Candida albicans is an opportunistic human pathogen that causes infections. Candidiasis is often related to antifungal resistance because the pathogen has the ability to form biofilms. In a previous study, we found that the Salvia miltiorriza ethanol extract demonstrated anticandidal activity by altering membrane permeability and inhibiting the cell wall synthesis in C. albicans. Our results here demonstrate that $78{\mu}g/ml$ of the S. miltiorriza extract significantly diminished the early stage biofilms formed by 10 clinical C. albicans isolates by 51.3%; this was analyzed by 2,3-Bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide salt (XTT) reduction assay. The effect of the S. miltiorrhiza extract on the adhesion of C. albicans cells to polystyrene plates and germ tube formation was examined via microscopic investigation. Although the density of the adhered cells was remarkably reduced up on incubation with $39{\mu}g/ml$ S. miltiorrhiza extract, germ tube formation by C. albicans was rarely affected. Quantitative real-time PCR analysis showed that the S. miltiorrhiza extract downregulated the expression of C. albicans hypha-specific genes, EAP1 by 34.7% (p < 0.001), ALS1 by 45.0% (p < 0.001), ALS3 by 48.1% (p < 0.001), and ECE1 by 21.3% (p = 0.006), respectively. Our data suggest that the S. miltiorrhiza ethanol extract significantly inhibited the early stage of biofilm formation by C. albicans by interfering with cell adhesion, by downregulating EAP1, ALS1 and ALS3, and presumably by modifying the cell wall and membrane structure.
Objectives : Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is a cephalosporin and beta-lactam antibiotic-resistant strains. In most cases, that is spread from infected patients and infection rates are growing increasingly. Thus, accordingly, increased resistance to antibiotics is causing serious problems in the world. Therefore, there is a need to develop alternative antimicrobial drugs for the treatment of infections diseases. Methods : The antibacterial activities of Sinhyowoldosan were evaluated against 3 strains of Methicillin-resistant staphylococcus aureus(MRSA) and 1 standard Methicillin-susceptible S. aureus (MSSA) strain by using the disc diffusion method, minimal inhibitory concentrations (MICs) assay, colorimetric assay using MTT test, checkerboard dilution test and time-kill assay was performed under dark. Results : The MIC (minimum inhibitory concentration) of Sinhyowoldosan water extract against S. aureus strains ranged from 500 to 2,000 ${\mu}g/mL$, so we have confirmed it on a strong antibacterial effect. Also, the combinations of Sinhyowoldosan water extract and conventional antibiotics exhibited improved inhibition of MRSA with synergy effect. We suggest that Sinhyowoldosan water extract against MRSA have antibacterial activity, it has potential as alternatives to antibiotic agent. the combination test was used, Triton X-100 (TX) and DCCD for measurement of membrane permeability and inhibitor of ATPase. As a result, antimicrobial activity of SH is affected by the cell membrane were assessed. Conclusion : We suggest that the Sinhyowoldosan water extract lead the treatment of bacterial infection to solve the resistance and remaining side-effect problems that are the major weak points of traditional antibiotics.
Na Yeong Hun;Bak Sang Beom;Jeong Seung Won;Yun Jong Min;Lee In;Moon Byung Soon
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.18
no.3
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pp.774-782
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2004
The water extract of Dancheonhwan (DCH) has been used to treat ischemic brain and heart damage in oriental medicine. However, little is known about the mechanism by which the water extract of DCH rescues cells from ischemic damage. Therefore, this study was designed to investigate the protective mechanisms of DCH on the H₂O₂-induced toxicity in H9c2 cardiomyoblast cells. Treatment of H₂O₂ markedly decreased the viability of H9c2 cardiomyoblast in a dose-dependent and time-dependent manner. The nature of H₂O₂-induced toxicity of H9c2 cells resulted from apoptotic death confirmed with genomic DNA fragmentation. DCH increased the viability of H₂O₂-treated H9c2 cells by about 23%, and partially suppressed the genomic DNA fragmentation and PARP cleavage. H₂O₂ also activated caspase-3 protease and -9 protease, but not both caspase-6 protease and -8 protease. H₂O₂ induced the mitochondria dysfunction, including mitochondria membrane permeability transition (MPT) and cytosolic release of cytochrome c from mitochondria, which was prevented in part by pretreatment of DCH. N-acetylcystein (NAC), a free-radical scavenger, alone increased the viability of H₂O₂-treated H9c2 cells in a dose-dependent manner. Furthermore, the combination of NAC with DCH significantly increased the viability of the H₂O₂-treated H9c2 cells in a dose-dependent manner. These data indicate that DCH has the protective effect on ROS-induced apoptosis of cadiomyoblast H9c2 cells.
