Pseudomonas veronii MS1과 P. migulae MS2는 여러 가지의 구리-내성 및 식물 생장 촉진 방법을 갖고 있으며 또한 스트레스 에틸렌의 전구체인 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC)의 ACC deaminase에 의한 가수분해를 통해 식물에서 비생물적 스트레스를 완화시킬 수 있다. 구리 농도 700 mg/kg 토양에서의 4주간 소규모 토마토 재배 실험에서 MS1과 MS2 접종은 비접종 대조군에 비해 토마토 식물의 지상부와 뿌리 길이 및 습윤중량과 건조중량을 모두 유의성 있게 증가시켰다. 접종 토마토 식물은 비생물적 스트레스로부터 식물을 보호할 수 있는 proline및 산화 스트레스 지표인 malondialdehyde도 비접종 대조군보다 적게 함유하였다. 에틸렌 생합성에 관여하는 ACC synthase 유전자, ACS4와 ACS6 그리고 ACC oxidase 유전자, ACO1와 ACO4는 구리 스트레스를 받는 토마토에서 강하게 발현된 반면 MS1과 MS2 접종 토마토에서는 유의성 있게 감소했다. 또한 금속 결합 단백질인 metallothionein 암호화 유전자인 MT2도 위의 유전자들과 유사한 발현 양상을 보였다. 이 모든 결과들은 이 근권세균들이 구리 스트레스 하의 토마토 식물에 구리 내성을 부여하여 낮은 수준의 구리 스트레스와 생장 촉진을 허용하는 것을 가리킨다.
This study was performed to investigate effect of dietary fibers in rice and barley on glucose, lipid and cadmium (Cd) metabolism in the rat. Fifty-six male Spague-Dawley rats weighing 244.6$\pm$2.7g were blocked into eight groups according to body weight and raised for four weeks with diets containing 0 or 0.04%(w/w) CdCl2 and four different carbohydrate sources, starch, rice flour, barley flour and mixture of rice and barley flour(7 : 3, w/w). Total dietary fibers and $\beta$-glucan contents of barley were about three times higher than those of rice (10.75% vs. 3.94%, 3.11% vs. 1.06%, respectively). Food intake, weight gain, food efficiency ratio, liver and kidney weights were lower in Cd exposed groups, and barley group among Cd exposed animals showed highest weight gain, food efficiency ratio and organ weights. Fasting serum glucose levels were not significantly different among groups, Serum cholesterol level was lowest in Cd exposed barley group. Serum HDL-cholesterol level was higher in none-Cd exposed starch and barley groups, and HDL-cholesterol : total cholesterol ratios were higher in none-Cd rice and mixed flour groups than other groups. Liver total lipid and triglyceride levels were lowest in barley groups regardless of Cd administration. Fecal total lipid, cholesterol and triglyceride excretions were high in barley and mixed flour groups. Liver Cd concentrations were low in Cd exposed barley and mixed flour groups. In Cd exposed barley group, fecal weight and Cd excretion were highest and Cd retention ratio was lowest among groups. Small intestine metallothionein(MT) concentration was highest in Cd exposed rice group, and kidney MT concentration was highest in Cd exposed barley group. In conclusion, cereals showed different effects on lipid and Cd metabolism that might be mediated by dietary fibers in cereals. Especially $\beta$-glucan-rich barley group showed greatest lipid and Cd lowering effects by increasing fecal lipids and Cd excretions.
