International Journal of Advanced Culture Technology
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제8권1호
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pp.182-187
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2020
Silver nanoparticles (AgNPs) have been manufactured in recent years and widely used in various fields. Reactive oxygen species (ROS), which occur in AgNPs, destroy cell membranes. It is widely accepted that ROS generated in this manner inhibit microorganisms growth and causes toxic effects, However, it does not affect cell membranes directly but positively affects growth in plants with cell walls. The nanoball used in this experiment is a new material that generates ROS stably and is used in aqueous solution. Results of this study indicate a 30% increase in yield of Ginseng mixed with culture soil. The analysis of soil condition after cultivation showed that the possibility of repetitive cultivation in soil mixed with Nanoball was high. This suggests that Nanoball is an antimicrobial active material due to the microbial / extermination effect of pathogenic microorganisms. Therefore, there may be potential applications in agricultural cultivation sites as a repetitive cultivation technology that reuses soil.
Shikonin production was examined in a bubble column bioreactor system with the hairy roots of Lithosphermum erythrorhizon. The volumetric productivity was higher than those obtained from other reactor configurations with free or immobilized cells of the same cell line. The productivities of the bubble column reactor, with and without a product absorption trap, were 7.4 and 4.5 mg of shikonin/l/d, respectively. This indicated the importance of the product removal in the design and operation of the shikonin production system with hairy root culture.
Phaffia rhodozyma is the most promising microbial source of astaxanthin production, though wild-type strains are needed to increase the astaxanthin content for commercial production. To increase astaxanthin content for commercial production, a mutant strain of P. rhodozyma was selected and culture conditions of the mutant selected were optimized. P. rhodozyma was treated with mutagenic agent such as NTG, acriflavine, and UV in serial order and carotenoids hyper-producing mutant strain was selected based on the capabilities of cell growth on the agar plate containing chemical inhibitors and carotenoids production. Among the mutants tested, a mutant WS-2 was finally selected. Mutant WS-2 produced 1.26mg carotenoids/g-dry cell weight and this value was about- 4-folds higher than that of wild-type. The optimum culture conditions were $24^{\circ}C$ of temperature, 1.5vvm of aeration and 300rpm of agitation. In the optimized condition, cell and carotenoids concentrations were 7.62g/l and 14.9mg/l, respectively.
진탕플라스크 배양액의 균 증식도를 자동측정하기 위하여 자동화 FIA장치를 경제적으로 제작하였으며, 이를 이용하여 대장균을 Nutrient broth 배지에 접종하여 배양하면서 그 증식도를 자동측정하였다. 멸균 NB를 이송용액으로 하고 10분 간격으로 자동측정하였을 때 큰 오차 없이 증식양상을 세밀하게 측정할 수 있었다. 증류수를 이송용액으로 사용한 경우에는 NB를 이송용액으로 사용한 경우에 비하여 측정오차가 더 컸으며, 특히 배양후반부에서의 오차가 크게 나타났다.
Aminoacyl tRNA synthetases of bacteria are known as potential targets for new anti-microbial agents. To isolate new inhibitors of bacterial methionyl-tRNA synthetases from natural sources, a new target-oriented screening system using whole cells which are over-expressing a target enzyme was developed. Approximately 8,000 culture broths of microorganisms from soils were tested by this screening system. Among them, ten culture broths was found to contain inhibitory activity against methionyl -tRNA synthetases of Escherichia coli. For the validation of the screening system, this new method was compared with in vitro enzymatic method. Seven out of 10 culture broths showed inhibitory activity against methionyl-tRNA synthetases of E. coli. This result showed that the new screening system was comparable to the enzyme assay. Thus we believe that our screening system as a new method can be applied for the screening of new antibiotics inhibiting bacterial methionyl-tRNA synthetases from natural products.
Seo, Weon-Taek;Lee, In-Kyoung;Yoo, Ick-Dong;Park , Young-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제5권4호
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pp.234-237
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1995
Production of new flavanol derivatives with cytotoxic activity, gericudranin A and B, was studied by using hairy root cultures of Cudrania tricuspidata. Schenk and Hildebrandt (SH) medium was chosen for root growth and gericudranin production. After 35 days culture in a half-strength liquid SH medium containing $30g^{glucose}$/l, hairy root growth reached $138g^{FW}$/I and gericudranin A and B were produced at concentrations of 27mg/l and 21 mg/l, respectively. It was also observed that the contents of gericudranin A and B in hairy root were eight and six times higher than those of cudraniae radix, respectively.
Xylanase is an industrially relevant enzyme used for the production of xylobiose and xylose. Various methods are used to enhance the microbial yield of xylanase. In the present study, co-culturing of Bacillus subtilis and Bacillus pumilus were investigated using submerged fermentation for xylanase production, which was markedly increased when sal, sagwan, newspaper, wheat bran, and xylan were used as single carbon sources. Maximum xylanase production was reported after 5 days of incubation in optimized media at pH 7.0 and 37℃, resulting in 2.69 ± 0.25 µmol/min by coculture. The 1:1 ratio of sal and sagwan in optimized production media was shown to be suitable for xylanase synthesis in submerged fermentation (SMF). In comparison to mono-culture using B. pumilus and B. subtilis, co-culturing resulted in an overall 3.8-fold and 2.15-fold increase in xylanase production, respectively.