The mechanism of stomatal closing in response to $O_2$ was indirectly investigated by using $H_2O_2$ which is the intermediate product of $O_2$ metabolites. Stomata in epidermal strips close in response to $H_2O_2$. The effect of $H_2O_2$ on stomatal closing was dependent on the concentration of $H_2O_2$. 10 ppm $H_2O_2$ showed a clear effect on stomatal closing and 1000 ppm $H_2O_2$ induced complete stomatal closing after the treatment of 3 hours. Stomatal closing by $H_2O_2$ in intact leaf was also observed by measuring the diffusion resistance with porometer. It was found that the stomatal closing by $H_2O_2$ was not mediated by $Ca^{2+}$, and that was a different result observed in stomatal closing by water stress. Reversely, $Ca^{2+}$ showed a great inhibition on stomatal closing. The leakage of K+ in epidermal strips was doubled in response to $H_2O_2$ when it was campared to the control. 10 ppm $H_2O_2$ decreased photosynthetic activity. Fv/Fm representing the activity of Photosystem II was reduced about 4 % in 10 ppm $H_2O_2$ and 8 % in 100 ppm $H_2O_2$ In the treatment of 1.5 hour. However, stomatal closing by 10 ppm $H_2O_2$ was reduced about 56 %. According1y, it can be suggested that stomatal closing by $H_2O_2$ is related with the decrease of photosynthetic activity, but it was chiefly induced by the change of the membrane permeability. Key words Commelina communis, stomatal closing, $H_2O_2$, $Ca^{2+}$, photosynthesis.
Ultraviolet radiation have much influenced with a deep wrinkles, roughness, laxity of skin damage and pigmentation through oxidative stress and oxidative photo-damage. This study investigates the functional properties of hydrogel facial mask sheets made from agar, Styela clava tunics and Broussonetia papyrifera tunics. The skin of S. clava is covered with a hard cellulose containing glycoprotein, glycosaminoglycan and chondroitin sulfate. B. papyrifera is better known as Paper mulberry. It contains kazinol which serves as a tyrosinase inhibitor and skin whitening agent. The tensile strength of facial mask sheet was measured by universal testing machine, and the water absorption and moisture permeability of facial mask sheet were measured by dryer. Additionally, the DPPH assay and MTT assay were conducted for anti-oxidative activity and cytotoxicity of facial mask sheet. The whitening effect of the facial mask sheet was measured by tyrosinase inhibitor assay. These tests showed that the three ingredients are suitable cosmetic materials. The results reveal that they produce a high quality hydrogel facial mask sheet when the membrane contains 1%(W/V) of agar, 0.1%(W/V) of B. papyrifera tunics and 0.05%(W/V) of S. clava tunics.
Jeong Jae Eun;Yu Bong Seon;Park Jin Yeong;Jeon In Cheol;Park Sang Beom;Lee Dae Yong;Lee Min Goo;Lee In;Moon Byun Soon
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.18
no.6
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pp.1733-1739
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2004
The water extract of Hwangryunhaedog-tang(HRHDT} has been traditionally used for treatment of ischemic heart and brain damage in oriental medicine. However, little is known about the mechanism by which the water extract of HRHDT rescues cells from these damages. This study was designed to investigate the protective mechanisms of HRHDT on hypoxia-induced cytotoxicity in H9c2 cardiomyoblast cells. Hypoxia, markedly decreased the viability of H9c2 cells, which was characterized with apparent apoptptic features such as chromatin condensation as well as fragmentation of genomic DNA and nuclei. However, HRHDT significantly reduced hypoxia-induced cell death and apoptotic characteristics. Also, HRHDT prevented the mitochondrial dysfunction including the disruption of mitochondria membrane permeability transition (MPT) and an increase in expression of anti-apoptotic Bcl-2 proteins in hypoxia-H9c2 cells. Taken together, this study suggests that the protective effects of the water extract of HRHDT against hypoxic damages may be mediated by the modulation of Bcl-2 and Bak expression.