카드뮴 (Cd)의 투여가 흰쥐의 임상적인 중독 정도와 청자능력 및 장기조직에 미치는 영향을 조사하였다. 카드뮴의 임상적인 중독증 유발을 위한 시험사료는 흰쥐용 purified diet(AIN-76)에 CdCl를 이용하여 Cd 농도가 각각 0, 25, 50, 100 및 250ppm이 되도록 첨가하였다. 생후 7주령 ( 평균체중 231$\pm$14g) 된 Sprague-Dawley계 웅성 흰쥐 30 수를 체중에 따라 완전임의 배치법으로 6수씩 5군으로 나누어 8주간 사육하였다. 중체량, 사료섭취량 및 음수량은 카드뮴 첨가수준이 높을수록 유의하게 감소한 것으로 나타났으며, 장기무게에 있어서 특히 신장과 정소의 무게는 카드뮴 첨가수준이 높을수록 비대하였고 처리구간 유의한 차이가 있었다 (P<0.05). Hematocrit 치와 hemoglobin 함량 역시 Cd 첨가수준이 높을수록 감소하였고 처리구간 유의한 차이가 있었다 (P<0.05). 식이중 카드뮴의 간과 신장조직에의 평균 축적율은 간 조직이 34.1%, 신장조직이 54.3% 이었고, 저수준의 Cd 투여군이 고수준의 Cd 투여군 보다 간과 신장조직에의 축적율이 대체로 높았다. 간 조직중 metallothionein(MT) 함량은 대조군 (A) 이 30.0 $\mu\textrm{g}$/g 인데 비해 250ppm 투여군 (E) 에서는 138.6 $\mu\textrm{g}$/g 으로 카드뮴 투여수준에 따라 MT 합성은 유의한 영향을 받은 것으로 나타났다. 정자농도는 대조군에 비해 Cd 투여수준에 따라 유의한 감소 경향 (P<0.05) 이었고, 정자 활력은 비록 통계적인 차이는 없었으나 대조군에 비해 Cd 투여군에서 낮은 경향이었다. 한편 카드뮴 투여가 조직병변에 미치는 결과를 보면 육안병변의 경우 대조군에 비하여 Cd l00ppm과 250ppm 투여군의 흰쥐에서 외관상 수척되어 있었고, 특히 250ppm 투여군의 흰쥐에서 신장과 고환의 현저한 위축이 관찰되었다. 병리조직학적 검사에서 Cd 투여군에서 간상간세포의 변성, 간세포와 간세포사이의 모세혈관이 sinusoid에서의 호산성물질의 저류 및 Kupffer cell의 활성화가 관찰되었다. 신장의 경우 Cd 투여군에서 세뇨관 상피세포의 변성 및 호염성병변이 관찰되었으며 고환에서는 Cd 투여 농도에 의해서 세포변성, 정자세포수의 감소 및 거핵세포의 출현이 관찰되었다. 따라서 카드뮴에 장기간 노출은 성선조직의 변화에 의해 정자활력 및 농도의 감소가 일어나고 이로 인해 번식효율이 저하되는 한 요인으로 작용되는 것으로 사료된다.
Nickel is the one of potent environmental, the occupational pollutants and the classified human carcinogens. It is a serious hazard to human health, when the metal exposure. To prevent human diseases from the heavy metals, it is seemingly important that understanding of how nickel exerts their toxicity and carcinogenic effect at a molecular and a genomic level. The process of nickel absorption has been demonstrated as phagocytosis, iron channel and diffusion. Uptaked nickel has been suggested to induce carcinogenesis via two pathways, a direct DNA damaging pathway and an indirect DNA damaging pathway. The former was originated from the ability of metal to generate Reactive Oxygen Species (ROS) and the reactive intermediates to interact with DNA directly. Ni-generated ROS or Nickel itself, interacts with DNAs and histones to cause DNA damage and chromosomal abnormality. The latter was originated from an indirect DNA damage via inhibition of DNA repair, or condensation and methylation of DNA. Cells have ability to protect from the genotoxic stresses by changing gene expression. Microarray analysis of the cells treated with nickel or nickel compounds, show the specific altered gene expression profile. For example, HIF-I (Hypoxia-Inducible Factor I) and p53 were well known as transcription factors, which are upregulated in response to stress and activated by both soluble and insoluble nickel compounds. The induction of these important transcription factors exert potent selective pressure and leading to cell transformation. Genes of metallothionein and family of heat shock proteins which have been known to play role in protection and damage control, were also induced by nickel treatment. These gene expressions may give us a clue to understand of the carcinogenesis mechanism of nickel. Further discussions on molecular and genomic, are need in order to understand the specific mechanism of nickel toxicity and carcinogenicity.
한국환경보건학회 2004년도 International Conference Current Challenges and Advances in Environmental Health
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pp.63-68
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2004
Immunohistochemical and ultrastructural experiments were conducted to find out heavy metal accumulation in some selected organs such as the kidney, the digestive gland, and the gill of the Antarctic clam Laternula elliptica and R. philippinarum. According to the immunohistochemical study the subject organs of the clam showed reactions indicating the presence of MT (metallothionein), a metal-binding protein involved in metal detoxifying process. Examination under the transmission electron microscope also revealed that other ligands may play a role in metal accumulating and detoxifying process in L. elliptica and R. philippinarum. In the artificial exposure of the clam to Cd, the clams showed immediate subcellular responses. The level of the anti-MT reactions became higher in the proportion to the degree of pollution of their habitat and to the period of Cd exposure. These suggest that the two species can be used as efficient biomarkers for Cd exposure in the natural environment.