A commensal thermophile, Symbiobacterium toebii, isolated from hay compost (toebii) in Korea commensally interacted with a thermophilic Geobacillus toebii sp. nov., which was a new species within the genus Geobacillus on the basis of the phenotypic traits and molecular systematic data. S. toebii required the crude extracts and/or culture supernatant of the Geobacillus toebii for axenic growth and could grow on the temperature between 45 and $70^{\circ}C$ (optimum: $60^{\circ}C$; 2.4 h doubling time) and pH 6.0 and 9.0 (optimum: pH 7.5). The G+C content of the genomic DNA was $65 mol\%$, and the major quinones were MK-6 and MK-7. A phylogenetic analysis of its 16S rDNA sequence indicated that Symbiobacterium toebii was closely related with solely reported Symbiobacterium thermophilum. The presence of the commensal thermophile 16S rDNA and accumulation of indole in all the enriched cultures indicate that Symbiobacterium toebii is widely distributed in the various soils. The genome of S. toebii constituted a circular chromosome of 3,280,275 base pairs and there was not an extra-chromosomal element (ECE). It contained about 4,107 predicted coding sequences. Of these protein coding genes, about $45.6\%$ was encoded well-known proteins and annotated the functional assignment of 1,874 open reading frames (ORFs), and the rest predicted to have unknown functions. The genes encoding thermostable tyrosine phenol-lyase and tryptophan indole-lyase were cloned from the genomic DNA of S. toebii and the enzymatic production of L-tyrosine and L-tryptophan was carried out with two thermostable enzymes overexpressed in recombinant E. coli.
Rumen microbiology research has undergone several evolutionary steps: the isolation and nutritional characterization of readily cultivated microbes; followed by the cloning and sequence analysis of individual genes relevant to key digestive processes; through to the use of small subunit ribosomal RNA (SSU rRNA) sequences for a cultivation-independent examination of microbial diversity. Our knowledge of rumen microbiology has expanded as a result, but the translation of this information into productive alterations of ruminal function has been rather limited. For instance, the cloning and characterization of cellulase genes in Escherichia coli has yielded some valuable information about this complex enzyme system in ruminal bacteria. SSU rRNA analyses have also confirmed that a considerable amount of the microbial diversity in the rumen is not represented in existing culture collections. However, we still have little idea of whether the key, and potentially rate-limiting, gene products and (or) microbial interactions have been identified. Technologies allowing high throughput nucleotide and protein sequence analysis have led to the emergence of two new fields of investigation, genomics and proteomics. Both disciplines can be further subdivided into functional and comparative lines of investigation. The massive accumulation of microbial DNA and protein sequence data, including complete genome sequences, is revolutionizing the way we examine microbial physiology and diversity. We describe here some examples of our use of genomics- and proteomics-based methods, to analyze the cellulase system of Ruminococcus flavefaciens FD-1 and explore the genome of Ruminococcus albus 8. At Illinois, we are using bacterial artificial chromosome (BAC) vectors to create libraries containing large (>75 kbases), contiguous segments of DNA from R. flavefaciens FD-1. Considering that every bacterium is not a candidate for whole genome sequencing, BAC libraries offer an attractive, alternative method to perform physical and functional analyses of a bacterium's genome. Our first plan is to use these BAC clones to determine whether or not cellulases and accessory genes in R. flavefaciens exist in clusters of orthologous genes (COGs). Proteomics is also being used to complement the BAC library/DNA sequencing approach. Proteins differentially expressed in response to carbon source are being identified by 2-D SDS-PAGE, followed by in-gel-digests and peptide mass mapping by MALDI-TOF Mass Spectrometry, as well as peptide sequencing by Edman degradation. At Ohio State, we have used a combination of functional proteomics, mutational analysis and differential display RT-PCR to obtain evidence suggesting that in addition to a cellulosome-like mechanism, R. albus 8 possesses other mechanisms for adhesion to plant surfaces. Genome walking on either side of these differentially expressed transcripts has also resulted in two interesting observations: i) a relatively large number of genes with no matches in the current databases and; ii) the identification of genes with a high level of sequence identity to those identified, until now, in the archaebacteria. Genomics and proteomics will also accelerate our understanding of microbial interactions, and allow a greater degree of in situ analyses in the future. The challenge is to utilize genomics and proteomics to improve our fundamental understanding of microbial physiology, diversity and ecology, and overcome constraints to ruminal function.
인삼근권토양으로부터 분리된 총640 저영양세균 중 유일한 탄소원으로 colloidal chitin을 첨가한 배지에서 투명환을 나타낸 8균주를 선발하였다. 대부분의 균주가 chitin의 형광성 유사체인 4-methylumbelliferyl D-N,N'-diacetylchitobioside (MUF-diNAG)을 분해하였고, CR-42균주의 경우 4-methylumbelliferyl-D-glucosaminide (MUF-NAG)를 분해하였다. 이들 chitinase 생산균주의 16S rDNA 염기서열을 결정하여 계통학적 위치를 확인한 결과 5개의 주요한 계통군: proteobacteria $\gamma-subdivision$ (3균주), proteobacteria $\beta-subdivision$ (1 균주), Actinobacteriaceae (1 균주), Bacillaceae (1 균주) 그리고 Bacteriodetes (2 균주)로 분류되었다. 이들 분리균주 중 WR164와 CR18 균주는 16S rDNA염기서열의 유사도가 미배양 및 미동정 등록균주와 $97\%$ 미만으로 나타나 신규미생물로 제안할 수 있는 균주로 예상되었다. 한편 CR2와 CR75 chitinase 생산균주는 인삼 탄저 병원균인 Colletotrichum gloeosporioides의 생장을 저해하는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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