용한 EPBA에서 검출범위는 각각 $0.01{\sim}30\;ng/mL$과 $0.01{\sim}1.0\;ng/mL(ppb)$로 나타났다. 우유시료와 과일 플레이크 그리고 당근-파인애플 쥬스에 대한 spike test에서 EPBA(biotin-KLH conjugate)와 미생물 분석법(microbiological assay; MBA)간의 상관관계는 r=0.994로 매우 높은 것으로 나타났다. 그러나 MBA는 biocytin과 desthiobiotin에 대하여 각각 80.1%, 66.7%의 교차반응을 나타냈다. 검출범위도 $0.1{\sim}0.5\;ng/mL(ppb)$로 분석 범위가 매우 제한되어 있었다. 그러므로 EPBA에 의하여 biotin을 분석하는 것이 기존의 미생물 분석법에 비하여 검출 감도나 검출 범위, 교차반응 그리고 분석시간 등의 여러 가지 면에서 우수한 것으로 확인되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제31권3호
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• pp.358-367
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• 2021

The World Health Organization (WHO) has declared the coronavirus disease 2019 (COVID-19) as an international health emergency. Current diagnostic tests are based on the reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) method, which is the gold standard test that involves the amplification of viral RNA. However, the RT-qPCR assay has limitations in terms of sensitivity and quantification. In this study, we tested both qPCR and droplet digital PCR (ddPCR) to detect low amounts of viral RNA. The cycle threshold (CT) of the viral RNA by RT-PCR significantly varied according to the sequences of the primer and probe sets with in vitro transcript (IVT) RNA or viral RNA as templates, whereas the copy number of the viral RNA by ddPCR was effectively quantified with IVT RNA, cultured viral RNA, and RNA from clinical samples. Furthermore, the clinical samples were assayed via both methods, and the sensitivity of the ddPCR was determined to be equal to or more than that of the RT-qPCR. However, the ddPCR assay is more suitable for determining the copy number of reference materials. These findings suggest that the qPCR assay with the ddPCR defined reference materials could be used as a highly sensitive and compatible diagnostic method for viral RNA detection.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제1권2호
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• pp.204-210
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• 1993

The distribution and excretion of DWC-751, a new cephalosporin, were examined in rats and mice following a single intravenous administration. DWC-751 in plasma and urine was determined by both HPLC and microbiological assay. The plasma concentration of the drug declined biexponentially. The initial and terminal half lives of the drug were 3.0 and 28.3 min, respectively. Binding of the drug to plasma proteins was 42.3%. The distribution volume at steacly-state ($Vd_{ss}$) was only 0.341 ι/kg, which is well correlated with the low n-octanol/water partition coefficient of the drug ($K_{o/w{\cong}0$) Actually, the drug was distributed to liver, kidney and lung with very low organ/plasma concentration ratio. The drug, was excreted mainly via renal excretion, i.e., the total($CL_T$) and apparent renal($CL_{R}$) clearances of the drug were 10.8 and 7.5 ml/min/kg, respectively.

• 한국균학회지
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• 제8권1호
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• pp.69-71
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• 1980

To establish a competent method of microbiological assay for bacampicillin, one of new semi-synthetic derivatives of ${\beta}-lactam$ antibiotics, a comparison was carried out between different conditions for hydrolysis of bacampicillin into ampicillin which was then subjected to cylinder plate method. The results showed that the use of carboxylic ester hydrolase in vitro as a pretreatment of it in either pH value 6 or 8 was feasible and that the cylinder plate method with Sarcina lutea was adequate for potency estimation.