As a step toward a more complete understanding of the molecular actions of TNF, we prepared a cDNA library from TNF-treated human FS-4 fibroblasts and used differential hybridization to identify cDNA clones corresponding to mRNAs enriched in TNF-treated eells. In Quiescent FS-4 cells n induces an increase in the level of some mRNAs within 20 to 30 min. Some of these immediate-early response mRNAs are elevated only transiently for about 30 to 120 min, e. g., c-fos and c-myc (Lin and Vilcek,1987) or the transcription factor IRF-1 (Fujita et al.1989). Such immediate-early gene products may be important for the activation of other genes, but their transient induction suggests that they are not the actual effector molecules responsible for the phenotypic changes induced by TNF. We chose a 3-h incubation with W because we were seeking cDNAs corresponding to messages that are more stably elevated after TNF treatment. Indeed, the results shown in Figure 8 and 9 indicate that all of the mRNAs corresponding to the eight TSG cDNAs isolated remained significantly elevated after 16h of continuous treatment with TNF, and their kinetics of induction were clearly different from those of the immediate-early response mRNAs such as c-fos, c-myc or IRF-1. Nevertheless, only the induction of TSG-21 (collagenase) and TSG-27 (stromelysin) nNAs was completely inhibited by cycloheximide and the induction of TSG-37 (metallothionein-II) was reduced in the presence of this inhibitor of protein synthesis. Induction of the other five TSG mRNAs by TNF was completelyresistant to cycloheximide, suggest ins that no protein intermediate is needed for the upregulation of these mRNAs.
This study was performed to invstigate the effect of dietary protein level and source on cadmium intoxicification in rats. Forty-eight male rats of Sprague-Dawley strain weighing 171$\pm$3g were blocked into 8 groups of 6 animals according to body weigth, and were raised for 30days. Eight experimental diets different with cadmium(0ppm, 400ppm)and protein(15%, 40%) levels and protein source[casien, I.S.P.(isolated soy protein)] were given to animals for 30days. Food intake, weight gain, food efficiency ratio, liver weight, kidney weight and femur weight were lower in cadmium added group, and higher in high protein groups(40% protein) than medium protein groups(15% protein). But, dietary protein source had no influence on them. Cadmium concerntration of liver was higher in rats fed casein than I.S.P. groups, and cadmium concentration in intestine was higher in high protein groups. In femur both high protein and I.S.P.diets increased cadmium concentrations. MT concdentrations in liver, kidney and intestine were higher in cadmium added group, and kidney intestine MT concentration were higher in high protein group. Absorption and retention rates of cadmium were lower in rat fed I.S.P. than animal fed casein among medium protein groups and cadmium concentration in blood and liver of I.S.P groups were lower than casein groups. But absorption and retention rates of cadmium were similar in high casein and I.S.P. groups. Renal damage by cadmium administration was not seen in all groups. Absorption rates of zinc and copper competing with cadmium in absorption process were lower in high protein groups than medium protein groups and lower in rats fed I.S.P. than casein. In conclusion, weight gain, F.E.R, and MT concentraion of high protein groups were higher than those of medium protein groups and absorption and retention rates of cadmium were lower in high protein groups. From these results, it was shown that cadmium toxicity was alleviated by high dietary protein. Meanwhile, the effect of dietary source on the cadmium toxicity was different with protein level. In medium protein groups absorption and retention rates of cadmium were much lower in rats fed I.S.P. than casein. In high protein groups, cadmium toxicity was not influenced by protein source and absorption and retention rates of cadmium were not different between casein and I.S.P. groups.
