순천대학교 지의류 은행(Lichen Bioresources Center)에서 571종의 지의류 내생 곰팡이를 분양받아 Candida albicans에 대한 항진균 활성을 조사하여 4종을 선정하였다. 선정된 4종의 지의류 내생 곰팡이의 배양액 내에 존재하는 항진균 활성을 알아보기 위해 disc diffusion method 방법을 이용한 결과 Stereocaulon sp. (1429,1430)가 C. albicans에 대한 항진균 활성이 가장 좋았으며, 다음으로는 Graphis sp. (1245), Cryptosporiopsis diversispora (0156) 순으로 활성이 좋게 나타났으며, 이들 지의류 내생곰팡이가 고체배지와 액체배지에서도 항진균 활성 물질을 생성하였다. 고체배지에서와 액체배지에서 공통적으로 활성이 있는 지의류 내생 곰팡이 배양액의 chloroform, ethyl acetate 용매 추출물의 C. albicans의 항진균 활성도를 측정한 결과 4종 모두 chloroform 추출물에서 높은 활성도를 나타냈다. Candida albicans, Candida glabrata, Candida tropicalis, Candida lusitaniae에 대한 항진균 활성은 Stereocaulon sp. (1429, 1430)의 chloroform 추출물에서 모두 98% 이상의 높은 저해율을 보였고 Stereocaulon sp. (1429) 배양액의 chloroform 추출액과 ethyl acetate 추출액을 GC/MS를 이용해 성분을 분석한 결과 hexadecanonic acid-methyl ester, 14-octadecenoic acid-methyl ester, octadecenoic acid-methyl ester가 새로운 항진균 물질일 가능성을 보여주었다.
4-Methyl-2,6,7-trioxa-1-phospbicycle[2,2,2]octane 1-sulfide (BPS)와 4-Methyl-2,6,7-trioxa-1-phosphabicyclo[2,2,2]octance 1-oxide (BPO) 및 관련 단고리화합물을 합성하였고 반응성 중간체와 반응기작을 알아보기 위하여 BPS를 chloroform 및 methanol중에서 MCPBA로 산화시켰다. Chloroform에서는 BPO만이 생성되었고 methanol중에서는 두고리 구조가 열려서 만들어진 반응성 중간체가 methanol을 인산화하여 생성된 이성질체의 단고리화합물이 관찰 되었으며 또한 소량의 BPO도 생성되었다. 인산화 능력을 소유한 반응성 중간체를 여러 가지 기기분석을 동원하여 연구한 결과 그 구조는 단고리 methyl sulfenyl ester로 제안하였다.
비자나무 잎을 아세톤-물의 혼합용액으로 추출하고 n-hexane, chloroform, ethylacetate 및 물 분획으로 분류하여 동결건조하고 분말상 화합물로 조제하였다. 그 중에서 ethylacetate 용성 추출물을 메탄올-물 및 에탄올-헥산(n-hexane)의 혼합용액을 사용하여 Sephadex LH-20 칼럼상에서 크로마토그래피를 수행하였다. 비자나무 잎의 추출성분은 대부분 (+)-catechin, (-)-epicatechin, (+)-gallocatechin 및 (-)-epigallocatechin과 같은 flavan 화합물과 3'-O-methyl-(+)-catechin 및 3'-O-methyl-(-)-epicatechin과 같은 flavan의 methyl ether 화합물로 구성되어 있었으며 그 이외에 benzoic acid계 화합물인 protocatechuic acid도 단리 되었다. 단리된 화합물은 $^1H$- 및 $^{13}C$-NMR, NOE와 CI-MS 분석에 의해 화학구조를 구명하였다.
Dissolution profiles of ketoconazole in solid dispersion system (SDS) were investigated in the second fluid (pH 6.8) for the dissolution test (KPV). PVP K-30 and methyl cellulose were used as carriers in SDS, and chloroform as a solvent. Computer optimization technique was applied to obtain an optimum formula of SDS, and the following results were obtained; 1) Dissolution rate of ketoconazole in SDS was larger than that of pure ketoconazole in the second fluid of pH 6.8. 2) PVP K-30 and methyl cellulosr were good carriers for SDS of ketoconazole. Moerover PVP K-30 was better than methyl cellulose. 3) The optimum formula of ketoconazole SDS obtained from computer optimization technique was chloroform 175 ml, PVP K-30 5g and methyl cellulose 0.2g per 1g of ketoconazole. 4) The experimental value of $A_{60}$ (Amount released from ketoconazole tablet during 60 minutes) obtained from SDS by optimum formula agreed well with the value calculated by polynomial regression equation.