• 한국식품영양과학회지
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• 제33권2호
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• pp.381-385
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• 2004

기존의 미생물학적 분석법의 많은 단점을 보완하고자 식품중 판토텐산의 HPLC 분석법을 시도하였다. 추출용매는 20 mM potassium phosphate를 사용하였고, PDA spectrum 결과 최대 흡광도를 200 nm에서 분석하였다. HPLC 방법에 의한 판토텐산의 평균 회수율은 83.5∼109.5%이었으며 검출한계는 0.5 ppm이었다. 또한 HPLC 분석법의 신뢰성을 검증하고자 미생물학적 분석법도 병행했는데 그 결과 회수율은 87.0∼118.3%이었고 검출한계는 0.000375 ppm으로서 미생물학적 분석법이 검출한계는 훨씬 낮았다 HPLC법이나 미생물학적 분석법(MBA)에서 대상식품중 판토텐산의 측정값은 13건의 시료에서 모두 표시값보다 높았다. 미생물학적 분석법 (MBA)에 대한 HPLC 분석 회수율은 91.9∼117.6%이었고, paired t-test 및 회귀분석결과, 두 상법 사이에는 유의적인 차이(p<0.01)가 없었으며, 상관관계(r=0.9842, y=1.1428x-0.2269)가 양호하였다. 본 연구에 의해 개발된 HPLC 분석법은 기존의 미생물학적 분석법에 비하여 간단하면서 정화하여 분석의 효율성을 증대시킬 수 있으리라 기대된다.

• Journal of Microbiology
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• 제38권2호
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• pp.74-79
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• 2000

For the demonstration of a novel riboflavin kinase assay method based on the bacterial bioluminescence, partially purified riboflavin kinase was prepared from bovine liver through ammonium sulfate precipitation and DEAE-cellulose ion exchange chromatography. Using bacterial luciferase from Photobacterium phosphoreum and the dithionite reduction method, and easy, safe, and fast assay method was established. The optimal temperature, pH, Km values form riboflavin and ATP of boving liver riboflavin kinase determined with this luminescence method were 35$^{\circ}C$, pH 7, 15.3${\mu}$M and 8.3.${\mu}$M, respectively. The detection limit of FMN produced by riboflavin kinase was in the range of 200 pM to 4${\mu}$M which is comparable to the HPLC-fluorescence detection method, while the detection time for each assay was less than 15 sec compared to the HPLC method which requeires at least 10 min for completion.

• Journal of Microbiology
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• 제40권2호
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• pp.146-150
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• 2002

A multiplex polymerase chain reaction (PCR) assay was developed for the identification of two Candida species-albicans and dubliniensis. Three sets of primers were selected from different genomic sequences to specifically amplify a 516 bp fragment within the tops gene, specific for several species of the genus Candida (CCL primers); a 239 bp fragment within the $\alpha$INT1 gene, specific for Candida albicans (CAL primers); and a 175 bp fragment within the ALSD1 gene, specific for Candida dubliniensis (CDL primers). Using the primers in conjunction (multiplex PCR), we were able to detect both C. albicans and C. dubliniensis and to differentiate between them. The detection limit of the PCR assay was approximately 10 cells per milliliter of saline. Thus, this multiplex PCR assay can be applied for differentiation of C. albicans and C. dubliniensis from clinical specimens.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제4권4호
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• pp.387-390
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• 2003

동ㆍ식물성 기름으로부터 산이나 알카리 촉매를 사용하여 제조한 친환경 에너지인 바이오디젤의 미생물학적 안정성을 테스트하기 위하여 온도와 저장기간에 따른 미생물에 의한 변질정도를 측정하였다. 측정방법으로 역상 현미경 관찰과, 3M petrifilm분석법으로 생균수를 측정하였고, 균체 단백질의 양을 측정하기 위하여 Bradford protein assay법을 사용하였다. 바이오디젤과 석유디젤, 그리고 각각의 시료를 혼합한 시료를 서로 다른 온도조건(25℃와 35℃)에서 혐기적인 조건으로 90일동안 장기간 저장했을 때 바이오디젤, 석유디젤 그리고 혼합한 시료에서 미생물의 생육은 관찰되지 않았다.