한국미생물생명공학회 2005년도 2005 Annual Meeting & International Symposium
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pp.154-164
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2005
Saccharomyces cerevisiae KNU5377 is a thermotolerant strain, which can ferment ethanol from wasted papers and starch at 40$^{\circ}C$ with the almost same rate as at 30$^{\circ}C$. This strain showed alcohol fermentation ability to convert wasted papers 200 g (w/v) to ethanol 8.4% (v/v) at 40$^{\circ}C$, meaning that 8.4% ethanol is acceptable enough to ferment in the industrial economy. As well, all kinds of starch that are using in the industry were converted into ethanol at 40$^{\circ}C$ with the almost same rate as at 30$^{\circ}C$. Hyperthermic cell killing kinetics and differential scanning calorimetry (DSC) revealed that exponentially growing cells of this yeast strain KNU5377 were more thermotolerant than those of S. cerevisiae ATCC24858 used as a control. This intrinsic thermotolernace did not result from the stability of entire cellular components but possibly from that of a particular target. Heat shock induced similar results in whole cell DSC profiles of both strains and the accumulation of trehalose in the cells of both strains, but the trehalose contents in the strain KNU5377 were 2.6 fold higher than that in the control strain. On the contrary to the trehalose level, the neutral trehalase activity in the KNU5377 cells was not changed after the heat shock. This result made a conclusion that though the trehalose may stabilize cellular components, the surplus of trehalose in KNU5377 strain was not essential for stabilization of whole cellular components. A constitutively thermotolerant yeast, S. cerevisiae KNU5377, was compared with a relatively thermosensitive control, S. cerevisiae ATCC24858, by assaying the fluidity and proton ATPase on the plasma membrane. Anisotropic values (r) of both strains were slightly increased by elevating the incubation temperatures from 25$^{\circ}C$ to 37$^{\circ}C$ when they were aerobically cultured for 12 hours in the YPD media, implying the membrane fluidity was decreased. While the temperature was elevated up to 40$^{\circ}C$, the fluidity was not changed in the KNU5377 cell, but rather increased in the control. This result implies that the plasma membrane of the KNU5377 cell can be characterized into the more stabilized state than control. Besides, heat shock decreased the fluidity in the control strain, but not in the KNU5377 strain. This means also there's a stabilization of the plasma membrane in the KNU5377 cell. Furthermore, the proton ATPase assay indicated the KNU5377 cell kept a relatively more stabilized glucose metabolism at high temperature than the control cell. Therefore, the results were concluded that the stabilization of plasma membrane and growth at high temperature for the KNU5377 cell. Genome wide transcription analysis showed that the heat shock responses were very complex and combinatory in the KNU5377 cell. Induced by the heat shock, a number of genes were related with the ubiquitin mediated proteolysis, metallothionein (prevent ROS production from copper), hsp27 (88-fold induced remarkably, preventing the protein aggregation and denaturation), oxidative stress response (to remove the hydrogen peroxide), and etc.
본 연구는 한국 재래닭에서 Zn 보충제 급여가 체내 항산화 지표 및 아연운반체 발현에 미치는 영향을 조사하기 위하여 기초사료(100 ppm, 대조군)에 산화아연(ZnO) 또는 Zn-methionine(ZnM)을 각각 50 ppm을 첨가하여 모두 3개군으로 설정하여 4주간 사양시험을 실시하였다. 혈중 total protein, albumin, blood urea nitrogen과 같은 질소화합물은 처리군들 간 차이가 없었으나, uric acid는 ZnM군에서 ZnO군보다 유의하게(P<0.05) 증가되었다. 혈액의 총 항산화능과 지질과산화도에서는 아연의 급여원에 따른 차이는 없었다. 소장에서 항산화 효소 활성도 및 지질과산화도를 조사한 결과, superoxide dismutase(SOD), glutathione peroxidase(GPX) 및 지질과산화도는 아연의 보충급여 및 급여원에 따른 차이는 없었으나, glutathione S-transferase (GST) 활성도는 ZnM군에서 대조군에 비해 현저히(P<0.05) 증가되었다. 간 조직에서 SOD와 GPX 활성도 및 지질과산화도는 처리군간 비슷한 수준을 보였으나, GST는 ZnM군에서 대조군에 비해 현저히(P<0.05) 증가하였다. 소장 흡수세포에서 아연 운반단백질 ZnT-1(8.62배 P=0.09) 및 ZnT-5(7.3배, P=0.06) mRNA 발현은 ZnM군에서 증가되는 경향은 보였으나, 통계적 차이는 인정되지 않았다. 간에서 아연운반체 mRNA 발현은 아연급여에 따른 통계적 차이는 없었으나, ZnM군에서 대조군에 비해 MT mRNA 발현이 4.12배 증가되는 경향(P=0.10)을 보였다. 이상의 결과로 보아 기초사료에 Zn-methionine 보충급여(50 ppm)는 재래닭의 소장 및 간 조직에서 GST 활성도를 유의하게 증가시키고, 소장에서 아연운반체 mRNA 발현을 증가시키는 경향을 보여 유기태 아연급여는 체내 산화적 스트레스 방어 긍정적인 영향을 미칠 수 있는 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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