To improve the detection of methicillin resistant staphylococci, lowered incubation temperature (30.deg.) and inclusion of sodium chloride in media have been empirically recommended. However, in this study, we found that sodium chloride in Peptone-Yeast Extract-K$\_$2/HPO$\_$4/ (PYK) medium decreased methicillin minimum inhibitory concentrations. Divalent cations were shown to restore the expression of staphylococcal methicillin resistance. However, when it was determined by efficiency of plating, sodium chloride increased methicillin resistance expression on agar medium in which higher divalent cations were contained in the agar medium. The decrease of minimum inhibitory concentrations at 30.deg.C by sodium chloride occurred in Brain Heart Infusion but did not occur in other media investigated. Interestingly, both PYK and Brain Heart Infusion media had peptone, which contain cholic acids having detergent activities. Inclusion of sodium chloride in PYK caused a higher rate of autolysis. Penicillin binding protein 2a that has a low affinity to beta-lactam antibiotics, was highly inducible in methicillin resistant Staphylococcus epidermidis strains. In this study, we found that autolysins that are activated by the sodium chloride decreased the minimum inhibitory concentration at 30.deg.C, and peptidoglycan is weakened due to the presence of methicillin. Peptone in the media may aggravate the fragile cells. However, stabilization due to the presence of divalent cations and production of penicilin binding protein 2a increase the survival of staphylococci.
Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains are resistant to a wide range of antibiotics and are a major cause of nosocomial infections. Accurate and rapid typing of MRSA is needed to implement effective infection control measures. Arbitrarily Primed PCR (AP-PCR) is a very useful method in rapid typing. AP-PCR is not necessary information about target DNA sequence because this is basically DNA amplification and could be useful in epidemiological typing by classified band pattern. In this study, MRSA were isolated and identified from ICU, Neu, IM and Ped environments and investigated molecular typing by AP-PCR. Ped, the MRSA pattern determines the la, IIa type, 1M is Ib type, Neu is IIa type and ICU determines the IIa, lIb types. All MRSA in this study were typeable by AP-PCR, which was easy to perform and reproduce with evidence of MRSA for purposes of nosocomial infection control.
Fluoroquinolones have been extensively used in treatment or prevention of serious infections in humans and food-producing animals, especially in poultry, due to their broad-spectrum activity to both Gram-positive and -negative pathogens. However, the use of fluoroquinolones in poultry production selects for bacteria carrying genetic determinants for quinolone resistance. Here, we present the complete genome sequences of two methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains displaying quinolone resistance, which were isolated from healthy broilers in Korea.
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and methicillin-susceptible S. aureus (MSSA) are major causes of hospital- and community-acquired infections. The treatment of biofilm-related infections caused by these bacteria is a global healthcare challenge. Therefore, the development of alternative therapeutics is required. An essential oil extracted from Curcuma zedoaria (CZ) Rosc, also known as white turmeric, has been reported to possess various antimicrobial activities. In the present study, we evaluated the antibiofilm activities of an ethanolic extract of the CZ rhizome against MRSA and MSSA. The results showed that the CZ extract with the highest sub-minimum inhibitory concentration (sub-MIC), 1/2 MIC (0.312 mg/ml), significantly inhibited biofilm production by up to 80-90% in both tested strains. Subsequently, we evaluated the ability of the CZ extract to prevent cell-surface attachment to a 96-well plate and extracellular DNA (eDNA) release from the biofilm. The CZ extract demonstrated an inhibitory effect on bacterial attachment and eDNA release from the biofilm biomass. The CZ extract may inhibit biofilm formation by preventing eDNA release and cell-surface attachment. Therefore, this CZ extract is a potential candidate for the development of alternative treatments for biofilm-associated MRSA and MSSA infections.
A 1-year-old, male, captive born Burmese Python (Python molurus bivittatus) presented with cloudiness of the left eye after ecdysis. Based on physical examination and history, subspectacular abscess was diagnosed. The causative microorganism was identified as a methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). MRSA is a zoonotic problem of high concern and is a risk in public health and veterinary medicine. To our limited knowledge, this is the first reported case of MRSA infection in snakes.
We isolated marine actinomycetes, strain D-5 which produces anti-methicillin resistant Staphylococcus aureus (anti-MRSA) compound. Streptomyces sp. D-5 relatively grew well in the 20~25℃, pH 8.0, and NaCl 3.0%. The ethyl acetate extract of D-5 culture was separated by C18 ODS open column and reverse phase HPLC to yield anti-MRSA compound. The molecular weight of this compound was determined to be 898 by a Liquid chromatograph-mass spectrometer (LC-MS). Compared with penicillin G, this compound showed significant anti-MRSA activity. It also exhibited an inhibition zone of 26 mm at a concentration of 64 ㎍/disk and an inhibition zone of 16 mm at a concentration of 16 ㎍/disk against the MRSA KCCM 40511. Furthermore, the co-treatment of HPLC peak 5 compound and vancomycin caused a more rapid decrease in MRSA cells than each compound alone. It showed 86.8% growth inhibition activity within 12 hours at a low concentration of 50 ㎍/mL during co-treatment, and 97.1% growth in-hibition activity within 48 hours against MRSA KCCM 40511. Taken together, our results suggest that Streptomyces sp. D-5 and its anti-MRSA compound could be employed as a potent agent in MRSA infection.