Gug Yun Jai;Choi Hyuk;Kim Tae Heon;Kang Hyung Won;Lyu Young Su
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.18
no.5
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pp.1418-1425
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2004
The water extract of Chongmyung-tang has been traditionally used for treatment of memory-disorder in oriental medicine. This study was designed to investigate the protective mechanisms of Chongmyung-tang on β-amyloid or H₂O₂-induced cytotoxicity in Neuro 2A cells. The water extract of Chongmyung-tang significantly reduced both β-amyloid or H₂O₂-induced cell death and apoptotic characteristics through reduction of intracellular peroxide generation. Also, it inhibited the mitochondrial dysfunction including the disruption of mitochondria membrane permeability transition(MPT) and the modulation in expression of Bcl-2 family proteins in H₂O₂-treated H9c2 cells. Furthermore, pretreatment of quercetin inhibited the activation of caspase-3, in turn, degradation of ICAD/DFF45 were completely abolished in H₂O₂-treated cells. Taken together, that data suggest that the protective effects of the water extract of Chongmyung-tang against β-amyloid induced oxidative injuries may be achieved through modulation of mitochondrial dysfunction.
4-Hydroxybenzaldehyde, a phenolic compound found in a variety of natural sources, was previously shown to contain anti-inflammatory and related anti-angiogenic and anti-nociceptive activities. The present work was designed to assess some pharmacological activities of 2,4-dihydroxybenzaldehyde (DHD), an analogue of 4-hydroxybenzaldehyde. DHD exhibited a significant inhibition in the chick chorioallantoic membrane (CAM) angiogenesis, and its $IC_{50}$ value was $2.4\;{\mu}g/egg$. DHD also contained in vivo anti-inflammatory activity using acetic acid-induced permeability and carrageenan-induced air pouch models in mice. In the air pouch model, DHD showed significant suppression in exudate volume, number of polymorphonuclear leukocytes and nitrite content. DHD showed an anti-nociceptive activity in the acetic acid-induced writhing test in mice. It also suppressed enhanced production of nitric oxide (NO) and elevated expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 macrophage cells. It was able to slightly decrease the level of reactive oxygen species in the stimulated macrophages. DHD at the used concentrations couldn't modulate the viabilities of RAW264.7 cells. Taken together, like 4-hydroxybenzaldehyde, DHD contains anti-angiogenic, anti-inflammatory and anti-nociceptive activities.
International Journal of Vascular Biomedical Engineering
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v.3
no.2
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pp.1-9
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2005
Flow-induced dilation of blood vessel is the result of a series of bioreaction in vascular endothelial cells(VEC). Shear stress change by blood flow in human artery or vein is sensed by the mechanoreceptor and responsible for such a chain reaction. The inositol(1,4,5)-triphophate($IP_3$) is produced in the first stage to elevate permeability of the intercellular membrane to calcium ions by which the cytosolic calcium concentration is consequently increased. This intracellular calcium transient triggers synthesis of EDRF and prostacyclin. The mathematical model of this VEC calcium dynamics is reproduced from the literature. We then use the Computational Fluid Dynamics(CFD) technique to investigate the blood stream dictating the VEC calcium dynamics. The pulsatile blood flow in a stenosed blood vessel is considered here as a part of study on thrombogenesis. We calculate the pulsating shear stress (thus its temporal change) distributed over the stenosed artery that is implemented to the VEC calcium dynamics model. It has been found that the pulsatile shear stress induces larger intracellular $Ca^{2+}$ transient plus much higher amount of EDRF and prostacyclin release in comparison with the steady shear stress case. It is concluded that pulsatility of the physiological shear stress is important to keep the vasodilation function in the stenosed part of the blood vessel.
For the enzymatic conversion of 5'-XMP to 5'-GMP, partially purified XMP aminase from Escherichia coli was coupled with the yeast, Saccharomycrs cerevisiae, capable of ATP regeneration through glycolytic pathway. In order to elevate the level of XMP aminase in E. coli, $guaB^{-}(IMP\;dehydrogenase-less)$ mutant were introduced, and the yeast used as ATP supplier was treated by some method to increase its membrane permeability. The optimum conditions for efficient conversion reaction by energy-coupled system were investigated. As the results, a CH 41, $guaB^-$ mutant of E. coli K-12, showed 2.75 fold increase in the level of XMP aminase, compared with its parent cell. And the lyophylized yeast was the most effective at the ATP supplier. The optimum temperature and pH of conversion reaction were $40{\circ]C$ and pH 7.4, and the highest conversion ratio was shown under the reaction condition of 100 mM glucose, 100 mM inorganic phosphate and 6 mM AMP. When 36 units/ml XMP aminase used under the above conditions, the amount of 60 mg/ml yeast was sufficient to be used. Under the optimum condition, 71% of 1.8 mM(65.6 mg/100 ml) 5'-XMP was converted to 5'-GMP within 8 hr.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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