마늘의 메타놀 추출물을 클로로포름층과 수층으로 분획하여 각 추출물의 aflatoxin $B_1(AFB_1)$에 대한 항돌연변이 효과를 실험한 결과, Salmonella typhimurium TA98과 TA100에서 클로로포름층이 가장 효과가 크게 나타났다. 클로로포름층을 다시 silica gel column 및 thin layer 크로마토그라피를 사용하여 분리한 결과, 4개의 분획(ASC F1, 2, 3, 4)를 얻었는데, 이중 ASC F2가 $AFB_1$에 대해 항돌연변이 효과가 가장 컸었다. ASC F2로부터 18가지의 화합물이 GC-MS, NMR, FT-IR을 이용하여 잠정적으로 분리, 동정되었으며, 이중 methyl linoleate는 가장 다량으로 함유되어 있는 화합물이었다. Methyl linoleate 표준품의 항돌연변이 효과를 조사한 결과 효과가 매우 큰 것으로 나타났다.
Ixeris dentata was extracted with methanol and then the methanol extract was further fractionated to hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and aqueous fraction. The methanol extract of lxeris dentata had the strong antimutagenic effect on the aflatoxin B1(AFB1) and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) in Ames mutagenicity test and SOS chromotest. Among the solvent extracted fractions from the methanol extract, the chloroform fraction exhibited the greatest antimutagenic effect suppressing the mutagenicity of AFB1 with inhibition rate of 74 percent. The methanol extract of Ixeris dentata also revealed the inhibitory effect on the growth of MG-63 human osteosarcoma cells after 6 days of breeding at 37℃. The chloroform fraction and the ethyl acetate fraction from the methanol extract of lxeris dentata were most effective and inhibited the growth of MG-63 cells by 97 and 93 percent, respectively. It is suggested that the inhibitory effects of lxeris dentata on the mutagenicity and the growth of MG-63 human osteosarcoma cells are strong in the lipid soluble fractions.
Methanol extract of dried persimmon leaves was refractionated using hexane, chloroform, ethylacetate, n-butanol aqueous fractions. Among these chloroform fraction showed the highest inhibition rate on the mutagenicities of aflatoxin B₁(AFB₁) and 3,2' -dimethyl-4-amino-bipheny1(DMAB) in Salmonella typhimurium TA 100. Chloroform fraction was further fractionated into eight fractions by silica gel column chromatography and thin layer chromatography(TLC). The fraction 5 on TLC exhibited the highest antimutagenic activities in AFB₁and DMAB. 2,4-Decadienal, dihydro-4-methyl-2(3H)-furanone, hexanoic acid 1,4-bis(1-methy1 ethy1)benzene, heptanoic acid, phenol, octanoic acid, nonanoic acid and benzoic acid were tentatively identified from this antimutagenic fraction by GC-MS.
Novel antimicrobial substance was isolated from seed coat of Canavalia gladiata by extraction with 75% methanol. Isolation and purification were conducted with solvent fractionation and chromatography on silica gel and sephadex LH-20 columns. Each fraction of antimicrobial activity was tested by paper disc method. Single compound was obtained from the 4th fraction of sephadex LH-20 column chromatography using chloroform/methanol (1:4, v/v), and identified as 3,4,5-trihydroxybenzoic acid methyl ester (methyl gallate) based on HPLC, GC/MS, FT-IR, $^1H$ NMR, and $^{13}C$ NMR analyses. This is the first report describing the presence of methyl gallate in C. gladiata.
인삼중에 함유되어 있는 항산화물질의 본태를 파악하기 위하여 인삼의 각종 용매(petroleum ether, chleroform, chleroform-methanol, methanol 및 methanol-water)추출물들이 혼합 불포화지방산 메틸에스테르(MEUFA)의 자동산화에 미치는 영향을 in vitro에서 검토한 결과는 다음과 같다. 1. 인삼의 각종 용매 추출물들은 모두 항산화작용을 나타내어 MEUFA의 자동산화에 의한 지질 과산화물의 형성을 억제하였다. 그 중에서도 클로로포름 및 클로로포름-메탄올(2 : 1, v/v)추출물들이 보다 강한 항산화작용을 나타내었다. 2. Olcotte 등의 oven test에 의한 무게의 증가는 MEUFA의 자동산화에 의한 과산화물의 형성에 기인함이 확인되었다. 3. 인삼의 각 추출물들은 MEUFA의 지질 과산화물형성의 유도기간을 연장시켰다. 4. 각 추출물들의 항산화작용에 있어서 Olcott 등의 oven test에 의한 무게의 측정 Lea법과 Rhodan 철법에 의한 POV 측정 등의 결과에서 추정되는 작용은 상호간 잘 일치되었다. 이상의 결과로부터 인삼중에는 항산화물질들이 인삼성분으로서 함유되어 있음이 in vitro에서 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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