Purpose : In the treatment of MRSA infection, rapid detection of MRSA is extremely important. The mecA gene codes the new drug resistant polypeptides called PBP2' which mediates the clinically relevant resistance to all beta-lactam antibiotics. The identical mecA gene has been found in coagulase-negative staphylococcus with the methicillin-resistant phenotype. On the other hand, the femA gene was absent from coagulase negative staphylococcus strains with the methicillin resistant phenotype. This study is aimed at early detection and definite diagnosis of MRSA. Methods : A total of 24 MRSA strains were studied. All strains were tested for antimicrobial susceptibility and purified DNA. We amplified both mecA and femA genes by PCR in 24 strains. Results : In MRSA all the 16 strains (100%) carried femA gene and 11 strains (68.7%) carried mecA gene. In contrast, in methicillin sensitive staphylococcus all the 8 strains (100%) carried femA and only 3 strains (37.5%) were detected mecA. Conclusions : As results, there are difference in the phenotype and genotype of methicillin resistance by PCR of mecA and femA. Such disparities between methicillin resistance and the presence of mecA gene suggest the presence of control gene of the mecA.
Objectives : Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) has a cephalosporin and beta-lactam antibiotic-resistant strains. MRSA is one of the major pathogens causing hospital infection and the isolation ratio of MRSA has gradually increased. Consequently, increased resistance to antibiotics is causing serious problems in the world. Therefore, there is a need to develop alternative antimicrobial drugs for the treatment of infectious diseases. Methods : The antibacterial activities of Ipyo-san were evaluated against 2 strains of MRSA and 1 standard Methicillin-susceptible staphylococcus aureus (MSSA) strain by using the disc diffusion method, minimal inhibitory concentrations (MIC) assay, colorimetric assay using MTT test, checkerboard dilution test and time-kill assay performed under dark. Results : The MIC of Ipyo-san water extract against S. aureus strains ranged from 1000 to $2,000{\mu}g/ml$, so we confirmed that it had a strong antibacterial effect. Also, the combinations of Ipyo-san water extract and conventional antibiotics exhibited improved inhibition of MRSA with synergy effect. We suggest that Ipyo-san water extract against MRSA has antibacterial activity so it has potential as alternatives to antibiotic agents. For the combination test, we used Triton X-100 (TX) and DCCD for measurement of membrane permeability and inhibitor of ATPase. As a result, antimicrobial activity of Ipyo-san water extract was affected by the cell membrane. Conclusions : We suggest that the Ipyo-san water extract lead the treatment of bacterial infection to solve the resistance and remaining side-effect problems that are the major weak points of traditional antibiotics.
This study was investigated to determine the prevalence of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) isolated from raw milk samples and to further study on the molecular characteristics of the MRSA isolates. Using Staphylococcus Medium 110, Staphylococcus spp. were isolated from raw milk samples and further identification was carried by Vitek2 system. Minimum inhibitory concentrations (MICs) of antibiotics were conducted by serial dilution method according to the Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) guideline. For the detection of resistance genes and molecular characterization, PCR reaction was performed by gene specific primers and followed by DNA sequencing. Of the 698 milk samples, 94 Staphylococcus aureus (S. aureus) were identified (94 S. aureus/286 Staphylococcus spp.). Of the 94 S. aureus, seven isolates have mecA, a methicillin resistant gene. mecA positive seven isolates were then characterized by staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) typing, and Panton-Valentine Leukocidin (pvl) gene using PCR. All of mecA positive isolates were resistant to ampicillin and oxacillin, but sensitive to teicoplanin, vancomycin and ciprofloxacin. One of seven isolates was SCCmec type II and six isolates were type IV and all seven isolates were pvl gene negative.
Methicillin-resistant Staphylococcus (MRS) can be colonized in various body sites and is more frequently isolated in healthcare associated persons. This study aimed to evaluate the contamination rate of MRS in a high school environment, those living with closed life style. Staphylococcus aureus was isolated from only the hands of 2 students among a sample of 28 students, and S. aureus were susceptible to methicillin antibiotics. Coagulase negative Staphylococci (CoNS) were isolated from the hands of 26 students (26/28, 92.9%), and among them, 14 (53.8%) isolates were methicillin-resistant CoNS (MRCoNS). Among the 14 MRCoNS, S. warneri was the most common (8/14, 57%) and susceptible to most $non-{\beta}-lactam$ antibiotics, such as clindamycin, erythromycin, ciprofloxacin, tetracycline, gentamicin, and vancomycin. In a culture of 31 desks, S. aureus was not isolated but CoNS were isolated from 26 desks (26/31, 83.6%), which did not harbor the mecA gene. The other bacteria isolated from the hands and desks were Micrococcus and Bacillus spp. In conclusion, methicillin-resistant S. aureus was not isolated from the hands and desks of high school students. However, the frequency of MRCoNS harboring mecA gene were high in the hands of high school students. Therefore, to prevent and to control the transfer of infection, intensifying preventive education, such as hand washing, and active surveillance systems, such as an investigation of contamination or carrier rate of resistant bacteria are necessary.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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